Ministério da Educação

Universidade Tecnológica Federal do Paraná

Câmpus Londrina
Diretoria de Graduação e Educação Profissional
Coordenação de Tecnologia em Alimentos

Fluxograma da Técnica de Contagem de Clostridium perfringens

Método de plaqueamento (ISO 7937:2004)

1 mL
1 mL

225 mL água destilada

peptonada 0,1% +
25 g amostra. 9mL ADP 0,1%

10-1 10-2 10-3

Ágar Triptose Sulfito
1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL Cicloserina (TSC),
com sobrecamada,
(sem gema de ovo)
Anaerobiose
37ºC/20h
Sem inverter
Leitura das colônias características – colônias pretas
Expressar resultado em UFC/g ou UFC/mL

Meio de Tioglicolato
37ºC/18-24 h
(TGM) previamente
(anaerobiose)
desaerado

Provas bioquímicas
 Opção 1 Opção 2
5 gotas do TGM 1 alçada do TGM
Caldo Lactose Sulfito
(LS) Meio Lactose Ágar Nitrato
46±0,5ºC/18-24h Gelatina Motilidade
37ºC/24-48h 37ºC/24h

Tubos com
escurecimento e Fermentação lactose + Nitrato +
produção de gás Hidrolise Gelatina + Motilidade -

Contagem de Clostridium perfringens

UFC/g

CUIDADO! O Ágar Triptose Sulfito Cicloserina (TSC) permite o crescimento e produção de

toxina de C. botulinum, não havendo distinção entre suas colônias e as colônias dos demais
clostrídios sulfito-redutores.

ISO 7937. Microbiology of food and animal feeding stuffs – horizontal method for the
enumeration of Clostridium perfringens – Colony-count technique, 3rd ed. The International
Organization for Standardization, 2004.