O CONTROLE DE QUALIDADE DE FRMACOS 1 - INTRODUO A anlise de medicamentos realizada rotineiramente pelos laboratrios da indstria farmacutica por ser crucial

l para garantir a qualidade do produto e para maior segurana aos seus usurios. A adulterao e falsificao de medicamentos tm crescido significativamente com o aumento do consumo e da rentabilidade na rea. Esse problema atinge o mundo todo e uma das formas de combat-lo detectando os produtos que no atendam s especificaes de qualidade, sejam medicamentos com rtulo falso ou produtos de qualidade inferior. As adulteraes em produtos farmacuticos incluem a substituio do medicamento por placebos, que no contm nenhum princpio ativo, ou adulterao da quantidade do princpio ativo, reduzindo, e s vezes at anulando, o efeito do medicamento. Pelas diferentes conotaes tcnicas pode-se caracterizar os medicamentos da seguinte maneira: Medicamentos falsificados: uma reproduo intencional de um medicamento original, no cumprindo as normas; difcil distinguir por sua aparncia similar ao medicamento original. Medicamentos adulterados: a alterao do contedo de um medicamento original, anulando sua qualidade e tornando-o impuro, resultando em um produto de caractersticas no genunas. Medicamentos alterados: a mudana na forma farmacutica, apresentao e concentrao de um medicamento. Os medicamentos, na sua grande maioria, so formados por associaes de princpios ativos alm dos excipientes (substncias utilizadas para dissolver ou apenas aumentar o volume de um medicamento, quando este est em quantidade muito pequena, difcil de ser manipulado), constituindo misturas cuja composio intencionalmente diferente das misturas naturais. necessrio separar o princpio ativo de interesse para que se possa fazer a quantificao do mesmo. Uma das tcnicas de separao muito utilizada a extrao com solvente, que baseada na diferena de solubilidade entre o composto a ser extrado e os demais componentes presentes na amostra, em determinados solventes.

Nos casos em que a solubilidade de componentes do excipiente e a do princpio ativo sejam similares, num conjunto variado de solventes, a extrao por solvente no ser adequada para proceder a separao. Neste caso, utiliza-se a chamada extrao atravs de reaes cido-base, que se baseia na diferena de solubilidade em meio cido e meio bsico dos componentes a serem separados. Aps realizar a reao cido-base, utiliza-se a extrao por solvente para separar o composto qumico de interesse. Descrevendo de maneira simplificada, podemos dizer que a separao trata de isolar um ou mais componentes de uma mistura, utilizando alguma propriedade diferente que as substncias presentes na mistura possuem entre si. A identificao trata do reconhecimento qumico da(s) substncia(s) isolada(s), buscando caracterizar esta espcie sob o ponto de vista da sua natureza qumica. A quantificao procura determinar, em termos relativos, qual a quantidade desta substncia na mistura. Portanto a separao, a identificao e a quantificao so procedimentos distintos, mesmo que tenha relao entre si, a utilizao delas faz parte do trabalho dos qumicos. Qualquer uma destas trs tarefas depende do tipo da mistura, ou seja, de sua composio e por isso no existe um procedimento nico e universal, sendo necessrio que o qumico faa o planejamento deste trabalho. Neste experimento ser realizada a separao dos princpios ativos presentes em um analgsico utilizando o mtodo de separao por extrao, baseado nas diferentes caractersticas cido-base de seus constituintes: cido acetilsaliclico, paracetamol e cafena. 2 - OBJETIVOS Reconhecer o papel da Qumica no controle de qualidade de frmacos. Realizar a separao dos princpios ativos presentes em um analgsico utilizando o mtodo de separao por extrao quimicamente ativa. 3 PARTE EXPERIMENTAL 3.1 - Materiais necessrios 3.1.1 - Reagentes e Solues 06 comprimidos de Cibalena (amostra) Clorofrmio CHCl3 (solvente para dissoluo do comprimido)

