Bioquímica Geral

4. Proteínas

http://puesoccurrences.wordpress.com/2009/07/

Dora Martins Teixeira

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 Proteínas
Constituintes essenciais de todos os organismos.

Macromoléculas mais abundantes nos sistemas

biológicos.

Estão envolvidas em quase todas as propriedades

estruturais e funcionais dos seres vivos.

São constituídas por associações dos 20

aminoácidos. Podem ter desde 51 a 4636 resíduos
de aminoácidos.
 Funções Biológicas das Proteínas
Estruturais- Função de protecção e suporte.
Exemplos: Colagénio, queratinas e fibroína.
Catalíticas- Aumentam a velocidade das reacções biológicas
(pode aumentar até 1012 vezes). Exemplos: Enzimas.
Transporte- Transportam várias moléculas essenciais.
Exemplos: Hemoglobina, Proteínas de membrana.
Reserva- Armazenam energia.
Exemplos: Caseína, ovalbumina, lactoalbumina.
Movimento- Estão envolvidas no movimento de uma forma
geral. Exemplos: Actina e Miosina no músculo.
Defesa- Proteínas do sistema de defesa dos seres vivos.
Exemplos: Imunoglobulinas do sistema imunitário.
Regulação- Funções endócrinas (reguladores do metabolismo).
Exemplos: Insulina.
 Classificação das proteínas quanto à sua
composição
Proteínas simples ou haloproteínas:
Constituídas apenas por aminoácidos.

Proteínas conjugadas ou heteroproteínas:

Para além dos resíduos de aminoácidos contêm grupos não
proteícos, chamados grupos prostéticos - resíduos não
aminoacídicos que desempenham uma função importante.

Exemplos: Glicoproteínas, lipoproteínas, fosfoproteínas,

hemoproteínas, metaloproteínas, etc.
 Heteroproteínas : parte proteíca + parte prostética

Fosfoproteínas- contêm ácido fosfórico a esterificar as

funções álcool dos aminoácidos serina e treonina .
Exemplos: Caseínas do leite, vitelina, vitelinina e fosvitina da gema de
ovo.
Nucleoproteínas- O grupo prostético é um acido nucleico.
Exemplos: Desoxirribonucleoproteínas (histonas + DNA);
Ribonucleoproteínas (ribossomas- associações de RNA e proteínas).

Cromoproteínas- proteínas coradas cujo grupo prostético

contém muitas vezes um ião metálico
Exemplos: Proteínas com Fe, Cu e Mg.
 Heteroproteínas : parte proteíca + parte prostética

Glicoproteínas- proteínas que incluem na sua molécula

resíduos glucídicos (glicanos) ligados à cadeia polipeptídica.
Exemplos: Ovalbumina, fibrinogénio, imunoglobulinas.

Lipoproteínas- complexos de proteínas e lípidos que

permitem o transporte de colestrol, triglicéridos e
fosfolípidos na circulação sanguínea.
Exemplos: VLDL, HDL, LDL.
Classificação das proteínas quanto à sua forma

Fibrosas Globulares

Desempenham papéis Apresentam um enrolamento

estruturais e de transporte. que lhes confere uma forma
São insolúveis em água e em aproximadamente esférica.
soluções salinas díluidas. Exemplos:
Exemplos: •Mioglobina
•Queratina (Cabelo e lã). •Hemoglobina
•Colagénio do tecido conjuntivo
(Cartilagem, medula, pele, vasos
sanguíneos, etc.)

