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Controle Biológico 97 (2016) 131–138

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Controle biológico

página inicial da revista: www.elsevier.com/location/ybcon

Análise

Controle biológico e nutrição: para reflexão

Dana Blackburna,⇑, David I. Shapiro-Ilanb, Byron J. Adamsa
aDepartamento de Biologia, Brigham Young University, 4102 Life Sciences Building, Provo, UT 84602, Estados Unidos
bUSDA-ARS, Southeastern Fruit and Tree Nut Research Laboratory, 21 Dunbar Road, Byron, GA 31008, Estados Unidos

destaques

- Este é um artigo de revisão sobre o efeito da nutrição na produção de agentes de biocontrole.

- Nós nos concentramos em agentes de controle biológico usados para controlar insetos-praga.
- Examinamos os impactos nutricionais nas características de biocontrole em uma variedade de agentes de biocontrole.
- Com base na literatura, a nutrição desempenha um papel importante no sucesso de um agente de biocontrole.

artigoinfo abstrato

Historia do artigo: Agentes de controle biológico, incluindo uma ampla gama de organismos, como predadores, parasitóides e
Recebido em 2 de novembro de 2015 entomopatógenos (bactérias, fungos, nematoides e vírus) são frequentemente usados para controlar pragas de
Revisado em 8 de março de 2016 Aceito em 10
insetos. Apesar da disponibilidade comercial desses agentes de controle biológico, seu uso generalizado é limitado
de março de 2016 Disponível online em 11 de
devido a dificuldades biológicas e econômicas. A produção em massa eficiente depende muito do ambiente em que
março de 2016
o agente é cultivado. A nutrição pode desempenhar um papel significativo em importantes características de
controle biológico, como colonização e sobrevivência, tolerância ao estresse ambiental, reprodução e longevidade.
Palavras-chave:
Portanto, para aumentar o potencial de biocontrole, aspectos nutricionais devem ser considerados antes da
Controle biológico
produção comercial.
Nutrição
Entomopatogênicos
parasitóide
predador - 2016 Elsevier Inc. Todos os direitos reservados.

Conteúdo

1. Introdução . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 131
1.1. Produção em massa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 132
2. Efeitos nutricionais em características de biocontrole. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 132
2.1. Predadores e parasitóides. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 132
2.2. Nematódeos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 133
2.3. Fungos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 134
2.4. Bactérias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 135
2.5. Baculovírus. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 135
3. Conclusões. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 135
Referências . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 136

1. Introdução Estima-se que 500 milhões de kg são aplicados anualmente nos EUA e cerca
de 3 bilhões de kg são aplicados em todo o mundo (Pimentel, 2005). Altas
Os pesticidas químicos têm sido comumente usados desde taxas de aplicação introduziram novos problemas, incluindo surtos de
meados do século XX e sua aplicação tem aumentado desde então. pragas secundárias, resistência e riscos ao meio ambiente e à saúde
humana.Pimentel, 2005). Devido a esses riscos e regulamentações rígidas
⇑Autor correspondente em: Endereço atual: Departamento de Patobiologia Veterinária,
Texas A&M University, 4467 TAMU, College Station, TX 77843.
sobre pesticidas químicos, esforços de controle de pragas mais criteriosos
Endereço de e-mail:blackbud@byu.edu (D. Blackburn),David.Shapiro@ars.usda. gov estão incorporando cada vez mais o controle biológico.Chandler et al., 2011;
(DI Shapiro-Ilan),byron_adams@byu.edu (BJ Adams). Czaja et al., 2015; Glare e outros, 2012; Kogan, 1998).

