COLETA DA ÁGUA

Profª. Msc. Isa Fernanda M. S. de Moura

e- mail: isa.moura@uniesp.edu.br
 COLETA DAS AMOSTRAS

• Cuidados na coleta:

- Amostras não devem conter folhas, partículas,

detritos. Exceção: Material em Suspensão;

- Boca do frasco contra corrente – evita

contaminação;
 COLETA DAS AMOSTRAS

• Cuidados na coleta:

- Volume suficiente;

- Utilizar os frascos e métodos de preservação

adequados;

- Etiquetar os frascos;

- Respeitar o prazo de análise;

ANÁLISE MICROBIOLÓGICA
DA ÁGUA

Profª. Msc. Isa Fernanda M. S. de Moura

e- mail: isa.moura@uniesp.edu.br
MICROBIOLOGIA DA ÁGUA
 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Água Potável  Livre de microorganismos;

• Indicadores de Contaminação:

- Bactérias  E. coli;

• Portaria 518/2004 – contagem de bactérias

(heterotróficas)  500 UFC/ml;
 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Coliformes  Bacilos gram-negativos 

Bastonetes  Fermentam lactose;

• Indicadores de contaminação:

- Presentes nas fezes de animais de sangue

quente;
 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Indicadores de contaminação:

- Presença na água relacionada ao grau de

contaminação;

- Facilmente detectáveis e quantificáveis 

técnicas economicamente viáveis;
 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Indicadores de contaminação:

- Maior tempo de vida na água  menos

exigentes nutricionalmente;

- Mais resistentes a agentes desinfetantes;

 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Conhecer a densidade de bactérias  aumento

compromete detecção;

• Representa risco à saúde;

• Deteriora a qualidade da água;

• Totais e Termotolerantes  monitoramento;

 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Principais gêneros:

- Klebsiella;
- Escherichia;
- Enterobacter;
- Citrobacter;

• Diferenciar Coliformes fecais e não-fecais;

 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Presença de C. Totais  não é indicativo de C.

Fecais;

• Presença de C. Fecais  indicativo de

contaminação fecal;

• E. coli indicador específico de contaminação;

• Presença de C. Fecais  indicador de risco à

saúde;
 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Endotoxinas – E. Coli;

• Bactérias heterotróficas  requerem carbono;

• Maioria não é patogênica;

• Inibem a detecção de coliformes;

 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Bactérias heterotróficas  indicam deterioração

da qualidade;

• População sobre controle;

• Contagem < 500UFC/ml;

• Técnica de Cultivo em Profundidade;

 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Técnica de Cultivo em Profundidade:

- 10ml de amostra na placa;

- 12 a 15ml de Plate Count Agar (PCA);
- Incubação por 48h a 35ºC;
- Leitura do número de colônias;
- Média das contagens obtidas;
 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Técnica de Cultivo em Profundidade:

 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Presença/Ausência de C. Totais, Fecais e E. coli;

• Técnica de Substrato Cromogênicos:

- Meios análogos a lactose;

- 100ml de amostra;
- Incubação por 24h;
- Leituras: Incolor – negativo; Amarelo – C.
Totais; Azul – E.coli;
 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Técnica de Substrato Cromogênicos:

 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Método dos Tubos Múltiplos:

• Duas fases:

- Presuntiva;

- Confirmativa;
 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Fase Presuntiva – Preparação:

 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Fase Presuntiva;
1 ml por tubo

1 ml por tubo

Amostra de
água

1 ml por tubo
incubação a 35ºC/24h:
formação de gás: NMP
 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Fase Presuntiva - caldo lauril triptose (caldo

lactosado);
 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Fase Confirmativa - caldo BGBB;

Tubos com Tubos com

gás do teste caldo lactosado Teste confirmativo: caldo
anterior bile verde brilhante lactosado
bile-verde brilhante

Incubação a 35 ºC/48 h
 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Fase Complementar - caldo EC;

Tubos com gás Caldo lactosado

do teste confirmativo incubação a 44,5 ºC

Coliformes fecais fermentam a lactose a 44,5 ºC – 24h

Coliformes não fecais fermentam a lactose somente até 37 ºC
 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Tubos Múltiplos - Resultado;

 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Membrana Filtrante – Preparação das Placas;

 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Membrana Filtrante - Filtragem;

 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Membrana Filtrante - Incubação;

24h – 35ºC
 MICROBIOLOGIA DA ÁGUA

• Membrana Filtrante - Resultado;

n *10
UFC/100ml= v * f