Adaptado de: NELSON, D., COX, M. (2004). LEHNINGER PRINCIPLES OF BIOCHEMISTRY, W. H. FREEMAN.
Níveis de organização estrutural das
proteínas

Adaptado de: NELSON, D., COX, M. (2004). LEHNINGER PRINCIPLES OF BIOCHEMISTRY, W. H. FREEMAN.
 Estrutura Primária das Proteínas
Estrutura mais simples das proteínas: Sequência linear de resíduos de
aminoácidos, ligados por ligação peptídica, no sentido do N-terminal
(grupo amina) para o C-terminal (grupo carboxilo).
Consiste na sequência específica de resíduos de aminoácidos da cadeia
polipeptidica, a qual é ditada pela informação contida nos genes.
 Estrutura Primária das Proteínas
Estrutura Primária da Insulina Bovina
Primeira estrutura primária de uma proteína que foi determinada

Por vezes a estrutura primária de algumas proteínas é

também mantida por ligações por pontes de
dissulfureto entre resíduos do aminoácido cisteína.

Adaptado de : Moore, J. and Langley, R. (2008). BIOCHEMISTRY FOR DUMMIES, Wiley Publishing, Inc.
 Estrutura Primária das Proteínas
Estrutura Primária da Ribonuclease Pancreática Bovina

Adaptado de: GARRETT,R., H., GRISHAM, C. M.,(2001). Principles of Biochemistry With a Human Focus, Brooks Cole.
 Estrutura Secundária das Proteínas
Resulta de rotações em torno de ligações adjacentes à
ligação peptídica

Adaptado de: GARRETT,R., H., GRISHAM, C. M.,(2001). Principles of Biochemistry With a Human Focus, Brooks Cole.
 Estrutura Secundária das Proteínas
Rearranjos tridimensionais formados por estabelecimento de
pontes de H entre grupos C=O e N-H da ligação peptídica

Adaptado de: www.answers.com/topic/alpha-helix

 Estrutura Secundária das Proteínas
Estrutura α-hélice
Estabilizada por ligações por pontes de H
entre grupos C=O e N-H do mesmo segmento
da cadeia peptídica.
Estrutura Folha Pregueada β
Estabilizada por ligações por pontes de H
entre grupos C=O e N-H de segmentos
diferentes da cadeia peptídica.

Adaptado de: NELSON, D., COX, M. (2004). LEHNINGER PRINCIPLES OF BIOCHEMISTRY, W. H. FREEMAN.
 Estrutura Secundária das Proteínas
Estrutura α-hélice
✓ Um dos elementos de estrutura secundária mais abundante nas proteínas.
✓ A estrutura α (hélice) é estabilizada por pontes de H entre o grupo C=O e N-H a
uma distância de 4 resíduos de aminoácidos (n+4).
✓ Todos os grupos amina e carbonilo estão envolvidos nas ligações por ponte de H,
excepto o grupo amina do primeiro resíduo e o grupo carbonilo do último resíduo da
hélice.
✓ Cada volta da hélice α inclui 3,6 resíduos de aa e 14 átomos da cadeia principal.
A- Estrutura α-hélice (esquerda)
Espiral em hélice no sentido dos ponteiros do relógio

B- Estrutura α-hélice (direita)

Espiral em hélice no sentido contrário ao dos ponteiros do
relógio.
Mais comum porque não gera impedimentos estéreos.
Estrutura Secundária das Proteínas
Estrutura Pregueada β

✓ É, tal como a hélice α , um elemento de estrutura

secundária predominante nas proteínas.
✓ É constituída por cadeias polipeptídicas em
conformação β (ziguezague). As cadeias em ziguezague
estão dispostas paralelamente.
✓ A estrutura pregueada β é estabilizada por pontes de
H entre o grupos C=O e N-H pertencentes a resíduos de
aminoácidos relativamente distantes na sequência
polipeptídica, mas próximos espacialmente.
✓Quando duas cadeias β seguem no mesmo sentido,
formam uma folha β paralela, quando seguem em
sentidos opostos, formam uma folha β antiparalela.
Adaptado de: NELSON, D., COX, M. (2004). LEHNINGER PRINCIPLES OF BIOCHEMISTRY, W. H. FREEMAN.
 Estrutura Super-Secundária do Colagénio
✓ Proteína mais abundante nos mamíferos.
✓Principal proteína do tecido conjuntivo.
✓ Existe também no tecido fibroso da pele, ossos, cartilagens e
dentes.
✓ A estrutura do colagénio é uma estrutura secundária especial
que lhe confere rigidez.
✓Tipicamente é constituído por 35% Gly, 11% de Ala, 21% de
Pro e 4- Hyp (4- hydroxyprolina).
✓ A estrutura super-secundária em tripla hélice é formada por
três cadeias helicoidais, cadeias α , em forma de trança.
✓ A tripla hélice é estabilizada por ligações de H entre o grupo
N-H de Gly e o grupo C=O de Pro; repetidas de 3 em 3 resíduos.

