UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA MARIA

CENTRO DE CIÊNCIAS NATURAIS E EXATAS – CCNE

DEPARTAMETO DE BIOLOGIA MOLECULAR E BIOQUÍMICA
Curso de Licenciatura e Bacharelado em Biologia
Disciplina BBM1004 – Bioquímica Experimental

Relatório de aula prática – Aula 6: Desnaturação de proteínas.

Aluna: Bárbara Weber.

Introdução

As proteínas estão relacionadas com quase tudo que ocorre nas células, o papel
central das proteínas está no fato de a informação genética ser expressa em proteínas.
Para cada proteína existe um gene que codifica uma sequência específica de
aminoácidos.
As proteínas também são muito importantes como agentes estruturais das células,
catalisadoras de funções biológicas, proteínas de armazenamento, motilidade,
proteínas reguladoras e proteínas de defesa do organismo, como os anticorpos. Em
cada célula existem vários tipos de proteínas, cada uma cumprindo uma função
específica. Para cada proteína existe um gene para codificá-la.O papel das proteínas,
juntamente com os ácidos nucleicos está diretamente relacionado com o controle de
todas as funções celulares.As proteínas são estruturas compostas pela união de
diversas moléculas de aminoácidos, através de ligações peptídicas.
Pequenas alterações no meio em que se localiza a proteína podem resultar em
alterações estruturais, que poderá levar à uma deficiência no seu funcionamento.
A estrutura proteica adquire sua função em meio celular específico. Condições
diferentes daquelas presentes no interior da célula podem resultar em variáveis
alterações na estrutura das proteínas. Uma perda da estrutura tridimensional
suficiente para causar perda de função recebe o nome de desnaturação. O estado
desnaturado não necessariamente corresponde à um desenovelamento completo da
estrutura proteica e a uma randomização de conformação. Sob a maioria das
condições, as proteínas desnaturadas se encontram em um conjunto de estados
parcialmente enovelados pouco elucidados.
A maioria das proteínas pode ser desnaturada pelo calor, que afeta as interações
fracas em uma proteína (especialmente entre as ligações de hidrogênio) de forma
complexa. Quando a temperatura se eleva lentamente, uma conformação proteica
geralmente permanece intacta até que haja uma perda abrupta de estrutura em uma
faixa estrita de temperaturas. Essa alteração repentina indica que o desenovelamento
é um processo cooperativo: a perda da estrutura em uma parte da proteína
desestabiliza outras partes.
A desnaturação proteica se dá não só pelo calor, mas também por extremos de pH, por
alguns solventes orgânicos miscíveis com a água (álcool e acetona, por exemplo), por
certos solutos como ureia e cloridrato de guanidínio ou por detergentes. Cada um
desses agentes desnaturantes representa um tratamento relativamente brando no
sentido de que nenhuma ligação covalente na cadeia polipepitídica é rompida.
Objetivos

Observar as diferentes condições capazes de desnaturar a estrutura proteica e o

processo de renaturação.

Materiais e Métodos

- Albumina;

- Banho-maria;

- Acetona;

-HCl;

-NaOH;

-(CH3COO)2Pb;

- Mercúrio;

- Acido tricloro acético (TCA 10%);

Distribuiu se em cinco tubos de ensaio amostras da proteína albumina a fim de testar

as reações a qual a mesma teria ao ser colocado em contato com diferentes reagentes.
A primeira amostra foi colocada em banho maria por um minuto, já a segunda amostra
adicionou-se acetona, a terceira amostra primeiramente adicionou-se lentamente o
HCl, quando obtida a reação desejada foi medido o pH da solução e em seguida
adicionou - se o NaOH. A quarta amostra foi adicionada a solução de TCA 10%, e a
quinta amostra foi adicionado mercúrio.

Resultados

Por meio do experimento foi possível concluir que todos os reagentes acima
apresentados alteraram a estrutura terciaria da proteína albumina, causando assim
sua desnaturação. Em parte dos experimentos a proteína pode ser renaturada, ou seja,
retornar a seu estado original.

Agente Resultado Considerações

Temperatura Positivo Albumina apresentou um aspecto branco leitoso e

maior densidade após a fervura. Irreversível.

TCA 10% Positivo A densidade da albumina foi visivelmente alterada.

Reversível.
 Em contato com o ácido a albumina sofreu visíveis
alterações tanto visuais quanto de pH, o qual
Ácido Positivo passou a ser em torno de 3. Quando adicionada a
base à proteína voltou a ter ser aspecto visual
primário. Reversível.

Cetona Positivo Quando adicionado o reagente a albumina formou

precipitações. Irreversível.

Metais Positivo Quando adicionados a albumina, apresentou maior

pesados condensação da solução. Irreversível.

Discussões dos resultados

Com o seguinte experimento foi possível observar as diversas circunstancias capazes

de desnaturar a estrutura proteica. Mediante o fato de as proteínas serem as
principais moléculas presentes no corpo humano e as que desempenham mais funções
é possível cogitar o quanto sua estrutura é frágil e pode ser facilmente afetada levando
a condições inapropriadas de funcionamento, e danos á saúde do indivíduo.

Conclusão

Por meio desse experimento, foi viável concluir que a temperatura, metais pesados,
ácido tricloro-acético, ácido clorídrico e cetona são capazes de desnaturar uma
proteína, ou seja, perder uma parte de sua estrutura tridimensional o que ocasiona
perda de sua função. Entretanto, após adicionarmos uma base (NaCl) à solução
protéica desnaturada com ácido clorídrico, ocorre uma renaturação da proteína – a
estrutura terciária é recuperada.

Referencias Bibliográficas

-DAVID L. NELSON & MICHAEL M. COX - Princípios de Bioquímica de Lehninger.

<http://www.infoescola.com/bioquimica/desnaturacao/> Acesso em 04 de outubro de

2016.

<http://www.infoescola.com/bioquimica/proteinas/> Acesso em 04 de outubro de

2016.