Bases biológicas para um possível efeito do canabidiol na doença de Parkinson

Fisiopatologia da doença de Parkinson

Em "Um ensaio sobre a paralisia trêmula" (1817), James Parkinson descreveu pela primeira vez uma condição
de início insidioso com um curso progressivo e incapacitante, caracterizado por tremor em repouso, postura
flexionada e marcha festiva. ​1​ Martin Charcot posteriormente acrescentou detalhes extensivos às observações
de Parkinson, identificando bradicinesia e rigidez como principais sintomas da doença. ​2​ Em 1895, Brissaud
levantou a hipótese de que a substância negra (SN) era o principal núcleo cerebral afetado na doença de
Parkinson (DP), ​3​ e Friedrich Heinrich Lewy descreveu agregados de proteínas em áreas cerebrais de
pacientes com DP, incluindo o globus pallidus, o núcleo dorsal de o vago e o locus coeruleus. ​4​Pouco tempo
depois, em 1919, Tretiakoff validou a hipótese de Lewy descrevendo os agregados de proteínas observados
no tecido cerebral pós-morte de pacientes com DP, que ele chamou de corpos de Lewy. ​5
Patologicamente, a DP é caracterizada pela morte precoce de neurônios dopaminérgicos no SN ​pars
compacta​ (SNpc), levando à deficiência de dopamina nos gânglios da base e a um distúrbio do movimento
que consiste nos sintomas motores parkinsonianos clássicos. No entanto, a DP também está associada a
vários sintomas não motores, alguns dos quais precedem a disfunção motora em mais de uma década. A base
do manejo da DP é o tratamento sintomático com medicamentos que aumentam as concentrações de
dopamina no cérebro ou estimulam diretamente os receptores de dopamina.
Como observado acima, a DP começa anos antes do diagnóstico clínico, envolve várias regiões do cérebro e
acarreta sintomas motores e não motores. É um distúrbio neurodegenerativo lento e progressivo de etiologia
multifatorial, resultante de uma combinação de fatores genéticos e ambientais. Por exemplo, embora ainda
controversos, os fumantes têm duas vezes mais chances de desenvolver DP, ​6 os​ consumidores de cafeína
têm uma incidência menor da doença, ​7​ e a associação entre obesidade e exposição a herbicidas parece ser
um fator de risco para a neurodegeneração dopaminérgica. ​8​ Do ponto de vista genético, estudos mostraram
que mutações em diferentes genes - como Parkin, ​PINK1​ , DJ-1, ​LRRK2​ , ​GBA​ e​ATP13A2​ - estão implicados
em vários tipos de parkinsonismo, bem como na DP. ​9​ - ​11​ A DP hereditária é classificada como dominante ou
recessiva; a maioria dos casos geneticamente associados apresenta início precoce (raramente, até
juvenil). ​11​ , ​12
Na literatura, os fatores genéticos associados à DP têm sido frequentemente relacionados a mecanismos
causais como estresse oxidativo, excitotoxicidade do glutamato, disfunção mitocondrial, neuroinflamação,
apoptose e aumento da suscetibilidade dos neurônios dopaminérgicos do SNpc às neurotoxinas. ​9​ , ​10​ Uma
hipótese importante propõe que o estresse oxidativo gera radicais livres, como a dopamina quinona, que
podem reagir com a proteína citoplasmática α-sinucleína, produzindo protofibrilas que não podem ser
degradadas pelo sistema ubiquitina-proteassoma. Essas protofibrilas acumulam e geram inclusões
citoplasmáticas eosinofílicas (corpos de Lewy), causando a morte de neurônios dopaminérgicos na via
nigrostriatal. ​10​ , ​11​ , ​13
Embora o entendimento da fisiopatologia da DP tenha melhorado acentuadamente desde sua caracterização
inicial, um tratamento farmacológico eficaz para prevenir ou retardar a progressão da degeneração neuronal
dopaminérgica ainda não foi desenvolvido. A farmacoterapia da DP continua sendo paliativa, com o objetivo
de restaurar os níveis reduzidos de dopamina no estriado. ​14​ , ​15​ O tratamento padrão é baseado no ácido (S)
-2 amino-3- (3,4-di-hidroxifenil) propiônico, também conhecido como levodopa (L-DOPA). ​14​ , ​15 O​ L-DOPA é
considerado um medicamento seguro e eficaz para reduzir os sintomas motores da DP, com apenas efeitos
colaterais leves, como náusea, vômito e hipotensão postural. ​14​ , ​15​No entanto, a eficácia a longo prazo do
L-DOPA é limitada pelo desenvolvimento de complicações motoras incapacitantes, como a discinesia induzida
por L-DOPA, um conjunto de movimentos involuntários anormais que incluem coreia, hemibalismo e
atetose. ​16

Nesse contexto, é imprescindível a busca por tratamentos mais efetivos e toleráveis. Pesquisas pré-clínicas
oferecem oportunidades para a descoberta de novos medicamentos para DP, e modelos animais que imitam
alguns aspectos da DP têm sido usados ​na tentativa de descrever agentes candidatos
promissores. Pesquisamos no MEDLINE (via PubMed) artigos indexados publicados em inglês desde o início
até 2019. As seguintes palavras-chave foram usadas: cannabis; canabidiol e
neuroproteção; endocanabinóides e gânglios da base; Modelos animais de Parkinson; História de
Parkinson; Parkinson e canabidiol.

Modelos animais para o estudo da doença de Parkinson

Modelos baseados em toxinas

Modelos baseados em neurotoxinas são úteis para entender os mecanismos subjacentes à neurobiologia da
DP e à perda neuronal dopaminérgica observada na DP, através do uso de neurotoxinas como análogos da
dopamina (por exemplo, 6-hidroxidopamina [6-OHDA]), contaminantes da heroína sintética (por exemplo,
1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetra-hidropiridina [MPTP]), herbicidas (por exemplo, rotenona), metais pesados ​(por
exemplo, manganês e ferro) e lipopolissacarídeo (LPS).

A primeira substância relatada como causadora de lesões na via nigrostriatal em ratos foi o 6-OHDA. ​17​ Essa
toxina se acumula no citosol dos neurônios e promove a formação de peróxido de hidrogênio, outras espécies
reativas de oxigênio e quininas por auto-oxidação. ​18​ 6-OHDA é um composto hidrofílico e não pode
atravessar a barreira hematoencefálica. É administrado por injeção direta no SNpc, pacote medial do
prosencéfalo ou estriado, dependendo do objetivo do pesquisador (taxa e extensão da lesão). ​19​ Embora o
6-OHDA tenha sido o modelo mais comum na pesquisa pré-clínica, ele não é seletivo para transportadores de
dopamina e é comumente co-administrado com bloqueadores seletivos de captação de noradrenalina para
evitar a perda de neurônios noradrenérgicos. ​20​Outra desvantagem do uso do 6-OHDA depende da sua
incapacidade de produzir inclusões semelhantes ao corpo de Lewy. ​21
O MPTP é uma neurotoxina que é convertida em um metabólito intermediário pela ação da monoamina
oxidase B nas células da glia e depois oxidada em 1-metil-4-fenilpiridínio (MPP +). ​22 O​ MPP + possui alta
afinidade pelo transportador de dopamina, mas menor afinidade pelo transportador de noradrenalina e
serotonina. ​23​ Nos neurônios dopaminérgicos, o MPP + é seqüestrado em vesículas sinápticas ou
concentrado nas mitocôndrias, onde bloqueia a cadeia de transporte de elétrons. ​24​ Em macacos, a
administração de MPTP produz inclusões semelhantes ao corpo de Lewy, e a suscetibilidade a lesões
induzidas por MPTP aumenta com a idade. ​25
A rotenona é um pesticida que atua bloqueando a cadeia de transporte de elétrons mitocondrial, mitose e
proliferação celular. ​26​ A exposição sistêmica crônica à rotenona em ratos causa muitas características da DP,
incluindo degeneração nigroestriatal e inclusões do tipo Lewy, mas esse modelo é difícil de replicar devido à
alta mortalidade de animais. ​26​ , ​27​ Outro pesticida usado no estudo da DP é o paraquat, um dos herbicidas
mais utilizados na agricultura. ​26​ Compartilha da semelhança estrutural com o MPP +. ​26 O​ paraquat gera
inclusões semelhantes ao corpo de Lewy, ​26​ mas possui baixa especificidade para neurônios dopaminérgicos
e causa morte celular variável. ​26​ , ​28
O paraquat foi usado em conjunto com o etileno-bis-ditiocarbamato de manganês (maneb), um fungicida que
demonstrou potencializar os efeitos tóxicos do paraquat e do MPTP. ​26 Os​ resultados mostraram que o maneb
pode, por si só, diminuir a atividade locomotora e produzir perda de neurônios na substância negra. ​29​ A
exposição crônica ao manebe produz sinais de intoxicação por manganês, ​30​ seguida de uma síndrome
neurológica com anormalidades cognitivas, psiquiátricas e de movimento que se assemelham a algumas
características clínicas da DP. ​31​ Maneb parece atravessar a barreira hematoencefálica e inibir o complexo
mitocondrial III. ​32​ , ​33​O modelo paraquat / maneb pode induzir comprometimentos comportamentais e
motores, degeneração significativa relacionada à dopamina e resposta alterada à terapia com dopamina. Por
outro lado, foi relatado que múltiplas variantes deste modelo animal evocam nem a formação de corpos de
Lewy nem sintomas não motores. ​33​ Além disso, são relatados efeitos periféricos inespecíficos e indesejáveis,
principalmente nos pulmões (dificuldade respiratória), o que limita a utilização dessas toxinas. ​33