cido clordrico 2,0 mol/L HCl (solvente quimicamente ativo) Bicarbonato de sdio slido NaHCO3 (solvente quimicamente ativo) Sulfato de Magnsio MgSO4 (agente secante) Tetra-cloreto de carbono CCl4 (solvente de recristalizao) Bicarbonato de sdio 0,5 Mol/L NaHCO3 (solvente quimicamente ativo) Etanol 95% C2H6O (solvente de recristalizao) ATENO: A manipulao de clorofrmio e tetracloreto de carbono deve ser feita em capela devido toxicidade e volatilidade dos mesmo. 3.1.2 -Vidrarias e Aparelhagens 01 almofariz 01 pistilo 03 esptulas 03 provetas 04 bqueres de 50mL 02 bales volumtricos de 50mL 02 frascos para armazenar amostra Papel de filtro 01 funil simples 01 funil de separao 01 funil de Bchner 01 balana 3.1.3 Instalaes Capela de ventilao para manipulao de reagentes volteis 3.2 - Procedimento Triturar os 06 comprimidos de Cibalena em um almofariz com um pistilo de porcelana. Pesar aproximadamente 2,0g do comprimido macerado em um papel de filtro, utilizando uma balana. Transferir com cuidado esta massa para um bquer de 50 mL, dissolver a amostra adicionando 25mL de clorofrmio e agitar com um basto de vidro (a solubilizao no completa). Colocar o funil de separao limpo e seco, com a torneira fechada, encaixado no suporte para funil (argola) que deve estar preso ao suporte universal (Figura 1). E em seguida transferir esta soluo para o funil de separao para isso utilize um funil de

vidro simples. Sobre a soluo contida no funil de separao, adicionar 20mL da soluo aquosa de cido clordrico 2 mol/L. Tampar a extremidade superior, retirar o funil fechado do suporte e agitar bem no esquecendo de aliviar a presso, abrindo a torneira de vez em quando e fechando quando for agitar, conforme mostrado na figura 1 abaixo:

Figura 1 Funil de separao e forma correta de agitar e aliviar a presso interna. Com a torneira fechada, colocar o funil de separao novamente no suporte e deixar em repouso para que as duas fases se separem completamente. Colocar um frasco sob a torneira do funil e deixar escoar a camada inferior (fase orgnica), abrindo a torneira com cuidado (Figura 2) para que a camada superior (fase aquosa) no passe para este frasco. Quando a fase superior se aproximar da torneira feche-a imediatamente. A fase orgnica recolhida no frasco contm o cido acetilsaliclico e o paracetamol e a fase aquosa, que ficou no funil, contm a cafena protonada.

Figura 2 Drenagem do contedo do funil de separao. A soluo recolhida deve ser coberta com um filme plstico para evitar qualquer perda, pois os produtos esto dissolvidos em clorofrmio que ao evaporar muito rapidamente, poder arrastar para fora do recipiente parte dos produtos de interesse para a anlise. Em seguida, pese 3,5 g de bicarbonato de sdio slido e adicione sobre a soluo contida no funil, em pequenas pores, para neutralizar a fase aquosa (que contm a cafena protonada). Feche a extremidade superior do funil, retire-o do suporte e com cuidado agite-o continuamente, aliviando a presso de vez em quando, conforme feito anteriormente. Ao adicionar bicarbonato de sdio na fase aquosa, que contm a cafena na forma protonada, haver formao de gs carbnico (CO2) e se deve tomar cuidado com esse gs na hora de agitar o funil de separao, pois se a presso no for aliviada, o gs pode se expandir podendo causar algum acidente, como a quebra do funil de separao que de vidro. Colocar o funil novamente no suporte e verificar se o pH da soluo est bsico mergulhando na soluo uma tira de papel tornassol vermelho, se o pH estiver bsico a fita se torna azul. Caso a soluo ainda esteja cida, adicionar mais bicarbonato de sdio slido at o meio se tornar bsico, repetindo sempre o procedimento de aliviar a presso no funil. Aps adio da base, a cafena deve ser extrada com duas pores de 10 mL de clorofrmio, a cafena ter preferncia pelo solvente orgnico. Adicionar a primeira poro de 10 mL de clorofrmio no funil de separao, fechar a extremidade superior, agitar e aliviar a presso.

Deixar o funil em repouso para que as fases se separem, recolher a camada inferior (fase orgnica) repetindo o mesmo procedimento para a segunda poro de clorofrmio. Recolher estas duas pores de 10 mL de clorofrmio no mesmo frasco (o extrato orgnico contendo a cafena) e adicionar sulfato de magnsio anidro slido e agitar. Filtrar em um funil de vidro com papel de filtro, recolhendo o filtrado diretamente em um pequeno frasco de massa conhecida. Para obter a cafena slida necessrio evaporar o solvente e para isto o frasco, previamente rotulado e pesado (massa do recipiente), ser deixado aberto para que o solvente evapore naturalmente. A evaporao completa deve ocorrer em aproximadamente dois dias, consultar o professor sobre em que local se deve deixar o recipiente para evaporao do solvente. Aps a remoo do solvente, deixar o resduo secar ao ar e determinar a massa novamente (massa do recipiente + cafena). Anotar estes valores na tabela contida neste roteiro e calcular a massa de cafena bruta obtida. Transferir a soluo de clorofrmio reservada anteriormente, que contm cido acetilsaliclico e paracetamol, para um funil de separao limpo e seco, adicionar 25mL de soluo de bicarbonato de sdio 0,5 mol/L. Agitar bem a mistura, tomando o cuidado de aliviar a presso do sistema. Agora, na fase orgnica, est o paracetamol, pois este continua tendo mais afinidade pelo clorofrmio do que pela gua. Deixar a mistura em repouso at que se separe a camada orgnica inferior, que deve ser recolhida em um frasco parte. Adicione sulfato de magnsio slido neste frasco para retirar a gua (da mesma forma que foi feito anteriormente). Filtrar a soluo orgnica que contm o paracetamol diretamente para um pequeno frasco de massa conhecida. Para obter o paracetamol slido deve-se evaporar o solvente naturalmente, o que ocorre em cerca de dois dias. Aps a remoo do solvente, deixar o resduo secar ao ar e determinar a massa de paracetamol slido residual. Transferir a soluo aquosa contida no funil para um pequeno bquer de 100 mL e adicionar, lentamente e com agitao, 5mL de soluo de cido clordrico 2 mol/L para neutralizar o meio (verificar o pH da mistura, que deve estar cido), at formar um precipitado branco. Para iniciar a precipitao do cido acetilsaliclico coloque o bquer em uma bacia contendo gelo, o que ir acelerar a precipitao. Outra informao importante

