Proteínas Virais
As proteínas de superfície são alvos de
1. Estudar a estrutura viral, suas
classificações, e suas
nomenclaturas.
• Classificação
Os vírus de DNA associados com doenças
humanas são divididos em 7 famílias.
Os vírus de RNA podem ser divididos em
pelo menos 13 famílias.
•Os vírus variam em tamanho, possuindo
desde o tamanho de uma proteína grande
(~20 nm) até o tamanho das menores células
(~300 nm). A maioria dos vírus apresenta-se
como esferas ou bastões em microscopia
eletrônica.
• Os vírus contêm DNA ou RNA, mas nunca
ambos.
•Todos os vírus possuem uma cobertura
proteica chamada de capsídeo, que recobre
o genoma. O capsídeo é composto por
subunidades repetidas chamadas de
capsômeros. Em alguns vírus, o capsídeo
representa a superfície externa, mas em
outros, o capsídeo é coberto por um
envelope lipoproteico que se torna a
superfície externa da partícula. A estrutura
composta pelo genoma de ácido nucleico e
pelas proteínas do capsídeo é denomina- da
nucleocapsídeo.
•As subunidades repetidas do capsídeo
fornecem ao vírus uma aparência simétrica
que é útil para propósitos de classificação.
Alguns nucleocapsídeos virais possuem
simetria esférica (icosaédrica), ao passo que
outros possuem simetria helicoidal.
•Todos os vírus de seres humanos que
possuem nucleocapsídeo helicoidal são
envelopados (i.e., não existem vírus não
envelopa- dos helicoidais que infectem seres
humanos). Vírus que possuem um
nucleocapsídeo icosaédrico podem ser tanto
envelopados quanto não envelopados.
anticorpos (i.e., anticorpos ligados a essas
proteínas de superfície impedem que o vírus
se ligue ao receptor celular). Isso
“neutraliza” (inibe) a replicação viral.
Os vírus também possuem proteínas
internas, das quais algumas são DNA ou
RNA-polimerases.
A proteína de matriz medeia a interação
entre as proteínas do nucleocapsídeo viral e
as proteínas do envelope.
Alguns vírus produzem variantes
antigênicos de suas proteínas de superfície,
que permitem ao vírus evadir as defesas do
hospedeiro. Anticorpos contra um variante
antigênico (sorotipo) não irão neutralizar um
sorotipo diferente. Alguns vírus possuem um
sorotipo; outros possuem múltiplos
sorotipos.
As estruturas da superfície do capsídeo e do
envelope medeiam a interação do vírus com
a célula-alvo por meio de uma proteína de
fixação viral (VAP) ou estrutura. A remoção
ou o rompimento da parte externa deste
pacote inativa o vírus. Os anticorpos gerados
contra VAP impedem a infecção viral.
As proteínas de superfície virais medeiam a
ligação com os receptores celulares do
hospedeiro. Essa interação determina a
especificidade de hospedeiro e de
órgãos/tecidos do vírus.
• Capsídeo: estrutura rígida capaz de
resistir a severas condições
ambientais. São resistentes à
secagem, ácidos e detergentes. São
transmitidos pela via oral-fecal e
podem preservar a capacidade de
transmissão mesmo no esgoto
• Envelope: É derivado da MP do
hospedeiro, ou seja, é composto de
lipídeos, proteínas e glicoproteínas.
É prontamente rompida por
ressecamento, condições ácidas etc.
Vírus com Capsídeo: é montado a partir de
proteínas individuais associadas em
unidades progressivamente maiores.
Prot. individuais > subunidades
protômeros > capsômeros > capsídeo
Vírus Envelopados: composto de lipídios,
proteínas e glicoproteínas. A maioria das
glicoproteínas virais tem carboidratos
ligados à asparagin e se estende através do
envelope e para fora da superfície do vírion.
Algumas glicoproteínas agem como VAPs,
capazes de se ligar a estruturas nas células-
alvo.
O vírus de RNA de sentido positivo possui
um genoma de RNA de fita simples que
pode funcionar como sequência de mRNA e
se traduzir diretamente para produzir a
sequência de aminoácidos.