Modelos genéticos

Um grande estudo de análise do genoma implicou 28 variantes independentes em 24 ​loci​ na patogênese da

DP familiar. ​31​ Cinco genes associados à DP familiar foram extensivamente estudados e utilizados como
modelos genéticos da DP em roedores: α-sinucleína, ​PINK1​ , Parkin, DJ-1
e ​LRKK2​ . ​26​ , ​34​ , ​35​ Considerando que as formas mais prevalentes de DP envolvem vários genes e
alterações em muitas funções gênicas, ​26​ , ​36​espera-se que modelos monogênicos de DP sejam menos
bem-sucedidos do que modelos induzidos por toxinas para evocar perda na via noprostriatal
dopaminérgica. No entanto, modelos genéticos são ferramentas interessantes para ajudar a reconhecer se um
gene mutante está associado à progressão da DP em humanos, verificar o envolvimento de genes
desconhecidos na doença e entender os mecanismos genéticos mais comuns da DP. ​26
Vários estudos demonstraram a contribuição de fatores genéticos para o desenvolvimento da DP. Uma
metanálise avaliou a interação entre o diagnóstico de DP e os fatores de risco. A associação mais forte com o
diagnóstico tardio de DP foi encontrada em pacientes com parente de primeiro grau ou qualquer parente com
DP, sugerindo um risco aumentado de diagnóstico de DP em pacientes com histórico familiar de DP. ​37​ Mais
evidências convincentes da contribuição de fatores genéticos para a DP foram fornecidas pela descoberta de
formas monogênicas da doença. O gene ​SNCA​ , que codifica α-sinucleína, foi o primeiro a ser associado à DP
herdada. ​38​ Mutações nos genes ​LRRK2​ e Parkin foram associadas à DP dominante e recessiva,
respectivamente.​39​ , ​40​ Atualmente, o fator de risco genético mais significativo para o desenvolvimento de DP
parece ser uma mutação no gene ​GBA​ , que codifica a β-glucocerebrosidase. ​40​ , ​41

Endocanabinóides e gânglios da base

Estudos pré-clínicos sugeriram que a sinalização endocanabinóide desempenha um papel importante no

circuito dos gânglios da base. ​42​ - ​45 Os​ endocanabinóides são neurotransmissores derivados de fosfolipídios
da membrana produzidos sob demanda por enzimas expressas em todo o sistema nervoso central
(SNC). ​46​ , ​47​ Os principais ligantes endógenos são a anandamida (AEA) e o 2-araquidonoylglicerol
(2-AG). ​46​ , ​47 Os​ endocanabinóides se ligam aos receptores de canabinóides do subtipo 1 (CB ​1​ ) e 2
(CB ​2​ ) ​46​ , ​47​A AEA é sintetizada pela N-acil fosfatidiletanolamina fosfolipase D (NAPE-PLD) e degradada
pela amida hidrolase de ácido graxo (FAAH), ​46​ , ​47​ enquanto o 2-AG é sintetizado pela diacilglicerol lipase
(DGL) e degradada pela monoacilglicerol lipase. ​46​ , ​47
No estriado, o CB ​1​ é expresso em níveis baixos nos terminais glutamatérgicos e em níveis elevados nos
neurônios GABAérgicos nos neurônios de projeção espinhosa D1 (substância P) e D2 (encefalina). ​48​ A
co-localização dos interneurônios CB ​1​ e GABAérgicos é controversa. A dupla hibridação ​in situ​ revelou que
nem interneurônios somatostatinérgicos nem colinérgicos expressavam receptores CB ​1​ , ​49​ enquanto a
imuno-histoquímica GABAérgica mostrou alta imunorreatividade a CB ​1​ no pericário e axônios dos
interneurônios parvalbuminérgicos e baixos níveis de óxido nítrico sintase (NOS) / somatostatina positivos
interneurônios. ​48.​Por outro lado, outro estudo mostrou que a maior expressão de CB1 ocorre em
interneurônios de calbindina, com menor expressão em neurônios positivos para a parvalbumina. ​50​ Não foi
encontrada imunocoloração de CB 1​​ nos neurônios calretinina ou colecistocinina. ​48.
AEA sintetizada em neurônios GABAérgicos pós-sinápticos estriatais pode atuar nos terminais pré-sinápticos
glutamatérgicos, ​51​ diminuindo a liberação de glutamato das áreas corticais. ​52 A​ estimulação estriada
do receptor CB ​1​ é crítica para a depressão a longo prazo (LTD) nas sinapses
corticostriatais, ​52​ , ​53​ reduzindo assim a eficácia sináptica glutamatérgica. Os neurônios dopaminérgicos não
expressam receptores CB ​1​ , ​54​ mas o sistema endocanabinóide pode interagir indiretamente com a
neurotransmissão dopaminérgica no estriado, interferindo no controle dos movimentos voluntários. ​55​ , ​56​A
aplicação de agonistas canabinóides em fatias estriatais não produz efeito ou diminuição da liberação de
dopamina evocada por estimulação elétrica, ​57​ , ​58​ enquanto a administração sistêmica de
um agonista CB 1​​ leva à inibição da liberação de dopamina evocada pela estimulação por trem de pulso do
feixe medial do cérebro anterior. . ​59.
Os receptores CB ​1​ no estriado mediam déficits motores induzidos por canabinóides. ​60​ O principal
componente psicoativo da cannabis, o Δ9-tetra-hidrocanabinol (THC), exerce seus efeitos no SNC através da
ativação dos receptores CB ​1​ . ​61​ Consistente com os efeitos na função dos gânglios da base, a ativação
do CB 1​​ pelo THC (ou outros agonistas de canabinóides) altera o desempenho motor de maneira dependente
da dose, variando do aumento da mobilidade ​62​ , ​63​ à inibição da atividade espontânea, ​64​ , ​65​ locomoção
irregular, ou mesmo imobilidade (catalepsia). ​62​ , ​66​ , ​67
Por outro lado, a ativação do receptor CB ​1​ diminui a hiperlocomoção induzida por anfetaminas, bem como o
aumento da liberação de dopamina e glutamato no estriado. ​68​ Os receptores estriatais CB ​1​ também
diminuem a entrada GABAérgica nos neurônios dopaminérgicos do SNpc, modulando assim a atividade de
disparo desses neurônios. ​69​ Portanto, aceita-se que o sistema endocanabinóide modifica o funcionamento
estriatal e interfere no controle motor.

Canabidiol e neuroproteção

Ao contrário do THC, que provoca efeitos subjetivos pela ligação aos receptores CB ​1​ , o canabidiol (CBD), o
principal componente não psicotomimético de ​Cannabis sp. ,​ tem baixa afinidade para receptores
canabinóides. ​61​ , ​70​ CBD foi isolado por Adams et al. em 1940 ​71​ e sua estrutura foi identificada 23 anos
depois por Mechoulam & Shvo. ​72​ A concentração de CBD na cannabis é altamente variável, dependendo do
fenótipo da planta, das condições de cultivo e de qual parte da planta é usada para obter o extrato. ​73
CBD exerce uma variedade de efeitos em animais de laboratório e humanos, incluindo sedativo /
hipnótico, ​74​ , ​75​ anticonvulsivo, ​76​ , ​77​ neuroprotector, ​78​ , ​79​ cardiovascular, ​80​ , ​81​ e
anti-inflamatória. ​78​ , ​82​ Essas ações não parecem ser dependentes dos receptores canabinóides. ​61​ Além
disso, não se sabe completamente se esses efeitos estão relacionados ao CBD ou a outros compostos
orgânicos presentes nos extratos de ​cannabis​ , como mirceno e outros terpenóides. ​83​ Portanto, são
necessários mais estudos usando CBD puro para confirmar os efeitos do CBD em animais e humanos.
O CBD se liga aos receptores canabinóides apenas em concentrações micromolares (≥ 10 µM), ​61​ atuando
como agonista de baixa potência, agonista inverso, antagonista ou até como modulador alostérico do receptor
canabinóide CB1. ​61​ , ​84​ , ​85​ Alguns efeitos do CBD são antagonizados por agonistas inversos do
receptor CB 1​​ , ​61​ sugerindo que esse medicamento possa exercer “agonismo indireto”
nos receptores CB ​1​ . Estudos mostram que o CBD pode aumentar a concentração de AEA bloqueando o
transportador de membrana AEA (AMT) ou a enzima FAAH, que catalisa a hidrólise de AEA. ​61​ , ​86​ , ​87
O​ CBD também melhora a fluidez da membrana, ​88​aumenta os níveis de 2-AG ​89​ e regula positivamente a
expressão do receptor CB ​1​ . ​90
Vários estudos demonstraram as propriedades neuroprotetoras do CBD em diferentes condições, como
encefalopatia hipóxico-isquêmica do recém-nascido, ​79​ hipoperfusão cerebral crônica, ​91​ sobrecarga de ferro
neonatal, ​92​ e convulsões induzidas pelo ácido cainico. ​93​ As propriedades neuroprotetoras do CBD parecem
não depender da ativação direta dos receptores CB ​1​ , ​94​ , mas podem estar relacionadas à redução da
excitotoxicidade do glutamato e do estresse oxidativo, ​79​ diminuição da neuroinflamação, ​91​ ação
anti-apoptótica ​92​ ou modulação / polarização de células da glia. ​93
Apesar do envolvimento dos receptores CB ​2​ no efeito neuroprotetor do CBD em um modelo
hipóxico-isquêmico em camundongos recém-nascidos ​79​ , ​79​ a possibilidade de sua ação direta nesses
receptores permanece controversa. ​86​ , ​87 A​ CBD também interage com vários outros alvos. ​61​ , ​87​ Um deles
é uma família de receptores ionotrópicos permeáveis ​a cátions monovalentes e cálcio denominados vanilóides
potenciais do receptor transitório (TRPV). ​87​ , ​95​Em baixas concentrações (escala sub micromolar), o CBD se
liga ao transportador de nucleosídeo equilibrado (ENT), ao potencial transitório do receptor melastatina tipo 8
(TRPM8), ao receptor da serotonina 1A (5-HT1A), aos receptores de glicina A1 e A3 e ao potencial transitório
do receptor anquirina tipo 1 (TRPA1). ​46​ , ​61​ Por outro lado, em altas concentrações (escala micromolar), o
CBD ativa os receptores TRPV2, TRPV3 e TRPV4 e o receptor γ ativado por proliferador de peroxissomo
(PPAR-γ). ​61​ , ​87 O​ CBD também é um antagonista do receptor órfão GPR55 ​96​ e também pode aumentar o
cálcio intracelular em condições fisiológicas, mas diminuí-lo sob condições de alta excitabilidade
neuronal. ​61​ , ​87