em relao ao pH da soluo, que aps adio do cido deve estar entre 3,0 e 4,0. Somente em pH cido que a precipitao ocorre. Depois de formado o precipitado, a filtrao deve ser feita em um funil de Bchner ( vcuo) com o papel de filtro previamente pesado. Lavar o bquer com pequenas pores de gua destilada gelada, caso contrrio o slido poder solubilizar parcialmente em contato com a gua em temperatura mais elevada. O slido deve ser colocado em um vidro de relgio e depois na capela para que evapore toda a gua contida nele. Depois de seco, determinar a massa do papel de filtro contendo o slido e anotar na tabela abaixo. Tabela 2 Massa dos princpios ativos extrados da Cibalena. Princpios Ativos Cafena Paracetamol cido acetilsaliclico Aps determinar a massa de cada um dos produtos extrados calcular o rendimento do processo de extrao considerando o valor esperado igual ao valor nominal (contido na bula do medicamento). Para a Cibalena a composio nominal por comprimido de 200 mg de cido acetilsaliclico, 150 mg de paracetamol e 50 mg de cafena. Para calcular o rendimento terico deve-se construir regras de trs para cada um dos princpios ativos, conforme exemplo abaixo para a cafena: 01 comprimido de Cibalena 06 comprimidos utilizados massa de cafena terica = 300 mg 300 mg de cafena massa de cafena obtida no experimento 100% de rendimento % de Rendimento 50 mg de cafena massa de cafena terica (mg) Massa do frasco (g) Massa do frasco + princpio ativo (g) Massa do princpio ativo (mg)

% de Rendimento = (massa de cafena obtida no experimento x 100)/ 300

Aps realizao do experimento, descarte os resduos conforme instrues do professor, lave todo material e organize sua bancada. 4 DISCUSSO DOS RESULTADOS A Cibalena um medicamento composto de cido acetilsaliclico, cafena e paracetamol, na figura 3 podemos observar as estruturas desses componentes. Cada comprimido contm 200 mg, 50 mg e 150 mg de cido acetilsaliclico, cafena e paracetamol, respectivamente.

Figura 3 - Estruturas dos princpios ativos da Cibalena. Como podemos observar pelos valores de pKa do controle de pH. A primeira espcie a ser separada foi a cafena que por ser bsica, foi extrada pela adio de HCl mistura, conforme a reao apresentada na Figura 2. destas trs espcies, elas

apresentam propriedades cido-base diferentes o que permitiu sua separao atravs

+ HCl (aq)

+ Cl (aq)

Figura 2 Reao da cafena com cido clordrico

Na reao apresentada na fig. 2 ocorreu a protonao da cafena, pela adio de cido clordrico, que em soluo aquosa encontra-se ionizado. O on H+ do cido ataca o par de eltrons livre do nitrognio e une-se a ele. Nesta forma, a cafena protonada adquire uma carga eltrica positiva, correspondente carga do prton e se torna solvel em gua, um solvente polar que dissolve com facilidade espcies carregadas eletricamente. Para converter a cafena na forma no-protonada novamente foi adicionado o bicarbonato de sdio slido. Os ions H+ que haviam atacado o nitrognio, liga-se espcie OH- presente na soluo de bicarbonato de sdio atravs de uma reao de neutralizao, conforme reao mostrada na figura 3, onde houve a liberao de gs carbnico.