http://dx.doi.org/10.1016/j.biocontrol.2016.03.007
1049-9644/- 2016 Elsevier Inc. Todos os direitos reservados.
132 D. Blackburn et ai. / Controle Biológico 97 (2016) 131–138
Normalmente, existem quatro tipos de controle biológico: clássico,
inundativo, inoculativo e de conservação. No controle biológico
clássico, o foco está nas pragas invasoras. Um inimigo natural é
coletado no local de origem da praga e introduzido no novo ambiente
para controlar as espécies de pragas invasoras; a expectativa é que o
organismo introduzido se torne permanentemente estabelecido. O
controle biológico inundativo consiste na produção em massa do
inimigo natural e ampla distribuição no ambiente para suprimir a praga
sem colonização permanente do agente de biocontrole liberado (a
abordagem é semelhante à forma como a maioria dos inseticidas
químicos padrão são empregados). O controle biológico inoculativo
pode ser considerado intermediário entre as abordagens clássica e
inundativa; o inimigo natural é liberado com a expectativa de alguma
reciclagem, embora não de estabelecimento permanente, e assim o
organismo é liberado novamente após várias estações ou anos. Por
fim, o controle biológico conservacionista é a prática de proteger os
inimigos naturais no meio ambiente.
Diversos organismos têm sido investigados para uso no controle
biológico, incluindo insetos parasitóides e predadores e
entomopatógenos, que incluem bactérias, vírus, fungos e nematóides.
Muitos desses organismos são produzidos comercialmente e têm uso
generalizado para controle biológico inoculativo e inundativo. No
entanto, devido a variedades de hospedeiros, eficácia de campo
variável e praticidade, muitos agentes de controle biológico tiveram
sucesso limitado e requerem otimização adicional. Apesar do tempo e
dos recursos gastos na investigação de agentes de controle biológico,
apenas alguns têm sido usados extensivamente.Chandler et al., 2011;
Pedigo e Rice, 2009; Shapiro-Ilan et al., 2002; Vega e Kaya, 2012).
O uso pouco frequente de agentes de controle biológico em geral se
deve a obstáculos econômicos e biológicos.Líder (2001)sugeriram que a falta
de pesticidas biológicos decorre de uma compreensão insuficiente das
necessidades e estratégias do mercado, eficiência de custos e estabilidade
do prazo de validade. Além disso, a variedade (ampla ou restrita) de
hospedeiros afetados por agentes biológicos e a capacidade de serem
produzidos em massa influenciam o sucesso desses produtos. Em última
análise, para que os métodos de controle biológico sejam amplamente
adotados, seus benefícios devem superar seus custos.
Aumentar o uso bem-sucedido de agentes biológicos em
abordagens clássicas, inundativas ou inoculativas requer métodos
eficientes de produção em massa. No entanto, isolar um organismo e
criá-lo em laboratório pode levar à deterioração das características
necessárias para o sucesso no campo. Por exemplo, numerosos
parasitóides de himenópteros usados no controle biológico
diminuíram a aceitação do hospedeiro, fecundidade e longevidade
após longos períodos (gerações) em laboratório (Geden et al., 1992;
Rojas e outros, 1999; van Bergeijk e outros, 1989). Foi demonstrado que
os nematoides entomopatogênicos (EPNs) criados em laboratório
podem perder sua capacidade de encontrar, infectar e matar seus
insetos hospedeiros, diminuíram a fecundidade e são menos tolerantes
ao estresse ambiental.Bilgrami e outros, 2006). A subcultura resultou
na redução da virulência de agentes de controle biológico, como vírus,
bactérias e fungos entomopatogênicos.Dulmage e Rhodes, 1971;
MacKinnon et al., 1974; Tanada e Kaya, 1993; Vandenberg e Cantone,
2004). A deterioração observada tem sido atribuída a fatores genéticos,
como deriva, endogamia e seleção inadvertida.Bai et al., 2005; Chaston
et al., 2011; Hopper et al., 1993; Hoy, 1985; Roush, 1990). No entanto,
esses problemas também podem ser conduzidos, isoladamente ou em
combinação com fatores não genéticos, como doenças e nutrição.
Hopper e outros, 1993).
Embora não haja muito esforço para determinar o efeito da nutrição na
deterioração das características, vários estudos investigaram o papel da