Canabidiol e doença de Parkinson

Estudos pré-clínicos

Várias experiências ​in vitro​ demonstraram efeitos neuroprotetores promissores do CBD em modelos de
DP. Em um desses modelos, usando células PC12 e SH-SY5Y tratadas com MPP +, o CBD aumentou a
viabilidade celular, a diferenciação e a expressão de proteínas axonal (GAP-43) e sináptica (sinafofisina e
sinapsina I). Esses efeitos neuroprotetores dependiam da ativação dos receptores da tropomiosina quinase A
(TrkA). ​O 97​ CBD também protegeu as células SH-SY5Y contra reduções na viabilidade induzidas por LPS e
β-amilóide, enquanto aumentava a viabilidade das células SH-SY5Y incubadas com meio condicionado
derivado de micróglias previamente ativadas com LPS. ​98​Em outro estudo, o CBD embotou os aumentos
induzidos por ATP na geração intracelular de cálcio e nitrito evocado por LPS nas células microgliais N13 e
nas microglia primárias de ratos. Os autores sugeriram que a redução da ativação das células microgliais
promovida pelo CBD depende dos receptores canabinóides e adenosina. ​99
Estudos ​in vivo​ , no entanto, produziram resultados conflitantes. Um modelo neurotóxico de DP usando MPTP
demonstrou que a administração de CBD (5 mg / kg) por 5 semanas não reduziu déficits motores ou perda
neuronal dopaminérgica na via nigrostriatal. ​100​ Por outro lado, a administração diária de CBD (3 mg / kg)
durante 14 dias reduziu tanto a expressão hidroxilase depleção de dopamina e tirosina dentro do corpo
estriado de ratos que receberam 6-OHDA. ​101​ Esses efeitos neuroprotetores foram associados a uma
regulação positiva dos níveis de mRNA da superóxido dismutase de Cu 2+​ ​ / Zn, uma enzima essencial para o
controle endógeno do estresse oxidativo. ​102
Além desses efeitos neuroprotetores, um estudo sugeriu um efeito antidiscinético putativo do CBD em
camundongos hemiparkinsonianos tratados cronicamente com L-DOPA. Note-se que, embora a administração
de CBD não reduz a discinesia induzida por L-DOPA, quando combinada com o capsazepina antagonista do
receptor TRPV1, foi observado um efeito antidiscinético significativo (a capsazepina isolada também não
diminuiu a discinesia). ​103 O​ CBD também impediu o comportamento cataleptico induzido pela administração
repetida de reserpina ​91​ ou haloperidol. No último caso, o CBD também produziu uma redução na expressão
da proteína c-Fos no estriado dorsal através da ativação dos receptores de serotonina 5-HT1A. ​104​ , ​105

Estudos clínicos

Um estudo piloto de rótulo aberto realizado em pacientes com DP mostrou que doses orais de CBD variando
de 150 a 400 mg / dia, combinadas com agentes antiparkinsonianos clássicos, reduziram os sintomas
psicóticos avaliados por diferentes escalas (a Brief Psychiatric Rating Scale [BPRS] e a Parkinson
Questionário de psicose [PPQ]) sem influência nos sinais cognitivos e motores e sem efeitos colaterais
graves. ​106​ Em uma série de casos com quatro pacientes, o CBD reduziu a frequência de eventos
relacionados ao distúrbio do comportamento do sono REM. ​107
Em um ensaio clínico subsequente, 300 mg / dia de CBD melhoraram a mobilidade, o bem-estar emocional, a
cognição, a comunicação e o desconforto corporal em comparação com o placebo. Os autores sugerem que
esse efeito pode estar relacionado às propriedades ansiolíticas, antidepressivas e antipsicóticas do
CBD. ​108​ Como o CBD é bem tolerado em humanos, esses efeitos positivos sugerem que pode ser uma
alternativa promissora para a farmacoterapia da DP.

Portanto, são necessários estudos randomizados, duplo-cegos, controlados por placebo, com amostras
maiores de pacientes com DP, para elucidar a possível eficácia e mecanismos envolvidos no potencial
terapêutico do CBD nesse distúrbio do movimento. Isso também incluirá os efeitos putativos do CBD na
prevenção de efeitos colaterais graves induzidos por L-DOPA e na progressão da DP. Além disso, estudos
conduzidos especificamente para avaliar o perfil de segurança do CBD em pacientes com DP (incluindo
segurança a longo prazo), possíveis interações com outros medicamentos antiparkinsonianos e possíveis
efeitos colaterais, bem como a janela terapêutica para sintomas de DP motores e não motores também são
necessários.

Divulgação

JAC, FSG e AWZ são co-inventores (Mechoulam R, Crippa JA, Guimarães FS, Zuardi A, Hallak, JE e Breuer
A) da patente “Compostos de CBD fluorados, composições e usos dos mesmos. Bar. Nº: WO /
2014/108899. Número internacional do pedido: PCT / IL2014 / 050023 ”Def. US no. Reg. 62193296; 29 de
julho de 2015; INPI em 19 de agosto de 2015 (BR1120150164927). A Universidade de São Paulo licenciou a
patente para a Phytecs Pharm (Resolução USP nº 15.1.130002.1.1). A USP tem um acordo com a
Prati-Donaduzzi (Toledo, Brasil) para "desenvolver um produto farmacêutico contendo CBD sintético e provar
sua segurança e eficácia terapêutica no tratamento de epilepsia, esquizofrenia, doença de Parkinson e
transtornos de ansiedade". Os outros autores não relatam conflitos de interesse.
Da ​cannabis sativa​ ao canabidiol: candidato terapêutico promissor para o tratamento de doenças
neurodegenerativas
Este artigo foi ​citado por​ outros artigos no PMC.

Resumo
Vamos para:

Introdução

O estresse oxidativo (OS) desempenha um papel crucial no envelhecimento e ocorre virilmente quando a
atividade das enzimas antioxidantes não é suficiente para contrabalançar a geração de espécies reativas de
oxigênio (ERO). Nesta última condição, a alta produção de ERO pode alterar a estrutura de proteínas, lipídios,
ácidos nucleicos e componentes da matriz, levando à morte celular programada ( ​Cassano et al.,
2016​ ). Diferentes tecidos apresentam diferentes suscetibilidades à OS. O sistema nervoso central (SNC) é
extremamente sensível a esse tipo de dano por várias razões. Nesse sentido, o SNC possui um baixo nível de
enzimas antioxidantes ​enzimas antioxidantes, como tiorredoxina​4-6​, tiorredoxina redutase​4​, peroxirredoxina​6,7​,
glutationa peroxidase​7​, CuZn-SOD​6,8 e, também, ferritina​6 e transferrina​9​.​, um alto teor de substratos oxidáveis
​e uma grande quantidade de ERO produzida durante reações neuroquímicas ( ​Trabace et al., 2004​ ; ​Uttara et
al., 2009​) Além de vários outros fatores ambientais ou genéticos, a OS contribui para a neurodegeneração,
uma vez que os radicais livres atacam as células neurais. Portanto, os neurônios sofrem uma perda funcional
ou sensorial durante o processo neurodegenerativo. Mesmo que o oxigênio seja indispensável para a vida, um
metabolismo desequilibrado e um excesso de produção de ERO terminam em uma série de condições
patológicas, como a doença de Alzheimer (DA), a doença de Parkinson (DP) e muitos outros distúrbios
neurais. Os radicais livres causam lesões nas proteínas e no DNA, ativam o processo inflamatório e a
apoptose celular subsequente ( ​Cassano et al., 2012​ ).
Nos últimos anos, há uma necessidade urgente de descobrir novos alvos de medicamentos que possam
combater efetivamente as alterações celulares causadas pelo estresse das membranas celulares. Nesta
perspectiva, o ​sistema endocanabinóide (eCB) atraiu considerável interesse devido à interação atual entre
eCB e diferentes vias de sinalização dependentes de redox. Os dois eCBs bem caracterizados são
N-araquidonoil-etanolamina ou anandamida (AEA) e 2-araquidonoil-glicerol (2-AG), que são ​sintetizados sob
demanda em resposta a elevações de cálcio intracelular ( ​Howlett et al., 2002​ ; ​Di Marzo et al., 2005​ ) e
metabolizados respectivamente pela amida hidrolase de ácidos graxos (FAAH) e lipase de monoglicerídeo
(MAGL) ( ​Piomelli, 2003​ ; ​Di Marzo, 2008​ ;​Kunos et al., 2009​ ). Os receptores canabinóides (CB) existem em
dois subtipos diferentes: tipo 1 (CB1) e tipo 2 (CB2) ( ​Matsuda et al., 1990​ ; ​Munro et al., 1993​ ; ​Howlett et al.,
2002​ ). Os receptores CB1, clonados pela primeira vez em 1990, são amplamente distribuídos no corpo e no
SNC são distribuídos no nível dos gânglios da base, cerebelo, hipocampo, núcleo caudado, putâmen,
hipotálamo, amígdala e medula espinhal ( ​Matsuda et al., 1990​ ). Os receptores CB2, clonados em 1993,
estão localizados principalmente em células do sistema imunológico com alta densidade no baço, linfócitos T e
macrófagos ( ​Munro et al., 1993​) Sua distribuição anatômica os correlaciona com as ações pelas quais eles
são responsáveis: a ativação dos receptores CB1 tem efeitos eufóricos e ações antioxidantes, antieméticas,
analgésicas, antiespasmódicas e estimulantes do apetite. Quanto aos receptores CB2, sua estimulação é
atribuída às ações anti-inflamatórias e imunomoduladoras do CB ( ​Cassano et al., 2017​ ).
Evidências convergentes sugerem fortemente que os eCBs atuam como mensageiros sinápticos retrógrados
( ​Kano et al., 2002​ ; ​Freund et al., 2003​ ). Esse fenômeno é iniciado pós-sinapticamente por uma elevação da
concentração citoplasmática de cálcio que induz a produção e liberação no espaço sináptico dos
eCBs. Posteriormente, os eCBs ativam os receptores CB1 em níveis pré-sinápticos e bloqueiam a liberação
dos terminais de neurônios de diferentes transmissores, como ácido gama-aminobutírico (GABA), glutamato,
dopamina (DA), noradrenalina, serotonina e acetilcolina ( ​Howlett et al. , 2002​ ; ​Pertwee e Ross, 2002​ ; ​Szabo
e Schlicker, 2005​) Esses mecanismos mediados pela ativação dos receptores pré-sinápticos CB1 são
denominados supressão da inibição (DSI) e excitação (DSE) induzida pela despolarização, respectivamente,
quando estão envolvidas as transmissões sinápticas inibitórias (GABA) ou excitatórias (glutamato) ( ​Kano et
al., 2002​ ; ​Freund et al., 2003​ ). Da mesma forma, os receptores CB2 podem modular a produção e a função
de certas citocinas inflamatórias em vários níveis, ativando as células imunes e modulando sua migração
dentro e fora do SNC ( ​Freund et al., 2003​ ; ​Walter e Stella, 2004​) As enzimas antioxidantes podem ser
moduladas pelos eCBs, não apenas atuando nos receptores CB1 e CB2, mas também através do potencial
receptor transitório vanilóide-1 (TRPV1), do receptor ativado pelo proliferador de peroxissomo alfa (PPAR-alfa)
e dos receptores órfãos N - receptor de araquidonilglicina ou receptores acoplados à proteína G 18 (GPR18)
GPR19 e GPR55 ( ​Piomelli, 2003​ ; ​McHugh et al., 2010​ ; ​Howlett et al., 2011​ ; ​McHugh, 2012​ ). Portanto, a
modulação direta e / ou indireta das vias pelas quais os eCBs amortecem o sistema operacional pode
representar uma estratégia promissora para reduzir os danos causados ​por um desequilíbrio redox ( ​Gallelli et
al., 2018​) Além disso, os antioxidantes agora são vistos como uma terapia convincente contra a
neurodegeneração grave, pois têm a capacidade de combatê-lo bloqueando o sistema operacional. Dieta e
ervas medicinais são uma importante fonte de antioxidantes. O reconhecimento da terapia antioxidante a
montante e a jusante da OS provou ser uma ferramenta eficaz para melhorar qualquer dano neuronal e para
eliminar os radicais livres. Os antioxidantes têm um amplo campo de aplicação e podem impedir que a OS
interaja com os íons metálicos, que desempenham um papel importante no acúmulo de placa neuronal ( ​Uttara
et al., 2009​ ).
Na última década, existem evidências crescentes de que os metabólitos secundários das plantas, extraídos de
ervas medicinais, podem representar ​compostos de chumbo ??? para a produção de medicamentos contra a
inflamação e a OS, protegendo da perda de células neuronais ( ​Giudetti et al., 2018​ ). Entre essas ervas
medicinais, a ​Cannabis sativa​ , comumente conhecida como maconha, contém um ​conjunto de metabólitos
secundários ​de plantas com efeitos terapêuticos ( ​Gugliandolo et al., 2018​ ). Nesse contexto, o canabidiol
(CBD), o extrato não-psicotrópico de CB da ​Cannabis sativa,​ pode representar um protótipo para o
desenvolvimento de drogas anti-inflamatórias para aquelas patologias humanas em que tanto a inflamação
quanto a OS desempenham um papel fundamental em sua etiologia e progressão ( ​Izzo et al., 2009​) A esse
respeito, ainda faltam terapias que efetivamente combatam a progressão da doença no campo dos distúrbios
neurodegenerativos, e principalmente com a DA. O CBD, que modula o sistema eCB, mas também possui
mecanismo independente do receptor de CB, parece ser um protótipo para o desenvolvimento de drogas
anti-inflamatórias.
Portanto, a presente revisão resume os principais mecanismos moleculares através dos quais o CBD exerce
seus efeitos benéficos que podem ter um impacto considerável na progressão dos principais distúrbios
neurodegenerativos.

Cannabis sativa

Os efeitos médicos e psicotrópicos da ​Cannabis sativa​ são bem conhecidos desde muito tempo. Uma
infinidade de metabólitos secundários foi extraída desta planta e a maioria deles foi usada para fins
terapêuticos por muitas culturas. Até agora, mais de 400 compostos químicos foram isolados da ​Cannabis
sativa​ e, entre eles, mais de 100 compostos de terpenofenol denominados fitocanabinóides foram detectados
( ​Mechoulam e Hanus, 2000​ ; ​Mechoulam et al., 2007​ ). Como tal, a ​Cannabis sativa​ pode ser considerada
uma biblioteca natural de compostos únicos. O fitocanabinóide mais abundante é o Δ9-tetra-hidrocanabinol
(delta-9-THC), responsável pelo efeito psicotrópico associado à ​cannabisc​ onsumo, e então o constituinte não
psicoativo CBD e canabigerol (CBG) ( ​Mechoulam e Hanus, 2000​ ; ​Mechoulam et al., 2007​ ; ​Gugliandolo et al.,
2018​ ).​tabela 1​mostra a lista dos fitocanabinóides não psicoativos mais abundantes isolados da ​Cannabis
sativa​ . Os fitocanabinóides imitam os efeitos dos eCBs que regulam a transmissão de impulsos nervosos em
algumas sinapses das vias nervosas, causando em particular uma redução na liberação de sinais entre as
células ( ​Piomelli, 2003​ ).
tabela 1

Fitocanabinóides não psicoativos mais abundantes isolados de ​Cannabis sativa​ : estruturas químicas e ações
farmacológicas.

Devido à sua alta lipofilicidade e sua afinidade por membranas lipídicas, o delta-9-THC deveria ligar uma
variedade não específica de membranas celulares, modificando sua fluidez em vez de ativar um receptor
específico ( ​Hillard et al., 1985​ ). Posteriormente, essa primeira hipótese foi completamente descartada e foi
demonstrado que o delta-9-THC exerce seus efeitos combinando-se com um receptor seletivo ( ​Devane et al.,
1988​ ; ​Howlett et al., 1990​ ; ​Matsuda et al., 1990​) ​De fato, muitos autores demonstraram que o delta-9-THC
exerce seus efeitos psicoativos agindo sobre os receptores CB1, enquanto CDB e CBG, dois CBs não
psicoativos, têm baixa afinidade pelos receptores CB1 e CB2 e inibem a FAAH, resultando em níveis
aumentados de eCBs , que por sua vez ativam ainda mais o receptor CB1 ( ​Devane et al., 1988​ ; ​Howlett et
al., 1990​ ; ​Matsuda et al., 1990​ ; ​Appendino et al., 2011​ ). Entre os fitocanabinóides não psicoativos, a maioria
das evidências se concentra no CBD, que possui alta atividade antioxidante e anti-inflamatória, além de
propriedades neuroprotetoras, ansiolíticas e anticonvulsivantes ( ​Pellati et al., 2018​ ).

