COMPLEXO DE HISTOCOMPATIBILIDADE PRINCIPAL PROCESSAMENTO E APRESENTAO DE ANTGENOS NA SUPERFCIE CELULAR

O RECEPTOR DE LINFCITOS O RECEPTOR DE LINFCITOS B (Ig DE SUPERFCIE) INTERAGE DIRETAMENTE COM O RESPECTIVO DETERMINANTE ANTIGENICO (TCR)) INTERAGE COM O NA DETERMINANTE ANTIGENICO (POLI PEPTIDEO) EXPOSTO SUPERFCIE DE UMA CLULA DITA APRESENTADORA DE ANTGENO (APC)

Major Histocompatibility Complex (MHC) ou Complexo de Histocompatibilidade Principal CHP

O MHC ou CHP um complexo de genes que codificam proteinas que carregam epitopos antigenicos e os expem na superficie de clulas . Os receptores de linfcitos T interagem com aminocidos do epitopo e da propria molcula codificada pelo CHP .

Reconhecimento antignico por linfcitos T

T
Ag solvel Nenhuma resposta Antgeno de Superfcie celular ou viral Peptdios solveis Peptdios apresentados por clulas que expressam antgenos do MHC

Resposta de linfcitos T

Nenhuma resposta Nenhuma resposta

Clula apresentadora de Ag (APC)

O MHC foi inicialmente descrito como o complexo de genes cujos produtos eram responsveis pela rejeio rpida de enxertos de pele entre camundongos de constituio gentica diferente.

Camundongos isognicos

Linhagens de camundongos isognicos so produzidas por acasalamento entre irmos. Aps cerca de 20 geraes, todos os animais tero exatamente os mesmos genes nos cromossomos. Eles so portanto como gmeos univitelinos. Camundongos isognicos so homozigotos em cada locus gnico e todos os animais de uma mesma linhagem isognica so geneticamente idnticos (singnicos).

Base gentica para a rejeio de transplantes

Linhagens de camundongos isognicos (iso = igual gnicos) todos indivduos tem idnticos genes SNELL (P. Nobel)

ACEITO

REJEITADO

Transplante de pele entre linhagens isognicas DIFERENTES demonstrou que a rejeio ou aceitao do transplante dependia da constituio gentica do camundongo

Major Histocompatibility Complex MHC ou Complexo de Histocompatibilidade Principal CHP

Rejeio Em

rpida de enxertos era devida a um conjunto de antgenos (glicoprotenas) encontrado superfcie na superfcie de todas as clulas nucleadas do organismo. camundongos de uma mesma linhagem isognica ( ou em gmeos univitelinos ) estes antgenos so idnticos entre diferentes indivduos e por isso os enxertos no so rejeitados como estranhos ao individuo

Todas as espcies animais tem um conjunto de genes mais importante que codifica os antgenos principais que estimulam a resposta imune na situao de transplantes entre indivduos geneticamente diferentes. Por terem sido inicialmente descritos em transplantes receberam o nome de antgenos de HISTO COMPATIBILIDADE. NA ESPCIE HUMANA - HUMAN LEUKOCYTE ANTIGENS - HLA NO CAMUNDONGO - H-2

Principal funo fisiolgica das molculas do MHC Apresentao de antgenos

COMO POSSIVEL ASSEGURAR QUE DIFERENTES PEPTIDEOS DOS MAIS VARIADOS TIPOS DE PATGENOS POSSAM SER APRESENTADOS NO ORGANISMO AOS DIFERENTES CLONES DE LINFCITOS T EXISTENTES ?

TENHO QUE TER MUITAS MOLCULAS QUE SO CAPAZES DE MOSTRAR OS EPITOPOS E INTERAGIR COM OS LINFOCITOS T

 O RECEPTOR DE LINFCITO T - TCR RECONHECE AMINO-CIDOS DO E

DETERMINANTE ANTIGENICO

DA MOLCULA DO MHC QUE O APRESENTA

LINFCITO T

CLULA APC

Contato do RECEPTOR DO linfcito T (TCR) com os residuos do peptdeo apresentado

Contato do RECEPTOR DO linfcito T (TCR) com os residuos da molcula do MHC

Regio de ligao ao peptdeo

Molculas do MHC SO DE DOIS TIPOS

MHC classe I
Stio de ligao do peptdio

MHC classe II

Peptdios

Membrana plasmtica

As molculas de MHC classe I esto expressas na membrana de todas as clulas menos nas hemacias