O vírus de RNA de sentido negativo contém
um genoma de RNA de fita simples que
produz uma sequência de mRNA
complementar a partir da transcrição.
Todos os vírus de RNA de fita negativa são
envelopados.
O espaço intersticial entre o nucleocapsídeo
e o envelope é denominado tegumento, e
contêm enzimas, outras proteínas e até RNA
que facilita a infecção viral.
2. Compreender a replicação viral.
• Replicação Viral
>
Cada célula infectada pode produzir até
100.000 partículas; contudo, somente
1% a 10% dessas partículas podem ser
infecciosas. As partículas não
infecciosas (partículas defeituosas)
resultam de mutações e erros na
fabricação e montagem do vírion.
A produção de vírus infecciosos por
célula, ou burst size, e o tempo
necessário para um único ciclo de
reprodução do vírus são determinados
pelas propriedades desse vírus e da
célula-alvo.
Embora possa parecer um desperdício
produzir tantas partículas defeituosas, o
vírus utiliza esse mecanismo para gerar
mutantes que podem ter uma vantagem
seletiva, e 1% dos 100.000 vírus ainda é
uma grande quantidade de vírus.
1. Reconhecimento e Fixação na
Célula-Alvo (Absorção)
Suscetibilidade celular – presença de
receptor
A ligação das VAPs ou estruturas na
superfície do capsídeo do vírion
aos receptores na célula inicialmente
determina quais células podem ser
infectadas por um vírus.
Os receptores para o vírus na célula
podem ser proteínas ou carboidratos em
glicoproteínas ou glicolipídios.
A estrutura de fixação viral num
capsídeo do vírus pode ser parte do
capsídeo ou uma proteína que se estende
a partir desse capsídeo.
2. Penetração
Interações entre múltiplas VAPs e
receptores celulares iniciam a
internalização do vírus para dentro da
célula. O mecanismo de internalização
depende da estrutura do vírion e do tipo
de célula. A maioria dos vírus não
envelopados entra na célula por
endocitose mediada por receptor ou por
meio de viropexia.
Os vírus envelopados fundem suas
membranas com as membranas celulares
para liberar o nucleocapsídeo ou o
genoma diretamente dentro do
citoplasma. O pH ideal para a fusão
determina se a penetração ocorre na
superfície celular em pH neutro ou se o
vírus deve ser internalizado por
endocitose e a fusão ocorrer em um
endossomo em pH ácido. A atividade de
fusão pode ser provida pela VAP ou por
outra proteína.
3. Desencapsidação
Uma vez internalizado, o
nucleocapsídeo deve ser transferido para
o ponto de replicação dentro da célula e
o capsídeo ou o envelope, removido. O
genoma dos vírus de DNA, exceto dos
poxvírus, deve ser transferido para o
núcleo, enquanto a maioria dos vírus de
RNA permanece no citoplasma. O
processo de desencapsidação pode ser
iniciado por uma fixação ao receptor ou
promovido por ambiente ácido ou por
proteases encontradas em um
endossomo ou lisossomo.
4. Síntese Macromolecular
Uma vez dentro da célula, o genoma
deve dirigir a síntese de RNAm viral e
de proteínas e gerar cópias idênticas de
si próprio. O genoma é inutilizado, a
menos que possa ser transcrito em
RNAms funcionais capazes de se ligar
aos ribossomos e ser traduzidos em
proteínas. O modo pelo qual cada vírus
cumpre essas etapas depende da
estrutura do genoma e do ponto de
replicação.
A maioria dos vírus de DNA usa a RNA
polimerase II DNA-dependente da
célula e outras enzimas para fazer o
RNAm.
A maioria dos vírus de RNA se replica e
produz RNAm no citoplasma, exceto
para os ortomixovírus e os retrovírus.
Os vírus de RNA devem codificar as
enzimas necessárias para a transcrição e
replicação, uma vez que a célula não tem
meios de replicar RNA.
Os vírus de RNA de sentido positivo
(exceto os retrovírus) são algumas vezes
referidos como ácidos nucleicos
infecciosos, porque são suficientes para
iniciar a replicação ao serem injetados
na célula. Esses genomas podem
interagir diretamente com o maquinário
do hospedeiro para promover a síntese
de RNAm ou de proteína.
