Microbiologia clínica

Profa. Juçara Noeli

Aula 5
 Doenças
microbianas do
trato respiratório
inferior
 Trato respiratório inferior

• Ao contrário das infecções das vias

aéreas superiores, as que acometem o
trato respiratório inferior tendem a ser
mais graves, principalmente quando
causadas por microrganismos gram-
negativos em doentes hospitalizados e
debilitados.

• Grande parte dessas infecções é de etiologia bacteriana.

Traqueobronquites Pneumonias
 Bronquite

• Condição inflamatória da árvore traqueobrônquica.

• Nas crianças predominam os agentes virais e os

micoplasmas.

• Sintomas: Tosse, febre, graus variados de produção

de escarro e mialgias.

Agentes etiológicos:

Mycoplasma pneumoniae
Chlamydophila pneumoniae
Bordetella pertussis (tosse comprida)
Bronquite
 Mycoplasma pneumoniae

• São bactérias desprovidas de parede

celular.

• São pleomórficas.

• O método de Gram não tem valor na

pesquisa desta bactéria, embora seja
originada de bactéria gram-positivas;
Microscopia eletrônica
 Mycoplasma pneumoniae

• Crescem em meios hipertônicos, contendo 20%

de soro de cavalo e extrato de levedura.

• Cresce em Caldo PPLO (Pleuropneumonia-Like-

Organisms) que possui peptona enriquecida com
Leveduras e fungos.

• Amostras de escarro.

• Colônias em forma de “ovo frito”.

• Diagnóstico por Imunofluorescência direta.

 Chlamydophila pneumoniae

• São classificadas no grupo das gram-negativas.

• Não é possível visualizar pela bacterioscopia.

• São bactérias intracelulares.

• Após fagocitose ocorre a modificação do seu

formato para a forma reticular, torna-se
resistente aos lisossomos onde começa a se
replicarem dentro do endossoma.
 Chlamydophila pneumoniae

• Cresce em meio de cultura celular (McCoy) 

células de fibroblastos.

• Amostras de escarro.

• Testes sorológicos imunoenzimáticos: Elisa (IgG

e IgM)

• Diagnóstico por Imunofluorescência direta.

 Bordetella pertussis
(Coqueluche)
• Bactéria de fácil propagação e contágio, também conhecida
como tosse comprida ou tosse aguda,

• O contágio da coqueluche acontece por meio do contato com uma

pessoa infectada, seja pela tosse, espirro ou fala.

Sintomas:

• Período prodrômico: inicia de 5 a 10 dias após a aquisição do agente, com sintomas

semelhantes a um resfriado ou gripe. Fase altamente contagiosa e com sintomas
inespecíficos.
• Período paroxístico: quadro de tosse convulsiva, persistente e característica seguida de
inspiração ruidosa. Podem ser acompanhadas de cianose e vômito e várias complicações
como convulsões, insuficiência respiratória e encefalopatia.
 Bordetella pertussis
(Coqueluche)
• Prevenção: Vacina pentavalente  Difteria, Tétano, Pertussis
(Coqueluche), Hepatite B e Haemophilus influenzae B.

• A vacina está disponível para crianças a partir de 2 meses até 6

anos.

• São administradas 3 doses, aos 2 meses, 4 meses e 6 meses

de idade, com intervalo de 60 dias entre as doses, mínimo de
30 dias.

• Vacina para adulto: dTpa – difteria, tétano e coqueluche.

 Bordetella pertussis
(Coqueluche)
• Cocobacilo gram-negativo;

• São aeróbio estritos, não fermentadores da lactose;

• Produz a toxina pertussis:

 leva ao aumento da enzima AMPc (adenosina

monofosfato ciclico), levando ao aumento da
produção de muco.
 a toxina também desregula os macrófagos,
resultando em resistência à fagocitose;
 Bordetella pertussis
(Coqueluche)

• Casos suspeitos devem ser semeados em

meio ágar Bordet & Gengou (glicerol e sangue
estéril).

• Diagnóstico por Imunofluorescência direta.

 Bordetella pertussis
(Coqueluche)
• Amostra colhidas de swab de nasofaringe.

• O swab deve atingir uma profundidade próxima

à distância entre a abertura da narina anterior e
parte anterior da abertura da orelha.

• Esta distância varia entre 8 a 10 cm para

adultos.
 Coleta

• Amostra colhidas de Lavado Bronquioalveolar.

• Injeção de 30 a 50 ml de salina fisiológica através de

um broncoscópio de fibra ótica que é introduzido nas
ramificações bronquiolares periféricas.

• A salina é então aspirada e enviada para preparação

de esfregaço e cultura.

• É indicada para pacientes intubados submetidos a

ventilação.
 Pneumonia

• Infecção que acomete a região dos alvéolos

pulmonares onde desembocam as ramificações
terminais dos brônquios e, às vezes, os interstícios
(espaço entre um alvéolo e outro)

• Os agentes infecciosos da pneumonia podem ser

adquiridos através do ar, pela saliva ou secreções
de outra pessoa contaminada.

