FACULDADE SANTO AGOSTINHO

CURSO DE FARMÁCIA
BIOTECNOLOGIA E BIOLOGIA MOLECULAR
GUILHERME SOUZA SILVA

RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA I

VISUALIZAÇÃO DE DNA EXTRAÍDO DA MUCOSA BUCAL

Montes Claros – MG
MARÇO/2022
Introdução

Muitos alunos pensam que é olhando no microscópio, observando e

manipulando os cromossomos que os cientistas trabalham com o DNA. No
entanto, a observação do DNA ao microscópio não é a forma de análise que
permite estabelecer as diferenças ou similaridades entre indivíduos e
compreender as formas básicas de investigar o DNA. Então, como se estuda o
DNA?
Os cientistas desenvolveram protocolos de extração, análise e
manipulação do DNA. Tais protocolos desenvolvidos para as atividades de
pesquisa são em geral demorados e exigem equipamentos específicos e
reagentes caros.
No entanto, podemos realizar atividades práticas usando de modelos e
simulações de fácil execução, que utilizam produtos e utensílios de cozinha
para uma demonstração mais próxima dos passos essenciais que fazem parte
das técnicas usadas em laboratório de Biologia Molecular para o isolamento
dessas macromoléculas.

Materiais e métodos

Material de uso geral:

 Detergente incolor
 Álcool (70 a 100%)
 Sal
 Água
 Corante azul escuro (anilina)
 Béquer de 600mL

Material por bancada:

 1 copo de vidro
 1 béquer de 200mL
 1 colher de sopa
 2 bastões de vidro
 1 tubo de ensaio
 Palitos de picolé
Procedimento:

1. Colocou-se 2 copos de água no béquer de 600mL;

2. Acrescentou-se 1 colher de sopa de sal de cozinha. Mexeu-se bem afim de

se obter uma mistura homogênea! O sal adicionado na solução de lise age na
desnaturação das proteínas que se tornam insolúveis e podem ser
precipitadas. Essa foi a mistura 01;
3. Retirou-se 3 colheres da mistura 01 e colocou-se no copo de vidro;

4. Fez-se o bochecho com a mistura 01 por 1 minuto afim de obter-se a mistura

02, composta por água, sal e saliva.

5. Adicionou-se uma gota de detergente à mistura 02. O detergente irá

desorganizar as membranas celulares (lipoproteicas), inclusive a membrana
nuclear. Assim as células se rompem e os ácidos nucleicos vão para a solução.
Além disso, tanto o detergente quanto o sal atuam desnaturando as proteínas.
Consequentemente o detergente e o sal irão atuar também na dissociação dos
complexos ácidos nucleicos-proteínas (que formam os cromossomos),
resultando no isolamento de ácidos nucleicos mais puros. Mexeu-se essa
mistura com bastante cuidado para não fazer espuma, e então transferiu-se a
mistura 02 para o tubo de ensaio.
6. No béquer de 200mL, misturou-se 100 mL de álcool e algumas gotinhas de
corante, obtendo assim a mistura 03! O DNA é solúvel em meio aquoso e
insolúvel em etanol. Consequentemente, ao entrar em contato com o etanol, os
ácidos nucleicos precipitam na forma de filamentos esbranquiçados e podem
ser visualizados.

7. Adicionou-se a mistura 03 (álcool+corante) na mistura 02 (água e saliva) que

está no tubo de ensaio vagarosamente.

8. Esperou-se 2 a 5 minutos e o DNA pode ser visualizado.