Adaptado de: GARRETT,R., H., GRISHAM, C. M.,(2001). Principles of Biochemistry With a Human Focus, Brooks Cole.
 Estrutura Fibras de Colagénio

Adaptado de: GARRETT,R., H., GRISHAM, C. M.,(2001). Principles of Biochemistry With a Human Focus, Brooks Cole.
 Estrutura Terciária das Proteínas
Estabelecida por :
Rearranjos tridimensionais que -Ligações por ponte de H.
conferem uma forma mais esférica -Ligações covalentes dissulfureto.
à proteína (característica das -Interacções iónicas.
proteínas globulares). -Forças de Van der Walls.
-Interacções hidrofóbicas.

Estrutura Terciária da Quimotripsina

Adaptado de: GARRETT,R., H., GRISHAM, C. M.,(2001). Principles of Biochemistry With a Human Focus, Brooks Cole.
Tipos de Estrutura Terciária das Proteínas

α β α+β

Adaptado de: NELSON, D., COX, M. (2004). LEHNINGER PRINCIPLES OF BIOCHEMISTRY, W. H. FREEMAN.
 Mioglobina
- A Mioglobina é uma proteína relativamente pequena (Mr 16 700).
- É a proteína responsável pelo armazenamento de oxigénio nas células
musculares e por facilitar a sua difusão rapidamente durante a contracção
muscular.
-É constituída por uma cadeia única de 153 resíduos de aminoácidos (grupo
proteíco) e por uma protoporfirina com um átomo de ferro central (Heme).

Estrutura Terciária da Mioglobina

Grupo Heme
 Mioglobina

Várias representações da Estrutura Terciária da Mioglobina

(grupo heme representado a vermelho)
Adaptado de: GARRETT,R., H., GRISHAM, C. M.,(2001). Principles of Biochemistry With a Human Focus, Brooks Cole.
 Estrutura Quaternária das Proteínas
Estabilização dos monómeros por :
-Ligações por ponte de H.
Associação de dois ou mais
-Ligações covalentes dissulfureto.
monómeros
-Pontes salinas.
(unidades com estrutura terciária)
-Forças de Van der Walls.
-Interacções hidrofóbicas.

Algumas proteínas só Proteínas Oligoméricas:

desempenham o seu papel -Dímeros
biológico se vários monómeros -Tetrâmeros
estiverem ligados entre si -Hexâmeros
formando oligómeros

Adaptado de: GARRETT,R., H., GRISHAM, C. M.,(2001). Principles of Biochemistry With a Human Focus, Brooks Cole.
 Estrutura Quaternária das Proteínas
Desnaturação das Proteínas

Por vezes as proteínas oligoméricas podem existir em mais do

que um estado, sendo um activo e outro inactivo do ponto de
vista biológico.
A alteração do estado activo pode afectar a estrutura
tridimensional de forma irreversível passando a proteína a
adoptar uma conformação espacial diferente.
-Elevação da temperatura
-Variação de pH
Desnaturação -Detergentes químicos (β-mercaptoetanol)
-etc.
 Hemoglobina (Hb)
- A hemoglobina é uma proteína com estrutura quaternária tetramérica. Contém
4 subunidades: 2 subunidades α e 2 subunidades β.
- É a proteína responsável pelo transporte de oxigénio dos pulmões para as
células e de CO2 dos tecidos celulares para os pulmões.
-Cada subunidade é constituída por uma cadeia polipeptídica (grupo proteíco) e
por uma protoporfirina com um átomo de ferro central (grupo prostético-Heme).