Regio polimrfica

Regio no polimrfica

Estrutura da molcula de MHC class I

Cadeia -chain - 43kDa transmembrana Regio alfa 1 e alfa 2 que se liga ao antgeno Par de -hlices sobre uma base de strands anti-paralelas 2-microglobulina - 12kDa, no ligada covalentemente a cadeia

2 3

1 2m

Regio alfa-3 que se liga molcula CD8 dos linfcitos

LINFOCITOS T QUE TEM A MOLCULA CD8 NA SUPERFCIE LIGAM-SE A MOLCULAS DE CLASSE I EXPRESSAS PELA CLULA QUE EST APRESENTANDO O ANTIGENO
T CD4 T CD8

LINFOCITOS T QUE TEM A MOLCULA CD4 NA SUPERFCIE LIGAM-SE A MOLCULAS DE CLASSE II

Peptdio

Estrutura da molcula de MHC classe I

Cadeia

2-microglobulina

Cadeias

Estrutura da molcula de MHC class I

Stio de ligao ao antgenos: Domnios 1 e 2 formam como um cesto de duas -hlices segmentadas sobre uma base de -strands
-hlice

ANTGENO
-strands -hlice PEPTDEOS COM 8 A 10 A. A. MOLCULAS ENCAIXAM-SE NA FENDA DE CLASSE I DA

Estrutura das molculas de MHC classe II

Cadeia -chain - 34kDa Cadeia - 29kDa

1 2

1 2
Cadeias and ancoradas membrana plasmtica

Regies em alfa-2 e beta-2 que se ligam molcula CD4 dos linfcitos

As molculas de MHC classe II esto expressas, principalmente, na membrana de clulas dendrticas, linfcitos B e macrfagos.
Regio polimrfica

Regio no polimrfica

Ligao do peptdeo molcula de MHC classe II

O STIO da molcula MHC classe II acomoda peptdeos de 10-30 aminocidos

Geometria do stio de ligao

Cadeia

Cadeia

Peptdio 2-M

Peptdio

cadeia

MHC classe I acomoda peptdios de 8-10 aminocidos

MHC classe II acomoda Peptdios maiores

CERTOS AA DOS PEPTDEOS LIGAM-SE A AA DA MOLCULA DE MHC FUNCIONANDO COMO NCORAS

A. CIDOS NCORAS EM DIFERENTES PEPTDIOS SO INTERCAMBIVEIS NA MESMA FAMLIA DE AA Por ex. Y (aromticos) ou V ,I ,L (hidrofbicos) ligam-se em AA conservados na mesma famlia de molculas do MHC

Peptdios eludos de UMA MESMA MOLCULA DO MHC apresentam diferentes seqncias mas contm motifs e ncoras SEMELHANTES
1 Y 3 4 5 6 7 8 9 10 11

N T Y Q R T R L L L L S Y F K E I H H H H
K Y Q R V T T T T T S Y I K S A K A K A K A K A

V I L I

ANCORA A.A. hidrofbico

ANCORA A.A. aromtico 3 4 5 MOTIF 6 7 8

motif
9 10

R-Arg ou Klisina (bsicos) na posio 4

QUO ESPECFICA UMA MOLCULA DE MHC ?

Uma mesma Molcula de MHC pode ligar VRIOS peptdeos DIFERENTES com MOTIFS e NCORAS semelhantes

Mapa do MHC Humano do Projeto do Genoma Humano

3,838,986 bp 224 genes cromossomo 6

Mapa simplificado da regio do HLA

DP

DM LMP/TAP DQ

DR

B C

MHC Classe II
QUANTOS GENES ??

MHC Classe I

CLASSE I: 3 LOCI (tipos) HLA-A, HLA-B, HLA-C CADA UM sintetiza UMA CADEIA ALFA CLASS II: 3 LOCI : HLA-DP, HLA-DQ, HLA-DR CADA LOCUS TEM UM GENE PARA CADEIA ALFA E OUTRO PARA CADEIA BETA

UM POUCO DE GENTICA
Alelos- so genes que ocupam a mesma posio (locus) em cromossomos homlogos, isto , no mesmo par de cromossomos, um de origem materna e outro de origem paterna. Os genes podem ser no polimrficos, cuja seqncia no varia entre indivduos de uma mesma espcie. Neste caso em todos os individuos os dois alelos so identicos e as duas proteinas sintetizadas so idnticas . Vrios genes so polimrficos , isto , apresentam variaes na seqncia de bases e consequentemente a protena sintetizada ser ligeiramente diferente em indivduos que possuam diferentes genes e alelos

