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Relatório de bioquímica - Prática 5 – Determinação dos Carboidratos

Redutores pelo Método de ADNS

Sérgio Rangel, Júlio Tenório, Elloan Ronny,

Universidade Federal de Pernambuco

DEQ - Departamento de engenharia química

Recife – PE - Brasil
sergio.entrudo@ufpe.br;

julio.tenoriooliveira@ufpe.br;

elloan.santos@ufpe.br

Resumo:.

Introdução O ADNS é um composto amarelado em


Em química orgânica os açúcares solução que pode ser reduzido por
redutores são substâncias que açúcares redutores a um composto
apresentam a função orgânica aldeído. nitroamino análogo, ácido 3-amino-5-
São chamados assim porque são bons nitrosalicílico, que possui coloração
agentes redutores, doando elétrons avermelhada, à medida que os açúcares
(oxidando) em reações com os metais redutores são oxidados. Este composto,
alcalinos. A capacidade de reduzir outras assim como o ADNS, é aromático, porém
substâncias está ligada ao fato de que os absorve luz facilmente e, desta forma, é
açúcares redutores possuírem uma possível estabelecer uma relação direta
hidroxila livre em suas composições, ou entre a quantidade de açúcares redutores
seja, estas hidroxilas (OH) conseguem se presente na solução com a medida
unir a outras substâncias para reduzi-las. colorimétrica realizada em
Os principais açúcares redutores, também espectrofotômetro e/ou luz visível
chamados de glicídios redutores, são a (VASCONCELOS; PINTO; ARAGÃO,
frutose, a lactose, a maltose e a glicose. A 2013).
sacarose, ou seja, o açúcar comum, que
adoça vários dos alimentos que Procedimento experimental
consumimos, não é um açúcar redutor. No
entanto, em algumas situações, como ● Objetivos
quando sofre uma hidrólise ácida, a
sacarose pode gerar frutose e glicose que, Verificar a presença de açucares
por sua vez, são açúcares redutores. redutores nas amostras utilizando o
método ADNS.
Figura 2 - Soluções em banho Maria

● Materiais e reagentes

Pipeta,
Pipetador de borracha
Béquer,
Tubos de ensaios,
Água destilada,
Soluções 1g/L de carboidratos diversos
Solução de DNS
Banho Maria
Banho de Gelo
Figura 3 - Banho de gelo
● Procedimento

O procedimento experimental inicia-se


identificando 6 tubos de ensaios
numerando-os de 1 a 6. Em seguida foi
adicionado a cada tubo de ensaio 1 mL de
reagente DNS. Nos tubos de 1 a 5 foi
adicionado 0,5 mL de solução de
carboidratos: glicose; lactose; sacarose;
frutose; amido, na ordem dos tubos. No
tubo 6 foi adicionado 0,5mL de água
destilada. Foi realizada a homogeinização
da solução e levada a banho Maria a
Resultado e discussão
100ºC por 5 minutos, transcorrido os 5
minutos os tubos foram levados ao banho
Os tubos foram observados em relação a
Maria por 4 minutos. Transcorridos os 4
alteração de cor. Inicialmente a solução
minutos foi adicionado a cada tubo 10 mL
ADNS tem uma cor amarelada. Após
de água destilada.
adicionar os carboidratos resultou na
As figuras de 1 a 3 mostram as etapas do
configuração mostrada na figura 4 e 5,
experimento;
Figura 1 - Soluções de carboidratos antes da adição de 10 ml de água
destilada, ou seja, uma cor acastanhada.
Figura 4 - Amostras de 1 a 3 antes da adição de
água destilada.
que a amostra 6 (branco) indicando não
serem açucares redutores
Todo monossacarídeo é um açúcar
redutor pois todo monossacarídeo possui
um grupo aldeído (se este for aldose) ou
pode ser tautomerizado em solução para
formar um grupo aldeído (se este for
cetose).
A glicose e a frutose são hexoses, ou
seja, contêm 6 carbonos; um desses
carbonos contém um grupo carbonilo e os
outros carbonos grupos hidroxilo. Na
Figura 5 - Amostras de 4 a 6 antes da adição de forma cíclica (a mais abundante, mas em
água destilada. equilíbrio com a forma linear), o grupo
carbonilo e um grupo hidroxilo estão
“escondidos”: na forma cíclica há um
rearranjo molecular designado por ligação
semiacetal (ou semicetal) e o carbono
que continha o grupo carbonilo passa a
designar-se de anomérico. A frutose é um
isômero estrutural da glicose o que
significa que seus átomos estão ligados
em ordens diferentes.
Quanto a lactose uma das suas
subunidades é a Dgalactose; a outra é a
D-glicose, a subunidade de D-galactose é
um acetal e a subunidade de D-glicose é
um hemiacetal. As subunidades são
Com o objetivo de facilitar a visualização unidas por uma ligação β-l,4'-glicosídica.
dos resultados foi adicionado 10 mL de A lactose é um açúcar redutor e sofre
água destilada, foi possível observar mutarrotação.
assim a alteração da cor nas amostras. A sacarose não tem caráter de açúcar
redutor porque os grupamentos aldeídicos
Figura 6 - Resultado do experimento do C1 da glicose e cetônico do C2 da
frutose estão bloqueados pela ligação
glicosídica ∝-1,2 (ligação nos 2 carbonos
anoméricos).
O amido é um polímero de glicose,
também é um açúcar não redutor.

Conclusão
O método ADNS se mostrou eficiente em
determinar qualitativamente a presença
de um açúcar redutor. A utilização deste
método associado a espectrometria pode
levar a análises quantitativas. O objetivo
do experimento foi totalmente atingido e a
metodologia adotada foi capaz de indicar
Verifica-se que as amostras 1, 2 e 4 os açucares redutores nas amostras
(glicose, lactose e frutose) tem cor analisadas.
acastanhada o que indica ter havido a
reação com o ADNS. Já as amostras 3 e Referências
5 (sacarose e amido) tem a mesma cor Açúcares Redutores
Açúcares Redutores (tudoemfoco.com.br)
VASCONCELOS, N. M.; PINTO, G. A. S.;
ARAGÃO, F. A. S. Determinação de
Açúcares Redutores pelo Ácido 3,5-
Dinitrosalicílico: Histórico do
Desenvolvimento do Método e
Estabelecimento de um Protocolo para
o Laboratório de Bioprocessos.
Embrapa Agroindústria de Alimentos,
Fortaleza, 2013. Disponível em
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstr
eam/item/103342/1/BPD13017.pdf Acesso
em 06 Abr 2023

OETTERER MARÍLIA. Aula: Mono e


dissacarídeos - Propriedades dos
açucares. ESALQ/USP
DEPARTAMENTO DE CIÊNCIA E
TECNOLOGIA AGROINDUSTRIA.
Disponível em:
https://edisciplinas.usp.br/pluginfile.php/32
75054/mod_resource/content/1/Mono
%20e%20Dissacarideos%20-
%20Propriedades%20dos%20Acucares
%20Oetterer.pdf. Acesso em: 08 Abr
2023.

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