+ NaHCO3 (s)
Cafena protonada

+ H2O(l) + CO2(g)

Figura 3 Reao da cafena protonada com bicarbonato de sdio slido Com a adio do NaHCO3 (pH entre 7,5 e 8,5), a cafena se tornou deprotonada, parcialmente insolvel em gua, e isso faz com que ela tenha mais afinidade pelo solvente orgnico (clorofrmio) do que pelo solvente polar (gua). Aps a secagem do solvente foi possvel obt-la na forma slida. Na seqncia, foi separado o cido acetilsaliclico do paracetamol, a mistura contendo estes dois componentes foi tratada com bicarbonato de sdio que uma base (Figura 4), ocorrendo a seguinte reao:

+ HCO3- (aq)

+ H2O(l) + CO2(g)

Figura 4 Reao da extrao do cido acetilsaliclico pela adio de NaHCO3 Observando a estrutura do cido acetilsaliclico (AAS) na figura 1, percebemos que para torn-lo solvel em gua foi necessrio deproton-lo, ao contrrio do que foi feito com a cafena. A carga negativa da forma deprotonada do cido acetilsaliclico corresponde a carga do eltron deixado pelo hidrognio ao romper a ligao com o oxignio. Desta maneira, na forma inica, ele se tornou solvel em gua enquanto o paracetamol que neutro foi para a fase orgnica (clorofrmio). Aps a evaporao do solvente obtevese o paracetamol slido. Para precipitar o cido acetilsaliclico da fase aquosa, que estava cida pela adio da soluo de HCl, foi adicionado novamente a base bicarbonato de sdio slido nesta soluo. Desta maneira, modificando o pH do meio foi possvel separar os trs componentes da Cibalena. Observando as reaes ocorridas durante o experimento realizado, responda as seguintes perguntas: 1) Indique os grupos funcionais orgnicos presentes em cada um dos princpios ativos extrados da Cibalena. Cafena:_____________________________________________________________________________ Paracetamol:________________________________________________________________________ cido acetilsaliclico:________________________________________________________________ 2) Qual grupo funcional presente na molcula de cafena que a caracteriza como uma base ?

3) Qual o grupo funcional que caracteriza o cido acetilsaliclico como um cido ?

4) Como voc classificaria o paracetamol: cido, bsico ou neutro ? Justifique sua resposta. _____________________________________________________________________________________

5) A molcula de cafena uma base fraca que no possui carga, por isso para que pudesse ser extrada da mistura foi necessrio adicionar cido clordrico do qual recebeu um prton e tornou-se carregada positivamente. Quando foi adicionado o clorofrmio a cafena permaneceu na fase aquosa e o paracetamol e o cido acetilsaliclico passaram para a fase orgnica. Qual a natureza da interao entre as molculas de gua e as da cafena que permitiu a separao desta ltima dos demais componentes ? ____________________________________________________________________________________ 6) Para converter a cafena na forma no-protonada novamente foi adicionado o bicarbonato de sdio slido. Os ions H+ que haviam atacado o nitrognio, ligou-se espcie OH- presente na soluo de bicarbonato de sdio atravs de uma reao de neutralizao. A mesma reao foi utilizada para separar o cido acetilsaliclico do paracetamol. Escreva a reao do bicarbonato de sdio em gua mostrando que nesta soluo existe a espcie OH-. NaHCO3 + H2O __________ + _________ + __________

7) Complete a tabela abaixo a partir dos dados coletados: Concentrao nominal dos Princpios Ativos Cafena 50 mg/comprimido Paracetamol 150 mg/comprimido cido acetilsaliclico 200 mg/comprimido Massa do princpio ativo obtido mg/comprimido Rendimento Terico %

Qual dos componentes extrados da Cibalena apresentou maior rendimento? _________________________________________________________________________________. Este resultado confere com a concentrao nominal ? ____________________________. 8) Quais as possveis fontes de erro que se pode atribuir ao baixo rendimento obtido durante o processo de extrao ? __________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________

5 REFERNCIAS BIBLIOGRAFICAS 1) GESSI, M. R. Separao dos Princpios Ativos da Cibalena. Curitiba, 1999.26f. Monografia (Especializao em Ensino de Qumica Experimenal para o 2o. grau) Setor de Cincias Exatas, Departamento de Qumica, Universidade Federal do Paran. 2) GONALVES, D; WAL, E; ALMEIDA, R. R. Qumica Orgnica e Experimental. 1 ed. So Paulo: McGraw-Hill Ltda, 1988. 3)<http://qmc.ufsc.br/organica/exp7/index.html> acesso em 29/01/2004. 4) http://labjeduardo.iq.unesp.br/orgexp1/extr_quim_ativa.htm acesso em 08/06/2004. 5)http://www.ucs.br/ccet/defq/naeq/material_didatico/textos_interativos_33.htm cesso em 21/06/2004.