Mecanismos de ação da CDB

Após o delta-9-THC, o CBD é o segundo fitocanabinóide mais abundante e é um dos principais constituintes
não-ativos do CB na planta da ​Cannabis sativa,​ representando até 40% do extrato de ​Cannabis​ . Adams e
colegas isolaram o CBD pela primeira vez, enquanto Mechoulam e colegas analisaram sua estrutura e
estereoquímica (revisado em ​Pertwee, 2006​ ). Terapeuticamente, o CBD já está disponível isoladamente e em
formulação com delta-9-THC ( ​Booz, 2011​) Em particular, um medicamento contendo apenas CBD (Epidiolex)
é usado em crianças afetadas por epilepsia resistente a outros tratamentos, bem como em combinação
(proporção 1: 1) com delta-9-THC (CBD / delta-9-THC, Sativex / Nabiximols) é atualmente usado para tratar a
espasticidade observada em pacientes afetados por esclerose múltipla ( ​Pertwee, 2008​ ; ​Devinsky et al.,
2016​ ). Comparado ao delta-9-THC, o CBD possui um melhor perfil de segurança e é bem tolerado quando
administrado em animais e pacientes, mesmo em altas doses (até 1.500 mg / dia) ( ​Bergamaschi et al.,
2011​ ). De fato, os autores demonstraram que o CBD não alterou parâmetros cardiovasculares, temperatura
corporal, funções psicomotoras e psicológicas, além de não induzir catalepsia como delta-9-THC
(​Bergamaschi et al., 2011​ ). Diferentemente do delta-9-THC, ​o CBD não tem como alvo direto os receptores de
CB, ​e essa característica pode justificar seu melhor perfil de segurança em comparação ao delta-9-THC
( ​Pertwee, 2006​ ; ​Thomas et al., 2007​ ).
Embora a farmacodinâmica do CBD não esteja totalmente esclarecida, diferentes evidências foram
acumuladas mostrando que o CBD parece atuar em diferentes vias. A esse respeito, embora o CBD mostre
afinidade muito menor que o delta-9-THC para os receptores CB1 e CB2, ele é capaz de antagonizar ​in vitro
os​ agonistas do receptor CB1 / CB2 ​em​ concentrações razoavelmente baixas (faixa nanomolar) ( ​Thomas et
al., 2007​ ) . Em particular, foi demonstrado por estudos ​in vitro​ que o CBD é capaz de atuar como agonista
inverso dos receptores CB1 / CB2, uma ação subjacente ao antagonismo de CP55940 e R - (+) - WIN55212
no receptor CB1 / CB2 ( ​Thomas et al. ., 2007​) Foi levantada a hipótese de que as ações anti-inflamatórias do
CBD podem ser devidas à sua capacidade de atuar como agonista inverso do receptor CB2 ( ​Pertwee,
2006​ ). Além dos receptores de CB, o CBD também foi perfilado para outros substratos farmacológicos. A esse
respeito, o CBD também mostrou afinidade com os receptores ativados pela proliferação de peroxissomas
(PPARs), que são uma família de fatores de transcrição induzíveis por ligantes que pertencem à superfamília
de receptores do hormônio nuclear. Em humanos, existem três isoformas PPAR PPARα, PPARβ / δ e PPARγ
que são codificadas por genes separados e são expressas diferentemente em órgãos e tecidos ( ​Michalik et
al., 2006​) O CBD parece ativar a atividade transcricional do PPARγ, que desempenha um papel primário na
regulação da formação de adipócitos, sensibilidade à insulina e ativação da resposta inflamatória ( ​O'Sullivan,
2007​ ; ​O'Sullivan e Kendall, 2010​ ; H
​ ind et al., 2016​ ; ​O'Sullivan, 2016​ ). A esse respeito, o CBD ativa os
receptores PPARγ, levando a uma menor expressão de genes pró-inflamatórios, que foram inibidos pelos
antagonistas do PPARγ ( ​Esposito et al., 2007​ ; ​Esposito et al., 2011​ ; ​O'Sullivan, 2016​ ).
Além disso, o CBD exerce efeitos antioxidantes mais potentes do que outros antioxidantes, como ascorbato ou
α-tocoferol, em estudo ​in vitro​ onde neurônios corticais foram tratados com concentrações tóxicas de
glutamato ( ​Hampson et al., 1998​ ; ​Campos et al., 2016​ ) .
O efeito neuroprotetor estava presente, independentemente de o insulto ter sido causado pela ativação do
receptor de N-metil-D-aspartato (NMDA), receptor de ácido α-amino-3-hidroxi-5-metil-4-isoxazolepropiônico
(AMPA) ou receptores de cainato e, mais interessante, não foi mediado pelos receptores de CB, uma vez que
o antagonista de CB não foi afetado ( ​Hampson et al., 1998​ ). O último resultado sugere que o CBD pode ser
um potente antioxidante sem efeitos colaterais psicotrópicos, mediados pela ação direta nos receptores de CB.
O efeito anti-inflamatório do CBD também é mediado pelo receptor da adenosina A ​2A​ (A ​2A​ ) cuja ativação
amortece o sistema imunológico, levando a uma redução da apresentação do antígeno, tráfico de células
imunes, proliferação de células imunes, produção da citocina pró-inflamatória, e citotoxicidade ( ​Magen et al.,
2009​ ). De fato, foi demonstrado que o CBD melhora a sinalização do receptor ​A2A​ pela inibição da atualização
celular de um transportador de adenosina, levando a efeitos anti-inflamatórios e antioxidantes ( ​Carrier et al.,
2006​ ). Da mesma forma, CGS-21680, que é um agonista do receptor A ​2A​ , imita as ações do CBD que foram
suprimidas por um A ​2A​antagonista (isto é, ZM241.385) ( ​Martín-Moreno et al., 2011​ ).
A propriedade neuroprotetora do CBD parece ser devida também à ativação dos receptores 5-hidroxitriptamina
subtipos 1A (5-HT1A), que estão localizados nas membranas pré e pós-sinápticas em várias regiões do
cérebro ( ​Hoyer et al., 1986​ ). Russo e colegas demonstraram pela primeira vez que o CBD é capaz de ativar
os receptores 5-HT1A ( ​Russo et al., 2005​ ). Um apoio adicional a esta primeira observação foi dado por um
estudo recente em que os autores descobriram que o efeito do CBD foi bloqueado pelo WAY-100135, um
antagonista seletivo do receptor 5-TH1A ( ​Galaj et al., 2019​ ).
Finalmente, foi demonstrado que o CBD tem um efeito direto nas mitocôndrias ( ​da Silva et al., 2018​ ). A esse
respeito, é amplamente aceito que a disfunção mitocondrial pode contribuir para a neurodegeneração devido à
superprodução de ERO e acúmulo de ferro ( ​Mills et al., 2010​ ; ​Serviddio et al., 2011​ ; ​Cassano et al.,
2012​ ; ​Cassano et al. ., 2016​ ; ​Romano et al., 2017​) Em particular, a sobrecarga de ferro induz várias
alterações mitocondriais, como deleções aumentadas de DNA mitocondrial (mtDNA) e redução da modulação
epigenética do mtDNA, níveis de ferritina mitocondrial e atividade succinato de desidrogenase, que podem
alterar completamente a viabilidade celular, levando ao processo neurodegenerativo ( ​da Silva et al. .,
2018​ ). Curiosamente, ​todas essas alterações mitocondriais induzidas por ferro foram completamente
revertidas pelo CBD​,​????????como????? O CBD reverteu os efeitos induzidos pelo ferro, recuperando os
níveis de hidroximetilação, de ferritina mitocondrial, da atividade da Succinato dehidrogenase, e das proteínas
apoptóticas Caspase 3, Caspase 9, PARP e APAF1 a níveis comparáveis com o controle. Os resultados
sugerem que o ferro pode afetar mecanismos de funcionamento mitocondrial e desencadear vias de morte
celular por apoptose. A reversão de alguns desses efeitos pelo CBD indica o seu potencial neuroprotetor. o
que promove a sobrevivência das células neurais ( ​da Silva et al., 2018​ ). Além disso, a doxorrubicina, uma
droga quimioterapêutica de amplo espectro, induz uma cardiotoxicidade dependente da dose através da
desregulação de várias vias de sinalização metabólica, incluindo disfunção mitocondrial ( ​Hao et al., 2015​) Em
particular, a doxorrubicina reduz a atividade dos complexos mitocondriais do miocárdio (I e II) e da glutationa
peroxidase, levando a um aumento da geração de EROs ( ​Hao et al., 2015​ ). Curiosamente, o CBD atenuou
significativamente a cardiotoxicidade e a disfunção cardíaca induzidas por doxorrubicina, melhorando a
atividade do complexo mitocondrial I e ​melhorando a biogênese mitocondrial ( ​Hao et al., 2015​ ).
Como o CBD tem como alvo vários substratos, pode ser um bom candidato como medicamento multimodal
para os principais distúrbios neurodegenerativos, como DP e DA. ​figura 1​ mostra os efeitos do CBD na DP e
na DA.