nutrição na eficácia de vários agentes de controle biológico. Esta revisão visa
destacar o papel que a nutrição desempenha na produção e eficácia de
agentes de biocontrole entomopatogênicos (predadores, parasasitóides,
bactérias, fungos, vírus e nematóides); especificamente, o efeito da nutrição
em importantes características de biocontrole
como tolerância ambiental e sobrevivência, potencial reprodutivo,
longevidade e virulência. Nossa intenção é fornecer exemplos que
demonstrem a importância de entender os aspectos nutricionais da
produção de agentes de biocontrole.
1.1. Produção em massa
Uma análise aprofundada da produção em massa de agentes de
controle biológico está além do escopo pretendido desta revisão; no
entanto, entender os métodos usados para cultivar esses organismos é
importante para determinar como esses métodos afetam sua eficácia.
Produção, formulação e entrega foram revistos extensivamente em outros
lugares (Ehlers, 2001; Fravel, 2005; Morales-Ramos et al., 2014; Vega e Kaya,
2012). A produção de agentes de biocontrole pode ser alcançada usandoem
vitroouna Vivométodos. Por exemplo, EPNs podem ser criadosna Vivo
inoculando insetos hospedeiros e coletando os nematóides de cadáveres
hospedeiros, ou criados em suas bactérias simbióticas usandoem vitro
culturas sólidas ou líquidas (Shapiro-Ilan et al., 2012b). Agentes que são
passíveis de cultura líquida, como EPNs, bactérias e fungos, geralmente
começam em frascos de tamanho médio e são ampliados para grandes
fermentadores (4.000 L ou mais) (Ehlers, 2001; Fravel, 2005).
A produção em larga escala de predadores e parasitóides pode ser
significativamente mais complicada. A maioria é criada com dietas artificiais, que
muitas vezes requerem suplementação com soluções de mel ou açúcar.
Thompson, 1999). Além disso, muitos parasitóides se alimentam de hemolinfa e
material vegetal do hospedeiro. Se as dietas artificiais não estiverem disponíveis
ou não forem possíveis, esses insetos devem ser criados em seu hospedeiro
natural, além do alimento vegetal natural do hospedeiro. Devido a considerações
de custo, um hospedeiro fictício é frequentemente usado em vez do hospedeiro
natural; no entanto, essa compensação pode ter efeitos negativos na fecundidade,
expectativa de vida e outras características (Bai et al., 1992; Bigler et al., 1987;
Kazmer e Luck, 1995).
Os principais fatores limitantes na produção em massa de agentes de
controle biológico são os custos associados a substratos de crescimento,
baixas taxas reprodutivas e/ou economias de escala limitadas.Fravel, 2005).
Na Vivométodos são muitas vezes significativamente mais caros do que em
vitrométodos e são difíceis de escalar. No entanto, para a maioria dos
organismos, as melhorias tecnológicas continuam a fazerna Vivo produção
mais viável (Gaugler e outros, 2002). Em cada caso, os métodos devem ser
cuidadosamente avaliados e otimizados individualmente antes que a
comercialização de um agente de biocontrole seja plausível.
2. Efeitos nutricionais em características de biocontrole
Embora o campo da genética molecular tenha revolucionado nossa
compreensão da relação entre genótipo e fenótipo, o papel que o
ambiente desempenha na expressão gênica e, em última análise, no
fenótipo de um organismo, é frequentemente subestimado. Quando
um organismo é isolado de seu ambiente natural e criado em
laboratório, é importante entender como as condições de laboratório
e/ou nutrição podem afetar a capacidade do organismo de controlar
pragas de insetos. As seções a seguir discutirão como a nutrição afeta
características importantes em agentes de biocontrole usados para
controlar pragas de insetos. Existem muitas características que tornam
um organismo adequado para produção em massa e subsequentes
aplicações de campo e estufa para combater pragas e doenças
agrícolas. Essas características incluem, mas não estão limitadas a,
2.1. Predadores e parasitóides
Ao longo do último meio século, estudos de parasitóides e predadores
de insetos enfatizaram o crescimento em dietas artificiais. Criando estes
 D. Blackburn et ai. / Controle Biológico 97 (2016) 131–138
insetos em meios artificiais tornou possível estudar processos biológicos,