Agentes etiológicos:

Streptococcus pneumoniae
Haemophilus influenzae
Mycoplasma pneumoniae
Mycobacterium tuberculosis
 Streptococcus pneumoniae

• Cocos Gram-positivos em forma de lanceta.

• São geralmente encontradas em pares e, às

vezes, em cadeias curtas.
 Streptococcus pneumoniae

• São alfa-hemolítico em ágar-sangue.

• Hemólise parcial com perda parcial de

hemoglobina pelas hemácias, formando zona
cinzenta ou esverdeada ao redor da colônia em
ágar sangue
 Streptococcus pneumoniae

• Teste da Catalase-negativo.
catalase
 Streptococcus pneumoniae

• Sensibilidade ao antibiótico optoquina

 Streptococcus pneumoniae

• Lise de sais biliares.

• Teste de solubilidade em caldo bile.

• Caldo límpido.
 Mycobacterium tuberculosis

• É um bacilo reto ou ligeiramente curvo, imóvel, não

esporulado, não encapsulado.

• Bacilo de Koch  descoberto pela primeira vez em 1882

por Robert Koch.

• É um patógeno aeróbico estrito que necessita de oxigênio

para crescer e se multiplicar.

• Por ser capaz de sobreviver e de se multiplicar no interior

de células fagocitárias, é considerado um patógeno
intracelular facultativo.
 Mycobacterium tuberculosis

• A infeção é adquirida pela inalação do agente

etiológico sob a forma de aerossóis e/ou poeiras.

• A transmissão aérea da TB dá-se de forma eficiente

visto que os indivíduos infetados expectoram
grandes quantidades de micobactérias, projetando
estes microrganismos no ambiente.

• A parede celular das micobactérias resistem contra o ressecamento, sobrevivendo por longos
períodos de tempo no ar e na poeira (8 horas).
 Mycobacterium tuberculosis

• A parede celular assemelha-se a uma

parede celular gram-positiva modificada;

• Contém a típica camada polipeptídica, a

camada de peptideoglicano e lipídeos
livres;

• O alto teor lipídico destas bactérias

fazem delas álcool-ácido resistentes,

• São chamados de Bacilos Álcool Ácido

Resistentes (BAAR).
 Mycobacterium tuberculosis

• Crescimento em ágar Lowenstein Jensen;

• A base do meio é constituída por ovos integrais,

glicerol, fécula de batata e alguns sais.

• Sua cor normal é verde claro e o crescimento de

colônias amareladas é indicativo de
positividade.
 Amostra de escarro

• Orientar o paciente da importância da coleta do escarro e não

da saliva.

• Colher somente uma amostra por dia, se possível o primeiro

escarro da manhã, antes da ingestão de alimentos.

• Orientar o paciente para escovar os dentes, somente com água

(não utilizar pasta dental) e enxaguar a boca várias vezes,
inclusive com gargarejos.
 Amostra de escarro

• Respirar fundo várias vezes e

tossir profundamente
 Amostra de escarro

• Recolhendo a amostra em um frasco de

boca larga.

• Tentar escarrar por até 3 vezes.

• Se o material obtido for escasso, coletar a

amostra depois de nebulização.

• Encaminhar imediatamente ao laboratório.

• Na suspeita de infecção por micobactérias

ou fungos, coletar pelo menos três
amostras, em dias consecutivos (somente
uma amostra por dia).
 Amostra de escarro

• As amostras de saliva são impróprias para

análise bacteriológica, pois não representam o
processo infeccioso.
 Amostra de escarro

• Preparar a lâmina por distensão do escarro

• Quebre ao meio um palito de madeira;

• Retire, com as duas pontas farpadas do palito,

a partícula maior e mais purulenta da amostra e
deposite-a na lâmina próximo à borda fosca.
 Amostra de escarro

• Distenda a amostra na lâmina, com uma das

partes do palito em posição horizontal.

• Faça movimentos de vai-e-vem em cima da

amostra, até obter um esfregaço homogêneo
que cubra 2/3 da lâmina, sem deixar espaços
vazios.
 Amostra de escarro

• Método de coloração de Ziehl-Neelsen.

• Utiliza-se Fucsina, Álcool-ácido e
Azul de Metileno.

Etapas de coloração:

• Etapa 1: adiciona-se a fucsina sobre o esfregaço previamente fixado;

• Etapa 2: faz-se o aquecimento até a emissão de vapores, por 3 vezes, para facilitar a
penetração da fucsina;
• Etapa 3: derrama-se o corante na pia e lava-se o esfregaço com água;
• Etapa 4: faz-se a descoloração com álcool-ácido e lava-se o esfregaço com água. Apenas
os BAAR presentes no esfregaço reterão a fucsina;
• Etapa 5: adiciona-se azul de metileno;
• Etapa 6: lava-se o esfregaço com água e faz-se a leitura.