POLIMORFISMO
Genes polimrficos: so genes cujas seqncias variam entre os indivduos de uma mesma espcie. Cada gene portanto leva sntese de uma protena de sequencia diferente Para cada gene polimrfico um indivduo pode ter no mesmo locus genes (alelos) diferentes (um herdado da me e outro do pai) ou eventualmente genes idnticos, se herdou do pai e me alelos idnticos.
Alelo A2 Alelo B9 Alelo C13 Alelo A12 Alelo B15 Alelo C32

CO-DOMINNCIA
Os alelos dos genes do MHC so co-expressos. Isto quer dizer que se o indivduo tiver 2 alelos diferentes do mesmo gene vai produzir duas protenas com algumas variaes na sequncia

HOMOZIGOSE
Idnticos alelos no mesmo locus gnico em ambos os cromossomos.

HETEROZIGOSE
Diferentes alelos no mesmo locus gnico nos dois cromossomos
Alelo A2 Alelo B9 Alelo C13 Alelo A12 Alelo B15 Alelo C32

QUANTAS MOLCULAS CLASSE I OU CLASSE II SO EXPRESSAS POR CLULA ???

OS DOIS ALELOS DOS GENES SO COEXPRESSOS. PORTANTO NUM INDIVIDUO TOTALMENTE HETEROZIGOTO EM TODOS OS LOCI SERO : 6 DIFERENTES MOLS. CLASSE I (6 DIFERENTES CADEIAS ALFA) POR VOLTA DE 15 OU MAIS MOLCULAS CLASSE II ( TEORICAMENTE SERIAM 6 DIFERENTES ALFA ASSOCIADAS A 6 DIFERENTES BETA)

O polimorfismo allico concentrado no stio de ligao ao peptdio

Classe I A B C

2 3

1 2m

Regies polimrficas Regies NO polimrficas

1 2

1 2

Classe II (HLA-DP, HLA-DQ, HLA-DR)

O polimorfismo no MHC afeta a ligao do peptdio Variantes alelicas podem diferir em at 20 aminocidos

Polimorfismo no MHC
Na populao humana, mais de 1.200 alelos do MHC foram identificados 381
No de polimorfismos

Classe I
657 alelos 185 91 2 A B C

317

Classe II
492 alelos

89 19 20 45

DR DP

DQ

Data from http://www.anthonynolan.org.uk/HIG/index.html July 2000

HERANA DO GENES MHC - HAPLTIPOS

DP DQ DR 1 B C A

HAPLTIPO 1 HAPLTIPO 2

DP

DQ

DR 1

B C

POLIMORFISMO
DP DQ DR 1 B C A

ALLICO

Devido a ligao gentica (linkage) os genes do MHC so herdados em grupo por cromossomo O conjunto de alelos num cromossomo denominado

HAPLTIPO

Herana de hapltipos de MHC O haplotipo herdado em bloco linkage ou ligao

Pais
DP-1,2 DQ-3,4 DR-5,6 B-7,8 C-9,10 A-11,12
DP DQ DR BC A

DP-1,9 DQ-3,7 DR-5,5 B-7,3 C-9,1 A-11,9 DP-1,8 DQ-3,6 DR-5,4 B-7,2 C-9,8 A-11,10

DP

DQ DR

BC

DP

DQ DR

BC

DP

DQ DR

BC

DP

DQ DR

BC

DP

DQ DR

BC

X
DP-9,8 DQ-7,6 DR-5,4 B-3,2 C-1,8 A-9,10
DP DQ DR BC A

Crianas

DP

DQ DR

BC

DP-2,8 DQ-4,6 DR-6,4 B-8,2 C-10,8 A-12,10 DP-2,9 DQ-4,7 DR-6,5 B-8,3 C-10,10 A-12,9

DP

DQ DR

BC

DP

DQ DR

BC

DP

DQ DR

BC

Entre irmos a chance de ter os dois haplotipos idnticos de 1:4 e de partilhar um hapltipo 1:2

DP

DQ DR

BC

Diversidade das molculas de MHC na populao

Se: cada indivduo heterozigoto apresenta 6 tipos de MHC classe I os alelos de cada tipo de MHC I fossem distribudos ao acaso na populao cada um dos 1.200 alelos pudessem estar associados com qualquer outro alelo.

Teramos ~6 x 1015 combinaes possveis

Na realidade os alelos de MHC no so distribudos ao acaso Os alelos segregam com a localidade e raa.

