Aula 3 - Microbiologia e Parasitologia

MICROBIOLOGIA E
PARASITOLOGIA
PRO F. DANIELA BARROS

Microbiologia e Imunologia
REVISÃO
◾Microscópios:
➢Ópticos (Luz)
➢ Ampliação de até 1000x
➢Óleo de imersão
(Diminuir refração da luz)
➢Eletrônicos (Elétrons)
2
REVISÃO
◾Coloração
:
➢Simples
➢Diferencial
➢Especial
3
REVISÃO
◾Transferência Asséptica:
➢Simples
➢Diferencial
➢Especial
4
REVISÃO
◾Coloração de
Gram:
1. CristalVioleta
2. Lugol (Mordente)
3. Lavagem com Álcool
4. Safranina
5
REVISÃO
◾Coloração Ziehl-
Neelsen:
1. Carbolfucsina
2. Fixar corante (Calor)
3. Lavagem
com Álcool-
Ácido 6
REVISÃO
◾Colorações Especiais:
➢Cápsula (Tinta da China)
➢Endósporos (Verde Malaquita)
➢Flagelos (ÁcidoTânico)
7
REVISÃO
◾Metabolismo:
➢Autotróficos
➢Heterotróficos
➢Aeróbios
➢Anaeróbios/Anaeróbios facultativos
8
REVISÃO
◾Metabolismo:
➢Glicólise = 2Piruvato + 2ATP
➢Respiração celular = 38ATP
➢Fermentação = 2ATP
➢ Ácido lático,Etanol e CO2 etc.
9
REVISÃO
◾Metabolismo:
➢Variam de acordo com o microrganismo:
➢ Nutrientes exigidos
➢ Metabólitos produzidos Provas Bioquímicas
➢ Enzimas envolvidas
10
Quais fatores podem influenciar o

crescimento bacteriano?
Qual a importância do biofilme?
O que são meios de cultura??
Quais suas utilidades?

11
INTRODUÇÃO
◾Crescimento
microbiano:
▪ Multiplicação celular
(Aumento de número)
▪ Colônias
Diversos fatores! 12
INTRODUÇÃO
◾Fatores de crescimento:
▪ Físicos
• Temperatura
• pH
• Pressão Osmótica
▪ Químicos
• Fontes de C,N, O,S,F
• Fatores orgânicos de crescimento
13
FATORES DE CRESCIMENTO
◾Fatores Físicos:
▪ Temperatura
• Microrganismos: 10 a 50ºC
• Algumas bactérias
(Extremos de temperatura)
14
◾Fatores Físicos: Temperaturas

cardeais
▪ Temperatura
▪ Temperatura Mínima
• Psicrófilos (Frio) ▪ Temperatura Ótima
• Mesófilos (T moderada) ▪ Temperatura Máxima
• Termófilos (Calor)
Dano celular
15
◾Fatores
Físicos:
▪ Temperatura
• Temperaturas
cardeais
16
◾Fatores
Físicos:
▪ Temperatura
➢ Psicrotróficos ou
Psicrotolerantes
➢ Hipertermófilos
17
▪ Temperatura
➢ Mesófilos
❖ Zona de Perigo!
18
▪ pH
➢ Acidez ouAlcalinidade
➢ pH 6,5 – 7,5 ☺
Meios de cultura (Tampões)
Acidófilas! 19
▪ Pressão Osmótica
➢ Meio hipertônico:
Plasmólise
Meio Meio
Isotônico Hipertônico
20
▪ Pressão Osmótica
➢ Adição de soluto:
Conservação de alimentos
Halófilos Extremos!
(Obrigatórios,facultativos) 21
◾Fatores Químicos:
▪ Carbono
▪ Quimioheterotróficos:
Proteínas,lipídeos,carboidratos
▪ Quimioautotróficos:
Dióxido de carbono 22
▪ Nitrogênio
▪ Síntese de proteínas e DNA.
▪ Enxofre
▪ Síntese de proteínas.
▪ Fósforo
▪ Produção deATP e membrana plasmática. 23
▪ Elementos-traço
▪ Ferro,Zinco,Cobre etc.
24
▪ Oxigênio O2
▪ Aeróbios obrigatórios;
▪ Anaeróbios obrigatórios;
▪ Anaeróbios facultativos;
25
▪ Oxigênio
▪ Radicais Superóxidos O 2 -
▪ Superóxido Dismutase
▪ Peróxido de Hidrogênio (O 2-2)
▪ Catalase e Peroxidase
26
◾Fatores
Químicos:
▪ Oxigênio
➢ Anaeróbios
aerotolerantes
➢ Microaerófilos 27
◾Biofilme:
▪ Raramente os microrganismos
são encontrados isoladamente
▪ Matriz polimérica extracelular