5. Maturação
6. Liberação
• Vírus de DNA
A transcrição do genoma do vírus de DNA
(exceto os poxvírus) ocorre no núcleo,
usando as polimerases e outras enzimas da
célula do hospedeiro para a síntese do
RNAm viral.
Os diferentes vírus de DNA controlam a
duração, o tempo e a quantidade da síntese
de gene viral e proteínas de formas
diferentes. Os vírus mais complexos
codificam seus próprios ativadores
transcricionais, os quais ativam ou regulam
a expressão dos genes virais.
A síntese de DNA viral é semiconservativa,
e as DNA polimerases viral e celular
requerem um iniciador (primer) para iniciar
a síntese da cadeia de DNA.
As polimerases virais são normalmente mais
rápidas, mas menos precisas do que as
polimerases da célula do hospedeiro,
causando uma taxa de mutação mais alta nos
vírus e provendo um alvo para análogos de
nucleotídeos como as drogas antivirais.
As principais limitações para a replicação de
um vírus de DNA incluem a disponibilidade
de substratos de DNA polimerase e
desoxirribonucleotídeos. A maioria das
células na fase de repouso do crescimento
não está realizando síntese de DNA, porque
as enzimas necessárias não estão presentes e
as quantidades de desoxitimidina são 3. Estudar o coronavírus e o
limitadas. Quanto menor o vírus de DNA, Monkeypox vírus (sintomas e
mais dependente o vírus é da célula tratamento)
hospedeira para o provimento dessas
funções.
Proteína Spike se liga ao receptor ACE2
• Vírus de RNA Monkeypox – Varíolas dos Macacos
O genoma do vírus de RNA deve
- o que sabemos
codificar RNA polimerases RNA-
dependentes (replicases e transcriptases), Família Poxviridae; vírus de DNA; do
porque a célula não tem meios de replicar o mesmo gênero da varíola
RNA. Ao contrário dos vírus de DNA, os ‘’Orthopoxviridae’’
vírus de RNA também devem fornecer as
Identificado em macacos em 1958
enzimas para a síntese e processamento do
RNAm viral. Histórico
Como o RNA é degradado relativamente República do Congo – 1 caso em humano
rápido, a RNA polimerase RNA-dependente em 1970
deve ser provida ou sintetizada logo após a
desencapsidação para gerar mais RNA viral, Casos em diversos países da África
ou a infecção será abortada. A maioria das - africa ocidental – casos mais leves – 1%
RNA polimerases virais trabalha em um de letalidade
ritmo rápido, mas também é propensa ao
erro, causando mutações. -africa central- casos mais graves – 10% de
letalidade
O genoma de RNA de fita negativa não é
infeccioso por si só, e uma polimerase deve EUA e Europa – 47 casos nos EUA em
ser carreada para dentro da célula com o 2003, importação de animais infectados da
genoma (associado ao genoma como uma África.
parte do nucleocapsídeo) para fazer RNAm
Transmissão
individual para as diferentes proteínas virais.
Como resultado, um RNA de fita positiva de Contato respiratório, pele não íntegra ou
tamanho total deve também ser produzido membranas mucosas
pela polimerase viral para agir como molde
para gerar mais cópias do genoma. Animais – humanos: mordeduras,
arranhadura
Exceto para os vírus da influenza, a
transcrição e a replicação dos vírus de RNA Humano – humano – gotícilas respiratórios,
de fita negativa ocorrem no citoplasma. A fluidos corporais, contato indireto com
transcriptase do influenza requer fômitos contamidados, o contato precisa ser
um primer para produzir RNAm. O genoma mais prolongado.
do influenza é também replicado no núcleo. Quadro Clínico
Incubação – 5 a 21 dias
Pródromos – febre, calafrio, mal estar
cefaleia e linfadenopatia
Exantema – surgimento após 24 a 72 hrs
Lesões que começam na face e vão se
espalhando
Másculas- pápulas- vesículas
Diagnóstico – PCR – reação em cadeia
polimerase
Tratamento
PEP - Vacina pra varíola
Em estudo – cidofovir; brincidofovir;
tecovirimat.