Ministério da Educação

Universidade Tecnológica Federal do Paraná

Câmpus Londrina
Diretoria de Graduação e Educação Profissional
Coordenação de Tecnologia em Alimentos

Fluxograma da Técnica de Contagem de Listeria monocytogenes em alimentos

Método de plaqueamento (ISO 11290-2:1998/Amendment 1:2004)

25 g amostra
+
225 mL água peptonada
tamponada (BPW) 10-1 20±2ºC / 1 h

0,3 mL 0,3 mL 0,3 mL 0,1 mL

Ágar Listeria Ottaviani

& Agosti (ALOA), por
37ºC/24-48h superfície.

Colônias típicas verde azuladas com halo opaco

(5 colônias de cada placa)

Estrias de esgotamento
37ºC/18-24 h em Ágar Tripticase de
Soja Extrato de
Levedura (TSA-YE)
Confirmação

Catalase Gram Hemólise Fermentação Motilidade Camp-Test

(+) (+) (+) Xilose (-) (opcional) (opcional)
Rhamnose (+)

Expressar resultado em UFC/g ou

UFC/mL*
* Para o cálculo dos resultados, utilizar a seguinte fórmula abaixo, descrita pela ISO
7218:2007/Amd 1:2013:
UFC/g =  a / [v x (n1 + 0,1 x n2) x d]
Onde:
a = (b x C / A), sendo C = nº de colônias típicas presentes em cada placa selecionada para
contagem;
A = nº de colônias típicas submetidas à confirmação (geralmente cinco);
b = nº de colônias típicas confirmadas, dentre as que foram submetidas à confirmação.
v = volume inoculado em cada placa
n1 = nº de placas contadas da primeira diluição selecionada
n2 = nº de placas contadas da segunda diluição selecionada
d = primeira diluição retida para contagem (100=1; 10-1=0,1; 10-2=0,01)

ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and
guidance for microbiological examinations, 3rd ed. 2007. The International Organization for
Standardization.
ISO 11290-2. 7937. Microbiology of food and animal feeding stuffs – horizontal method for
the detection and enumeration of Listeria monocytogenes – Part 2: Enumeration method, 1st
ed. 1998, Amendment 1, 2014. Geneva: The International Organization for Standardization,
2004.