figura 1

Efeito do canabidiol (CBD) na doença de Parkinson e na doença de Alzheimer (DA). O CBD antagoniza a ação
dos receptores canabinóides (CB1, CB2), agindo como agonista reverso e modulador alostérico negativo de
ambos os receptores. O CBD também inibe a amida hidrolase de ácidos graxos (FAAH), resultando em níveis
aumentados de endocanabinóides (CEs). Os CEs ativam os efeitos anti-oxidantes e anti-inflamatórios que são
parcialmente mediados pelas ações do CBD da subfamília V do canal catiônico potencial do receptor
transitório V 1 (TRPV1) [1]. O CBD liga os receptores ativados por proliferador de peroxissomo (PPARs),
antagoniza a ação do fator nuclear kappa-intensificador da cadeia leve das células B ativadas (NFkB) e reduz
a expressão de enzimas pró-inflamatórias, como óxido nítrico sintase induzível (iNOS), ciclooxigenase-2
(COX-2), e citocinas pró-inflamatórias [2]. Ativação do PPARγ modulando a expressão de mediadores
pró-inflamatórios como óxido nítrico (NO), fator de necrose tumoral α (TNF-α), interleucina 1β (IL-1β),
interleucina 6 (IL-6), iNOS e COX-2 [3] O CBD regula negativamente os genes da β- e γ-secretase, levando a
uma redução na produção de amilóide-β (Aβ) [4]. O CBD é capaz de reduzir o estresse oxidativo (OS) através
da atenuação da desregulação mitocondrial e geração de espécies reativas de oxigênio (ERO) ou pela
diminuição da expressão de várias ERO que geram isoformas de nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato
(NADPH) oxidase [5]. A estimulação do potencial receptor transitório vanilóide-1 (TRPV1) pelo CBD pode
ativar a sinalização de fosfoinositida 3-cinases / proteína cinase B (PI3K / Akt), que por sua vez inibe a
glicogênio sintase-cinase 3 β (GSK-3β) pela fosforilação de Ser9, reduzindo assim a fosforilação da tau [6]. O
CBD reduz a atividade de p-GSK-3β, a forma fosforilada ativa de GSK3-β, e causa um aumento na via Wnt /
β-catenina. A ativação dessa via pode proteger contra a neurotoxicidade do SO e Aβ na DA [7].

CBD e PD

A DP é um distúrbio neurodegenerativo progressivo caracterizado virilmente por alterações motoras, como

acinesia, bradicinesia, tremores, instabilidade postural e rigidez. Embora a etiologia da DP ainda seja
amplamente ilusória, sua fisiopatologia é caracterizada pela perda de neurônios DA substância substantiva
nigra DA do mesencéfalo e evidências esmagadoras indicam que a OS é um fator central na fisiopatologia da
DP ( ​Hirsch et al., 1988​ ; ​Branchi et al., 2010​ ; ​Aureli et al., 2014​ ). ​Foi demonstrado em modelo animal da DP
que o CBD exerce um efeito neuroprotetor como composto antioxidante, agindo através de um mecanismo
independente do receptor de CB ( ​Fernández-Ruiz et al., 2013​) De fato, em camundongos lesionados com
6-hidroxidopamina, o CBD foi capaz de reduzir significativamente a depleção de DA e atenuar o SO,
aumentando a expressão de Cu, Zn-superóxido dismutase (SOD), que é um importante mecanismo endógeno
que defende a célula contra o SO ( ​Fernández-Ruiz et al., 2013​ ; ​Martinez et al., 2015​ ). Esta última evidência
indica que CBs com propriedades antioxidantes independentes do receptor CB atenuam a neurodegeneração
de fibras dopaminérgicas nigrostriatais que ocorrem na DP ( ​García-Arencibia et al., 2007​) Esta tese é
reforçada pela observação de que o CBD reduz a morte celular neuronal no estriado que ocorre após a
administração do ácido 3-nitropropiônico (3NP), um inibidor do complexo mitocondrial II. Em particular, os
autores demonstraram que a administração de 3NP causa uma redução dos níveis de GABA e atrofia estriatal
dos neurônios GABAérgicos, conforme indicado pela diminuição dos níveis de mRNA do proenkephalin
(PENK), substância P (SP) e enolase neuronal específica (NSE ) Além disso, a inibição do complexo
mitocondrial II induzido pelo 3NP reduz a expressão do mRNA da superóxido dismutase-1 (SOD-1) e -2
(SOD-2), que são defesas endógenas contra o sistema operacional. Curiosamente, após a administração de
3NP, o CBD pode abolir completamente a atrofia dos neurônios GABAérgicos e aumentar significativamente
os níveis de mRNA do SOD-2, bem como atenuar a redução dos níveis de mRNA de SOD-1 e
PENK. Diferentemente, após a administração de 3NP, a administração de araquidonil-2-cloroetilamida (ACEA)
ou HU-308, respectivamente agonista dos receptores CB1 e CB2, não reverteu a atrofia estriatal dos
neurônios GABAérgicos, bem como não restaurou as defesas endógenas contra o SO induzido pelo 3NP
(​Sagredo et al., 2007​ ). Tomados em conjunto, esses resultados sugerem que o CBD exerce um papel
neuroprotetor nos neurônios GABAérgicos que se projetam do estriado para a substância negra e confirmam
ainda que seu mecanismo é independente do receptor de CB ( ​Sagredo et al., 2007​) Além disso, em outro
estudo, os autores exploraram se o CBD era capaz de atenuar os sintomas patológicos da DP modulando o
GPR55. Em particular, os camundongos foram tratados por 5 semanas com
1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetra-hidropiridina / probenecide (MPTPp), o que induziu comprometimento da função
motora e perda de neurônios positivos para tirosina hidroxilase e níveis de DA em o cérebro. Este modelo
crônico de camundongo de DP foi tratado com CBD anormal (Abn-CBD), um isômero sintético de CBD e
agonista de GPR55. Os autores descobriram que as principais características da DP induzidas por MPTPp
foram evitadas pelo tratamento farmacológico, sugerindo que a ativação do GPR55 pode ser uma boa
estratégia para o tratamento da DP ( ​Celorrio et al., 2017​ ).

CBD e AD

A DA é a forma mais comum de demência que afeta os idosos e sua patologia é caracterizada pelo acúmulo
de placas amilóides β (Aβ) e emaranhados neurofibrilares de tau (NFTs) no cérebro ( ​Querfurth e LaFerla,
2010​ ).
Embora a etiologia da DA pareça estar ligada a uma infinidade de mecanismos, a inflamação parece
desempenhar um papel crucial em sua patogênese ( ​Bronzuoli et al., 2018​ ; ​Scuderi et al., 2018​ ). Os
benefícios esperados das terapias atuais são limitados ( ​Sabbagh, 2009​ ; ​Neugroschl e Sano, 2010​ ), de modo
que há uma demanda premente por descobrir novos tratamentos capazes de retardar a progressão da doença
ou impedir seu aparecimento.
Neste concurso, as propriedades anti-inflamatórias do CBD foram avaliadas por estudos ​in vitro​ e ​in vivo​ em
um modelo animal de neuroinflamação induzida por Aβ ( ​Iuvone et al., 2004​ ; ​Esposito et al., 2006​ ; ​Esposito et
al., 2007​ ; ​Esposito et al., 2011​ ). Em particular, os autores demonstraram que o CBD reduz a hiperfosforilação
da proteína tau através da inibição das vias familiares do membro de integração MMTV do tipo Wingless (Wnt)
e atenua significativamente todos os marcadores da neuroinflamação induzida por Aβ, incluindo a proteína
ácida fibrilar glial (GFAP) e expressão proteica induzível de óxido nítrico sintase (iNOS), produção de nitrito e
interleucina 1 β (IL-1β) (​Iuvone et al., 2004​ ; ​Esposito et al., 2006​ ; ​Esposito et al., 2007​ ; ​Iuvone et al.,
2009​ ; ​Esposito et al., 2011​ ). O pré-tratamento com CBD induz uma redução da produção de ERO,
peroxidação lipídica, níveis de caspase-3 e fragmentação de DNA em células PC12 estimuladas por Aβ,
um modelo ​in vitro​ de DA ( ​Iuvone et al., 2004​ ; ​Bedse et al., 2014​ ; ​Gallelli et al., 2018​ ).
Os efeitos benéficos do CBD foram ainda confirmados por outro estudo em que os ratos foram tratados
cronicamente (por 3 semanas) com CBD após injetados intracerebroventricularmente com Aβ fibrilar
( ​Martín-Moreno et al., 2011​ ). O CBD neutraliza a ativação microglial induzida por Aβ, a produção do fator de
necrose tumoral citocina pró-inflamatória α (TNF-α) e melhora as alterações de memória observadas em uma
tarefa de memória espacial ( ​Martín-Moreno et al., 2011​ ).
Além disso, o Aβ pode se acumular gradualmente nas mitocôndrias, onde pode causar redução tanto da
atividade dos complexos da cadeia respiratória quanto da taxa de consumo de oxigênio, levando à geração de
radicais livres e a danos oxidativos ( ​Caspersen et al., 2005​ ; ​Lin e Beal, 2006​ ; ​Manczak et al.,
2006​ ; ​Cassano et al., 2012​ ). A este respeito, o CBD é capaz de neutralizar alterações mitocondriais pela
redução da produção de ERO induzida pelo fosfato de dinucleotídeo Aβ e nicotinamida-adenina-adenina,
forma reduzida (NADPH) oxidase (NOX) ( ​Hao et al., 2015​ ; ​Vallée et al., 2017​ ).
É sabido que a hiperfosforilação da tau, principalmente nos resíduos serina (Ser) ou treonina (Thr),
desempenha um papel crucial na patogênese da DA, assim, moléculas que reduzem agregados de fosfo-tau
podem representar um bom candidato para o tratamento da DA. Nesse sentido, foi demonstrado que o CBD
reduz a expressão de genes que codificam as cinases (GSK-3β, CMK e MAPK) responsáveis ​pela fosforilação
aberrante da tau, levando a uma redução da hiperfosforilação da tau e subsequente formação de NFT ( ​Libro
et al. 2016​ ). Da mesma forma, o CBD ativa a sinalização PI3K / Akt através do TRPV1, que é capaz de inibir a
quinase GSK-3β, diminuindo assim a fosforilação da tau ( ​Libro et al., 2016​ ). Por fim, o CBD desregula os
genes das β- e γ-secretase, levando a uma redução da produção de Aβ (​Libro et al., 2016​ ).
Vamos para:

Conclusão

A presente revisão forneceu evidências de que o CBD de fitocanabinóides não psicoativos poderia ser uma
ferramenta farmacológica potencial para o tratamento de distúrbios neurodegenerativos; seu excelente perfil
de segurança e tolerabilidade em estudos clínicos o torna um agente terapêutico promissor.
Os mecanismos moleculares associados à melhora do CBD na DP e na DA são provavelmente multifacetados
e, embora o CBD possa atuar em diferentes alvos moleculares, todos os efeitos benéficos estão, em certa
medida, associados ao seu perfil antioxidante e anti-inflamatório, como observado ​in vitro​ e ​in
vivo​ estudos. Portanto, esta revisão descreve evidências para provar a eficácia terapêutica do CBD em
pacientes afetados por distúrbios neurodegenerativos e promove mais pesquisas para melhor elucidar as vias
moleculares envolvidas no potencial terapêutico do CBD.

O canabidiol como uma estratégia promissora para tratar e prevenir distúrbios do movimento?

Abstrato

Distúrbios do movimento, como a doença de Parkinson e a discinesia, são condições altamente debilitantes
ligadas ao estresse oxidativo e à neurodegeneração. Quando disponíveis, as terapias farmacológicas para
esses transtornos ainda são principalmente sintomáticas, não beneficiam todos os pacientes e induzem efeitos
colaterais graves. O canabidiol é um composto não psicotomimético da Cannabis sativa que apresenta efeitos
antipsicóticos, ansiolíticos, antiinflamatórios e neuroprotetores. Embora os estudos que investigam os efeitos
deste composto nos distúrbios do movimento sejam surpreendentemente poucos, o canabidiol surge como um
composto promissor para tratar e / ou preveni-los. Aqui, revisamos esses estudos clínicos e pré-clínicos e
chamamos a atenção para o potencial do canabidiol nesse campo.

Palavras-chave: ​canabidiol, distúrbios do movimento, doença de Parkinson, doença de Huntington, distúrbios

distônicos, canabinoides

Canabidiol (CBD)

O canabidiol (CBD) é um dos fitocanabinóides 100 mais identificados na Cannabis sativa (ElSohly e Gul,
2014), e constitui até 40% do extrato da planta, sendo o segundo componente mais abundante (Grlic, 1976). O
CBD foi isolado pela primeira vez da maconha em 1940 por Adams et al. (1940) e sua estrutura foi elucidada
em 1963 por Mechoulam e Shvo (1963). Dez anos depois, Perez-Reyes et al. (1973) relatou que,
diferentemente do principal constituinte da cannabis Δ9-tetrahidrocanabinol (Δ9-THC), o CBD não induz
efeitos psicológicos, levando à sugestão de que o CBD era uma droga inativa. No entanto, estudos
subsequentes demonstraram que o CBD modula os efeitos de Δ9-THC e exibe múltiplas ações no sistema
nervoso central, incluindo efeitos antiepilépticos, ansiolíticos e antipsicóticos (Zuardi, 2008).

Curiosamente, o CBD não induz a tetrade canabinóide, a saber, hipomotilidade, catalepsia, hipotermia e
antinocicepção. De fato, o CBD mitiga o efeito cataléptico de Δ9-THC (El-Alfy et al., 2010). Estudos clínicos e
pré-clínicos apontaram para efeitos benéficos do CBD no tratamento de distúrbios do movimento. Os primeiros
estudos investigaram as ações do CBD sobre distonia, com resultados encorajadores. Mais recentemente, os
estudos têm focado nas doenças de Parkinson (DP) e Huntington (HD). Os mecanismos pelos quais a CBD
exerce seus efeitos ainda não são completamente compreendidos, principalmente porque foram identificados
vários alvos. Vale notar que o CBD apresenta ações antiinflamatórias e antioxidantes (Campos et al., 2016), e
tanto a inflamação quanto o estresse oxidativo estão ligados à patogênese de vários distúrbios do movimento,
como o TP (Farooqui e Farooqui, 2011; Niranjan, 2014) , HD (Sánchez-Lopez et al., 2012) e discinesia tardia
(Zhang et al., 2007).

Vale ressaltar que, quando disponíveis, os tratamentos farmacológicos para esses distúrbios do movimento
são principalmente sintomáticos e induzem efeitos colaterais significativos (Connolly e Lang, 2014; Lerner et
al., 2015; Dickey e La Spada, 2017). No entanto, apesar de sua grande relevância clínica, os estudos
avaliando o papel do CBD sobre a farmacoterapia dos distúrbios do movimento são surpreendentemente
poucos. Aqui, vamos rever as evidências clínicas e pré-clínicas e chamar a atenção para o potencial da CBD
neste campo.

Mecanismos de Ação da CBD

O CBD tem vários alvos moleculares e novos estão atualmente sendo descobertos. O CBD antagoniza a ação
dos agonistas dos receptores CB1 e CB2, e sugere-se que atue como um agonista inverso desses receptores
(Pertwee, 2008). Além disso, evidências recentes apontam para o CBD como um modulador alostérico
negativo não competitivo de CB1 e CB2 (Laprairie et al., 2015; Martínez-Pinilla et al., 2017). O CBD é também
um agonista do receptor vanilóide TRPV1 (Bisogno et al., 2001), e a administração prévia de um antagonista
de TRPV1 bloqueia alguns dos efeitos do CBD (Long et al., 2006; Hassan e outros, 2014). Em paralelo, o CBD
inibe a hidrólise enzimática e a captação da principal endocanabinóide anandamida (Bisogno et al., 2001), um
agonista dos receptores CB1, CB2 e TRPV1 (Pertwee e Ross, 2002; Ross, 2003). O aumento nos níveis de
anandamida induzidos pelo CBD parece mediar alguns de seus efeitos (Leweke et al., 2012). Além disso, em
alguns paradigmas comportamentais, a administração de um inibidor do metabolismo da anandamida promove
efeitos semelhantes ao CBD (Pedrazzi et al., 2015; Stern et al., 2017).

O CBD também demonstrou facilitar a neurotransmissão mediada pelo receptor da serotonina 5-HT1A. Foi
inicialmente sugerido que o CBD atuaria como um agonista do 5-HT1A (Russo et al., 2005), mas os últimos
relatórios propõem que esta interação pode ser alostérica ou através de um mecanismo indireto (Rock et al.,
2012). Embora esta interação não esteja completamente elucidada, os efeitos do CBD múltiplo foram
relatados como dependentes da ativação de 5-HT1A (Espejo-Porras et al., 2013; Gomes et al., 2013; Pazos et
al., 2013; Hind et al., 2016 Sartim e outros, 2016; Lee e outros, 2017).

O receptor ativado por proliferador de peroxissoma γ (PPARγ) é um receptor nuclear envolvido no

metabolismo de glicose e armazenamento de lipídios, e os ligantes de PPARγ têm sido relatados como
exibindo ações anti-inflamatórias (O'Sullivan et al., 2009). Os dados mostram que o CBD pode ativar este
receptor (O'Sullivan et al., 2009), e alguns dos efeitos do CBD são bloqueados pelos antagonistas do PPARγ
(Esposito et al., 2011; Dos-Santos-Pereira et al., 2016; Hind et al., 2016). O CBD também regula positivamente
o PPARγ em um modelo de camundongo de esclerose múltipla, um efeito sugerido para mediar as ações
antiinflamatórias do CBD (Giacoppo et al., 2017b). Num modelo de rato da doença de Alzheimer, o CBD,
através da interação com o PPARγ, estimula a neurogênese hipocampal, inibe a gliose reativa, induz um
declínio nas moléculas pró-inflamatórias e, consequentemente, inibe a neurodegeneração (Esposito et al.,
2011). Além disso, em um modelo in vitro da barreira hematoencefálica, o CBD reduz os níveis de
permeabilidade aumentada induzidos por isquemia e VCAM-1 - ambos os efeitos são atenuados pelo
antagonismo do PPARγ (Hind et al., 2016).

O CBD também antagoniza o receptor GPR55 acoplado à proteína G (Ryberg et al., 2007). O GPR55 tem sido
sugerido como um novo receptor canabinóide (Ryberg et al., 2007), mas essa classificação é controversa
(Ross, 2009). Atualmente, o fosfolipídio lisofosfatidilinositol (LPI) é considerado o ligante endógeno GPR55
(Morales e Reggio, 2017). Embora apenas alguns estudos relacionem o efeito do CBD à sua ação no GPR55
(Kaplan et al., 2017), vale ressaltar que o GPR55 tem sido associado com PD em modelo animal (Celorrio et
al., 2017) e com crescimento axônico in vitro (Cherif et al., 2015).