Freqncia (%)
Grupo de alelos HLA-A1 HLA- A2 HLA- A3 CAU 15.18 28.65 13.38 AFR 5.72 18.88 8.44 ASI 4.48 24.63 2.64

O polimorfismo allico concentrado no stio de ligao ao peptdio

Classe I

2 3

1 2m

1 2

1 2

Classe II (HLA-DR)

O polimorfismo no MHC afeta a ligao do peptdio Variantes alelicas podem diferir em at 20 aminocidos

O polimorfismo no MHC determina a ligao de peptdios

Alelo MHC A9
S Y I P S A K I

Alelo MHC A15

Alelo MHC A9 Alelo MHC A15

R G Y V Y Q Q L

Produtos de diferentes alelos do MHC se ligam a diferentes CONJUNTOS de peptdios.

Por que precisamos de tantas molculas e tanto polimorfismo nas molculas Classe 1 e Classe 2 ?

Exemplo: Se s houvesse um tipo de MHC

MHC XX

Patgeno que evade ao MHC X.

Sobrevivncia do indivduo ameaada

Populao ameaada de extino

Exemplo: Se cada indivduo apresenta 2 molculas

de MHC (MHC X e Y)

Patgeno que evade ao MHC X

Mas apresenta um peptdio que se liga ao MHC Y

MHC XX

MHC YY

MHC XY A populao sobrevive

Impacto nos indivduos depende do gentipo

Exemplo: Se cada indivduo apresenta 2 molculas

de MHC (MHC X e Y) ., e o patgeno muta

MHC XX Patgeno que evade ao MHC X, mas

apresenta um peptdio que se liga ao MHC Y

MHC YY MHC XY Populao ameaada de extino

.at que muta e evade ao MHC Y

MAS o nmero de tipos de molculas de MHC no poderia aumentar infinitamente.

A espcie necessita expressar variantes de cada tipo de molcula de MHC

Alta taxa de replicao dos microrganismos patognicos em
relao aos vertebrados permite que um patgeno possa mutar os seus genes mais freqentemente e escapar da resposta imune

O nmero de genes de molculas do MHC limitado

Variantes (alelos) de MHC aumentam a resistncia da espcie contra
patgenos de alta poder de mutao sem aumentar o nmero de molculas de MHC.

Para neutralizar a flexibilidade dos patgenos: As molculas de MHC apresentam diversos variantes Estes variantes no protegem o indivduo mas protegem a espcie da extino.

Aplicaes clnicas relevantes da gentica do MHC: Pareamento (Matching) de recipientes e doadores de transplantes
A diversidade e complexidade do MHC e seu padro de herana explicam : A necessidade de match do MHC do recipiente com o doador de orgo. A dificuldade de achar um match apropriado para doadores no relacionados. 1/4 de chances de achar irmos com MHCs idnticos e 1:2 de partilharem um haplotipo .

Principal funo das molculas do MHC Apresentao de antgenos

COMO OS ANTGENOS SO PROCESSADOS PELAS CLULAS PARA GERAR PEPTIDIOS E COMO ESTES SE LIGAM S MOLCULAS CLASSE I E CLASSE II ? COMO O LINFCITO T APRENDE A RECONHECER AS PRPRIAS MOLCULAS CLASSE I E CLASSE II E OS ANTGENOS

Educao tmica PRXIMA AULA

O antgeno (peptdio) ser acoplado preferencialmente a molculas classe I ou classe II dependendo do compartimento celular onde o antgeno processado e o peptidio gerado

Citosol (Classe I)

Compartimento vesicular (Classe II)

Relembrando a estrutura da clula eucariota

PEPTDIOS QUE SO GERADOS OU LIBERADOS NO CITOSOL SO TRANSPORTADOS PARA DENTRO DO RE E APRESENTADOS EM CLASSE I

PEPTDIOS QUE SO GERADOS DENTRO DE ENDOSSOMAS (PATGENOS QUE VIVEM EM VACUOLOS E PATGENOS OU MOLCULAS QUE ENTRAM POR FAGOCITOSE ) SO APRESENTADOS EM CLASSE II POR FUSO COM VESCULAS

Apresentao de peptdeos presentes no citosol

Via de processamento intracelular para MHC Classe I

Apresentao de peptdeos presentes no compartimento endossomico

Via de processamento intracelular para MHC classe II

CLASS IIASSOCIATED INVARIANT PEPTIDE = CLIP

Sntese de classe II com a cadeia invariante, fica CLIP, remoo de CLIP pela ao combinada das enzimas proteolticas e da molcula HLA-DM . A ligao do peptdeo ANTIGENICO gerado no endossoma na fenda da molcula de classe II e expresso na superfcie celular.