▪ Quorum sensing
28
◾Biofilme:
▪ Quorum sensing:
Sinalização/Comunicação entre
células no biofilme.
➢ Modulação da atividade da
comunidade microbiana 29
◾Biofilme:
▪ Compartilhamento de nutrientes;
▪ Resistência a fatores ambientais;
▪ Proteção contra antibióticos e
agentes imunológicos;
▪ Transferência de informação genética.
30
◾Biofilme
:
31
INTRODUÇÃO
◾Laboratório:
▪ Crescimento microbiano
▪ Meios de Cultura
Inóculo
Material nutriente para o
crescimento microbiano
32
INTRODUÇÃO
◾Meio de Cultura:
▪ Nutrientes adequados
▪ Água suficiente
▪ pH apropriado
▪ Temperatura ideal
▪ Estéril!
33
INTRODUÇÃO
◾Meio de Cultura:
▪ Meio Sólido
➢ Agar
Polissacarídeo de algas
marinhas
▪ Meio Líquido (Caldo)
34
MEIOS DE CULTURA
◾Meio Quimicamente
Definido:
▪ Composição Química é Exata e
Conhecida
M O Fastidiosos:
Muitos nutrientes e fatores de
crescimento 35
MEIOS DE CULTURA
◾Meio Complexo:
Nutrientes gerais:
Grande maioria dos
microrganismos cresce
36
MEIOS DE CULTURA
◾Meios Seletivos:
◾Favorece o crescimento
de determinadas bactérias
Ex:Ágar Sulfito de Bismuto (Salmonella)
◾Meios Diferenciais:
◾Facilitam a distinção entre colônias
37
MEIOS DE CULTURA
◾Obtenção de Cultura
Pura:
38
MEIOS DE CULTURA
◾Preparação:
❖ Seguir normas do fabricante!!
☑Hidratar em pequena quantidade
☑Esterilizar em autoclave (15min, 121ºC)
👉Tubos semi-abertos
☑Esterilizar por filtração (0,22 micra)
39
MEIOS DE CULTURA
◾Sabouraud Dextrose:
• Caldo (CSD) ou Agar (ASD)
• Altamente versátil
• Impede desenvolvimento de bactérias
• Pode ser misturado a antimicrobianos
e outros meios
40
MEIOS DE CULTURA
◾Brain Heart Infusion (BHI):

• Caldo ou Agar
• Rico em nutrientes
➢ Recuperação
➢ Crescimento
• Pode ser misturado a antimicrobianos
e outros meios
41
MEIOS DE CULTURA
◾Agar fubá (Cornmeal

agar)
◾Agar batata
◾Agar arroz
• Pobre em nutrientes
• Identificação diferencial
(Microcultivo)
42
MEIOS DE CULTURA
◾CHROMagar
Diferenciação de Candida spp.
• Candida albicans: colônias verdes, lisas
• Candida tropicalis: colônias azuis
• Candida krusei: colônias rosadas, turvas.
• Candida glabrata: colônias bege/creme.
• Candida parapsilosis: colônias rosa lisas.
43
MEIOS DE CULTURA
◾Yeast Carbon Base

(Sem nitrogênio)
◾Yeast Nitrogen Base
(Sem carboidrato)
Provas bioquímicas
44
MEIOS DE CULTURA
◾Meio de
Christensen (Com
uréia)
◾Agar esculina
Diferenciação de espécies
45
REVISÃO
◾Crescimento
Microbiano:
➢Aumento do número de células
➢Fatores Físicos e Químicos
46
REVISÃO
◾Fatores
Físicos:
➢Temperatura
➢ Psicrófilos
➢ Mesófilos
➢ Termófilos
47
REVISÃO
◾Fatores
Físicos:
➢Temperatura
➢ Mínima
➢ Ótima
➢ Máxima
48
REVISÃO
◾Fatores
Físicos:
➢pH
➢ 6,5 – 7,5
➢ Acidófilas
49
REVISÃO
◾Fatores
Físicos:
➢Pressão Osmótica
➢ Halófilos extremos
50
REVISÃO
➢Carbono,Nitrogênio,Enxofre e Fósforo
➢Elementos-traço
51
REVISÃO
➢Oxigênio
➢ Espécies reativas de oxigênio
➢ Radicais superóxido
➢ Peróxido de hidrogênio
52
REVISÃO
➢Oxigênio
➢ Aeróbios obrigatórios
➢ Anaeróbios facultativos
➢ Anaeróbios obrigatórios
➢ Anaeróbios aerotolerantes
➢ Microaerófilos
53
REVISÃO
◾Biofilme:
➢Matriz extracelular
➢Quorum sensing
➢Sobrevivência e proteção
54
REVISÃO
◾Meios de Cultura:
➢Nutrientes para crescimento microbiano
➢ Meio Sólido (Agar)
➢ Meio Líquido (Caldo)
55
REVISÃO
◾Meios de Cultura:
➢Quimicamente Definidos
➢Complexos
56
REVISÃO
◾Meios de
Cultura:
➢Seletivos
➢Diferenciais
57
REVISÃO
◾Meios de
Cultura:
➢Obtenção de Cultura
Pura
➢ Esgotamento
58
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PARASITOLOGIA
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Qual a importância do biofilme?

O que são meios de cultura??

Quais suas utilidades?

◾Fatores Físicos: Temperaturas

▪ Matriz polimérica extracelular

◾Brain Heart Infusion (BHI):

◾Agar fubá (Cornmeal

◾Yeast Carbon Base

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