Mais recentemente, o CBD foi descrito como agonista inverso dos receptores órfãos acoplados à proteína G
GPR3, GPR6 e GPR12 (Brown et al., 2017; Laun e Song, 2017). GPR6 foi implicado em HD e PD. Em relação
aos modelos animais de DP, a deficiência de GPR6 foi relacionada tanto à discinesia diminuída após a lesão
de 6-OHDA (Oeckl et al., 2014) como ao aumento da sensibilidade à neurotoxicidade de MPTP (Oeckl e
Ferger, 2016). Além disso, Hodges et al. (2006) descreveu diminuição da expressão de GPR6 no cérebro de
pacientes em HD, em comparação ao controle. O GPR3 é sugerido como um biomarcador para o prognóstico
da esclerose múltipla (Hecker et al., 2011). Além disso, GPR3, GPR6 e GPR12 foram implicados na
sobrevivência celular e na superação de neurites (Morales et al., 2018).

CBD também foi relatado para atuar nas mitocôndrias. A administração crônica e aguda de CBD aumenta a
atividade dos complexos mitocondriais (I, II, II-III e IV) e da creatina quinase no cérebro de ratos (Valvassori et
al., 2013). Em um modelo de roedores de sobrecarga de ferro - que induz alterações patológicas que se
assemelham a distúrbios neurodegenerativos - o CBD reverte a modificação epigenética induzida pelo ferro do
DNA mitocondrial e a redução da atividade da succinato desidrogenase (da Silva et al., 2018). É digno de nota
que vários estudos associam disfunções mitocondriais à fisiopatologia da DP (Ammal Kaidery e Thomas,
2018).

Em paralelo, vários estudos mostram ações anti-inflamatórias e antioxidantes do CBD (Campos et al., 2016).
O tratamento com CBD diminui os níveis das citocinas pró-inflamatórias IL-1β, TNF-α, IFN-β, IFN-γ, IL-17 e
IL-6 (Watzl et al., 1991; Weiss et al., 2006; Esposito e cols., 2007, 2011, Kozela e outros, 2010, Chen e outros,
2016, Rajan e outros, 2016, Giacoppo e outros, 2017b), e aumentam os níveis das citocinas anti-inflamatórias
IL-2. 4 e IL-10 (Weiss e outros, 2006; Rajan e outros, 2016). Além disso, inibe a expressão de iNOS (Esposito
et al., 2007; Pan et al., 2009; Chen e outros, 2016; Rajan e outros, 2016) e COX-2 (Chen e outros, 2016)
induzida por mecanismos distintos. O CBD também apresenta propriedades antioxidantes, sendo capaz de
doar elétrons sob um potencial de voltagem variável e prevenir o dano oxidativo induzido por hidroperóxido
(Hampson et al., 1998). Em modelos de roedores de PD e HD, o CBD regula positivamente os níveis de
mRNA da enzima antioxidante superóxido dismutase (Garcia-Arencibia et al., 2007; Sagredo et al., 2007). De
acordo, o CBD diminui os parâmetros oxidativos em modelos in vitro de neurotoxicidade (Hampson e outros,
1998; Iuvone e outros, 2004; Mecha e outros, 2012). É de notar que os efeitos anti-inflamatórios e
antioxidantes do CBD em macrófagos murinos estimulados por lipopolissacáridos são suprimidos por um
antagonista de TRPV1 (Rajan et al., 2016). Também foi demonstrado que o CBD pode afetar a expressão de
vários genes envolvidos na homeostase do zinco, sugerindo que esteja ligado às suas ações antiinflamatórias
e antioxidantes (Juknat et al., 2012).

Os mecanismos de ação da CBD estão resumidos na Figura 1.

Doença de Parkinson (DP)

A DP está entre os distúrbios neurodegenerativos mais comuns, com uma prevalência que aumenta com a
idade, afetando 1% da população acima de 60 anos (Tysnes e Storstein, 2017). A doença é caracterizada por
comprometimento motor (hipocinesia, tremores, rigidez muscular) e sintomas não motores (por exemplo,
distúrbios do sono, déficits cognitivos, ansiedade, depressão, sintomas psicóticos) (Klockgether, 2004).

A fisiopatologia da DP está principalmente associada à perda de neurônios dopaminérgicos mesencéfalos na

substância negra compacta (SNpc), com consequente redução dos níveis de dopamina no estriado (Dauer e
Przedborski, 2003). Quando os sintomas motores aparecem, cerca de 60% dos neurônios dopaminérgicos já
está perdido (Dauer e Przedborski, 2003), dificultando um possível diagnóstico precoce. O tratamento mais
eficaz e usado para a DP é a L-DOPA, um precursor da dopamina que promove um aumento no nível de
dopamina no corpo estriado, melhorando os sintomas motores (Connolly e Lang, 2014). No entanto, após um
tratamento a longo prazo, o efeito da L-DOPA pode ser instável, apresentando flutuações na melhoria dos
sintomas (efeito on / off) (Jankovic, 2005; Connolly e Lang, 2014). Além disso, movimentos involuntários
(nomeadamente discinesia induzida por L-DOPA) aparecem em aproximadamente 50% dos doentes
(Jankovic, 2005).

O primeiro estudo com CBD em pacientes com TP teve como objetivo verificar os efeitos do CBD sobre os
sintomas psicóticos. O tratamento com CBD durante 4 semanas diminuiu os sintomas psicóticos, avaliados
pela Brief Psychiatric Rating Scale e pelo Parkinson Psychosis Questionnaire, sem piorar a função motora ou
induzir efeitos adversos (Zuardi et al., 2009). Posteriormente, em uma série de casos com quatro pacientes
com TP, verificou-se que o CBD é capaz de reduzir a frequência dos eventos relacionados ao transtorno de
comportamento do sono REM (Chagas et al., 2014a). Além disso, embora não melhore a função motora dos
pacientes com TP ou seu escore geral de sintomas, o tratamento com CBD para as semanas 6 melhora a
qualidade de vida dos pacientes com DP (Chagas et al., 2014b). Os autores sugerem que esse efeito possa
estar relacionado às propriedades ansiolíticas, antidepressivas e antipsicóticas do CBD (Chagas et al., 2014b).

Embora os estudos com pacientes com DP relatem efeitos benéficos do CBD somente sobre os sintomas não
motores, o CBD tem mostrado prevenir e / ou reverter o aumento do comportamento de catalepsia em
roedores. Quando administrado antes dos agentes catalépticos haloperidol (fármaco antipsicótico),
L-nitro-N-arginina (inibidor não selectivo da sintase do óxido nítrico) ou WIN 55-212,2 (agonista dos receptores
canabinóides), o CBD dificulta o comportamento cataléptico numa dose. modo dependente (Gomes et al.,
2013). Um possível papel da ativação dos receptores de serotonina 5-HT1A nesta ação tem sido proposto,
porque este efeito do CBD é bloqueado pelo pré-tratamento com o antagonista 5-HT1A WAY100635 (Gomes
et al., 2013). De acordo, Sonego et al. (2016) mostrou que o CBD diminui a expressão da catalepsia induzida
pelo haloperidol e da proteína c-Fos no estriado dorsal, também por um mecanismo dependente da ativação
do 5-HT1A. Além disso, o CBD previne o aumento do comportamento de catalepsia induzido pela
administração repetida de reserpina (Peres et al., 2016).

Além disso, estudos pré-clínicos em modelos animais de DP mostraram efeitos neuroprotetores do CBD. A
injeção unilateral da toxina 6-hidroxidopamina (6-OHDA) no feixe do prosencéfalo medial promove a
neurodegeneração de neurônios dopaminérgicos nigrostriatais, sendo usada para modelar a DP (Bové et al.,
2005). Quando dentro da célula, a neurotoxina 6-OHDA oxida em peróxido de hidrogênio e paraquinona,
causando a morte principalmente de neurônios catecolaminérgicos (Breese e Traylor, 1971; Bové et al., 2005).
Essa neurodegeneração leva à depleção de dopamina e à diminuição da atividade da tirosina hidroxilase no
caudate-putamen (Bové et al., 2005; Lastres-Becker et al., 2005). O tratamento com CBD durante as semanas
2 após a administração de 6-OHDA previne estes efeitos (Lastres-Becker et al., 2005). Em outro estudo,
observou-se que os efeitos protetores do CBD após a lesão 6-OHDA são acompanhados pela elevação dos
níveis de mRNA da enzima antioxidante Cu, Zn-superóxido dismutase na substância negra (Garcia-Arencibia
et al., 2007). Os efeitos protetores do CBD neste modelo não parecem depender da ativação dos receptores
CB1 (Garcia-Arencibia et al., 2007). Além de prevenir a perda de neurônios dopaminérgicos - avaliados pela
imunocoloração da tirosina hidroxilase -, a administração de CBD após a lesão 6-OHDA atenua a ativação da
microglia na substância negra (Garcia et al., 2011).

Em um estudo in vitro, o CBD aumentou a viabilidade de células tratadas com a neurotoxina

N-metil-4-fenilpirimidina (MPP +), e preveniu o aumento da ativação de caspase-3 e diminuição nos níveis de
fator de crescimento nervoso (NGF) (Santos et al., 2015). O tratamento com CBD também foi capaz de induzir
a diferenciação celular mesmo na presença de MPP +, um efeito que depende dos receptores trkA (Santos et
al., 2015). O MPP + é um produto da oxidação do MPTP que inibe o complexo I da cadeia respiratória em
neurônios dopaminérgicos, causando uma morte neuronal rápida (Schapira et al., 1990; Meredith et al., 2008).