Processo de produção

Enzimas são proteínas que apresentam atividade catalítica. A complexa estrutura molecular
enzimática é majoritariamente constituída por uma parte proteica, porém a ela pode estar
integrada outras moléculas, como carboidratos e lipídeos. Para apresentar atividade catalítica,
algumas enzimas requerem a participação de moléculas menores (cofatores) de natureza não
proteica. Os cofatores podem ser íons de zinco, cálcio por exemplo, ou moléculas orgânicas
como coezimas. Sem essas enzimas algumas reações importantes que duram alguns minutos
ou segundo durariam horas.

Comercialmente, uma enzima pode ser um preparado que, além da proteína enzimática,
contém quantidades variáveis de matéria contaminante proteica e não proteica e
preservantes.

As células constituem-se, até hoje, o único meio para obtenção de biocatalisadores, visto que
ainda não é possível destacar sua fabricação por síntese química. A obtenção de
microrganismos que produzem enzimas com aplicação industrial pode ser feita de várias
maneiras, tais com isolamentos a partir de recursos naturais, compra em coleções de culturas
obtenção de mutantes naturais, obtenção de mutantes induzidos por métodos convencionais
e obtenção de microrganismos recombinantes por técnicas de engenharia genética. Após a
obtenção do microrganismo este é cultivado em fermentadores para a produção de
quantidades industriais de biocatalizador.

As enzimas com potencial de aplicação biotecnológico poder ser de origem animal, vegetal e
microbiana.

A produção de enzimas em escala industrial se faz majoritariamente por fermentação

submersa devido a facilidade de crescimento dos microrganismos em condições controladas
de Ph e temperatura, além de tornar fácil a recuperação de enzimas extracelulares.

A fermentação submersa inicia com processos prévios a fermentação, também chamados de

upstream ou a montante de fermentação. Os processos pós fermentação downstream ou a
jusante da fermentação visam recuperar as enzimas produzidas no caldo fermentado.

A fermentação é um processo relativamente simples, uma célula escolhida de acordo com sua
capacidade de produzir o produto desejado. Uma cultura inicial de células é colocado em um
pequeno volume de meio e o meio fornece os nutriente de que a célula necessita para crescer.
Quando a população de células já cresceu e consumiu a maior parte dos nutrientes ela é
transferida para um recipiente maior com mais meio de cultivo e o processo se repete. Esse
squemup termina quando a quantidade de células é grande e forte o suficiente para ser
transferida a um tanque de produções comumente chamado de biorreator ou fermentador.
Agora com bastante meio fresco disponível e sob condições estritamente controladas as
células crescem e fabrica um produto, quando a fermentação termina o produto é recolhido.

A fermentação é considerado um processo biotecnológico de upstream, ela ocorre no começo

da cadeia de produção antes da separação, purificação, formulação, enchimento e
empacotamento.

Os processos de recuperação normalmente usa uma variedade de ferramentas como

centrifugas, desreguladores de células e microfiltros. O produto final da fermentação é
determinado o caldo, este caldo contém a molécula de interesse, depois da fermentação
completa esse caldo é enviado para a recuperação, onde as células são separadas do caldo
liquido, em seguida suspensa em uma nova solução para lavar as células removendo
substâncias tóxicas e o metabólitos separando as novamente e resuspedendo em uma nova
solução, denizado para quebrar as células e os detritos celulares são removidos, assim que a
recuperação for concluída o produto enviado para purificação para ser refinado e concentrado.

Agora que o processo de recuperação foi concluído o material é transferido para um vaso de
transferência ventilado e com temperatura controlada, esse tanque se move a jusante para a
próxima série de etapas do processo a purificação.

A purificação tem como objetivo isolar enzimas especificas a partir de um extrato bruto de
células contendo muitos outros componentes indesejados, de forma a se obter o máximo de
atividade especifica com a melhor recuperação possível da atividade inicial. A purificação pode
ser feita por precipitação e sulfato de amônia que apresenta baixo custo, alta solubilidade e
proteção natural das enzimas ou por cromatografia de troca iônica.

Para obtenção de produtos, preparações enzimática par uso técnico ou comercial purificações
relativamente simples são empregadas, já para produtos de uso analítico ou farmacêutico
técnicas cromatográficas são mais utilizadas.