Estrutura Quaternária da Hemoglobina Grupo Heme

Adaptado de: GARRETT,R., H., GRISHAM, C. M.,(2001). Principles of Biochemistry With a Human Focus, Brooks Cole.
 Tipos de Hemoglobina (Hb)
-Se a sexta posição de coordenação do Fe(II) está ocupada com O2: Oxihemoglobina.
-Se a sexta posição de coordenação do Fe(II) está ocupada com CO2
Carbaminohemoglobina;
-Se a sexta posição de coordenação do Fe(II) está desocupada:
Desoxihemoglobina (hemoglobina reduzida).

Transição alostérica da
desoxihemoglobina para permitir a
ligação do oxigénio
 Transporte de O2 e CO2 pela Hemoglobina

Carbaminohemoglobina Oxihemoglobina
(CO2) (O2)
 Afinidade da Hemoglobina e Mioglobina para o O2

A Mioglobina tem elevada afinidade para o oxigénio mesmo a pO2 baixas, e

portanto, tem grande capacidade de o armazenar. Contudo, a pressões típicas do
músculo activo (20mmHg) ou de outros tecidos (40mmHg), esta proteína tem pouca
capacidade de o libertar, ao contrário da Hemoglobina. Só a pO2 muito baixas,
quando os músculos estão em actividade muito intensa (5mmHg) é que a mioglobina
liberta O2 para síntese mitocondrial de ATP, permitindo a continuação da actividade
muscular.
 Hemoglobina (Hb)
Casos de Toxicidade
1. Presença de Elevadas Concentrações de Monóxido de Carbono-
Carboxihemoglobina:
O monóxido de carbono (CO) liga-se ao grupo heme e tem maior afinidade que o
oxigénio. O complexo [HbCO]4 é cerca de 200 vezes mais estável do que o
complexo que se forma com o oxigénio. Assim, quando somos submetidos a uma
mistura de gases contendo CO, ocorre competição deste para a Hb e o equilíbrio
desloca-se no sentido da formação de [HbCO]4.

Felizmente, este processo é reversível e, na presença de uma atmosfera rica em

O2, a Hb recupera a forma de HbO2 e o transporte de O2 para os tecidos passa a
fazer-se regularmente.
 Hemoglobina (Hb)
Casos de Toxicidade
1. Oxidação da Hemoglobina a Metahemoglobina:
A metahemoglobina é uma forma desnaturada de Hb na qual o Fe do grupo heme está na
forma Fe(III), não permitindo o transporte de O2 aos tecidos. Esta forma está sempre
presente no sangue em quantidades normalmente inferiores a 1%. Os níveis de fisiológicos
metahemoglobina são mantidos baixos graças à acção do enzima metahemoglobina
redutase ou diaforase. Valores elevados de metahemoglobina pode levar à hipóxia e, em
casos extremos, à morte.
Causas de formação de metahemoglobina:
- Genéticas
-Poluição por nitratos ( utilizados em fertilizantes na agricultura podem atingir as águas de
consumo)
-Adição de nitritos à carne ( conservantes)
-Alguns medicamentos (sulfamidas, anilinas, etc.) podem levar à oxidação do Fe (II)
Identificação das diferentes formas Hemoglobina (Hb)
por Espectrofotometria

Comprimentos de Onda (λ) máximos :

- DesoxiHb: 555nm
- OxiHb: 541 e 577 nm
-CarboxiHb: 570 e 535 nm
-MetaHb: 500 e 630 nm

www.biochem.arizona.edu/classes/bioc462/462a/...
Níveis de organização estrutural das
proteínas

Adaptado de: NELSON, D., COX, M. (2004). LEHNINGER PRINCIPLES OF BIOCHEMISTRY, W. H. FREEMAN.