comportamentais e fisiológicos. Além disso, essas técnicas levaram a
melhorias na sua produção para aplicações de controle biológico. O sucesso
de um agente de biocontrole depende de vários fatores; no entanto, o
primeiro passo é a capacidade de sobrevivência do organismo durante o
armazenamento e a introdução no campo. Para aumentar as taxas de
sobrevivência de predadores e parasitóides liberados em sistemas de cultivo
ou estufas, uma fonte de alimento, ovos do hospedeiro, um hospedeiro
fictício ou uma dieta artificial, são fornecidos ao mesmo tempo que a
liberação. O tipo de fonte de alimento afeta as taxas de sobrevivência do
predador neste tipo de condição. Por exemplo,Nesidiocoris tenuisataca
pragas de insetos, como moscas-brancas e ácaros. O número deEphestiaos
ovos fornecidos com a liberação desse predador afetam a sobrevivência e o
estabelecimento do predador (Urbaneja-Bernat et al., 2015). Além disso, a
sacarose sozinha não foi suficiente para garantir a sobrevivência deN. tenuis
nas plantas, mas em conjunto com pequenas quantidades de ovos de
insetos foi eficaz.
No campo, os estressores ambientais mais comuns incluem
mudanças na temperatura, umidade relativa, dessecação e choque
osmótico. Organismos que sofrem vários estressores acumulam íons
inorgânicos e produzem solutos compatíveis, que incluem pequenas
moléculas como aminoácidos, açúcares, polióis e betaínas. Essas
moléculas são usadas pelas células para estabilizar proteínas,
provavelmente fazendo com que as proteínas permaneçam em seu
estado nativo em vez de desnaturar devido a condições extremas (
Bolen e Baskakov, 2001; Roessler e Muller, 2001). As moléculas mais
bem estudadas são a trealose, o glutamato e o glicerol.Csonka e
Hanson, 1991; da Costa et al., 1998; Miller e Wood, 1996; Potts, 1994;
galês, 2000). Essas moléculas se acumulam na célula para estabilizar os
processos celulares durante condições estressantes de crescimento,
evitando a mortalidade. Alguns, como a trealose, são produzidos
naturalmente em uma ampla gama de organismos; no entanto, outros
foram relatados apenas em alguns organismos.
Trealose e glicerol são abundantes no parasitóideCotesia glomerataao
exibir tolerância a temperaturas frias (Pullin, 1994). Dietas de artrópodes
podem afetar os níveis de trealose no inseto. Por exemplo, dietas artificiais
aumentaram os níveis de trealose em comparação com o crescimento em
ovos hospedeiros.Lü et al., 2015). Potencialmente, a sobrevivência de
predadores e parasitóides no campo pode ser melhorada usando dietas que
aumentam a produção de trealose.
Após a aplicação, um agente de controle biológico eficaz deve ser capaz de
infectar e impedir a disseminação do alvo pretendido, muitas vezes por
mortalidade. Esta é outra característica de biocontrole que é potencialmente
afetada pela nutrição e deve ser levada em consideração ao formular métodos
para produção em massa. Como a maioria dos estudos de parasitóides analisa a
postura de ovos e a aceitação do hospedeiro, muito menos trabalho foi feito sobre
como a mortalidade do hospedeiro é afetada pela criação nutricional. No entanto,
Magro et al. testaram os efeitos de várias dietas artificiais sobre o ectoparasitóide
Bracon Hebetore descobriram que das sete dietas testadas, apenas uma afetou as
taxas de paralisação do hospedeiro (Magro e Parra, 2004). Todas as outras dietas
foram iguais aos parasitóides criados no hospedeiro natural.
O efeito de diferentes regimes nutricionais na aceitação do hospedeiro e na
oviposição, ou postura de ovos, foi bem estudado em relação aos parasitóides
produtores em massa. A maioria desses estudos se concentra em encontrar dietas
que maximizem os rendimentos reprodutivos. Moléculas como aminoácidos,
proteínas, triglicerídeos e sais inorgânicos são conhecidos por induzir a oviposição
em insetos.Kainoh e Brown, 1994; Nettles et ai., 1983, 1985; Rutledge, 1996).
Vários parasitóides ovipositam em taxas diferentes quando criados no mesmo
meio artificial. Além disso, alguns parasitóides têm maior fecundidade quando
criados em um hospedeiro fictício ao invés de seu hospedeiro natural, sugerindo
que cada agente de controle biológico precisa de uma dieta específica para
otimização.Dias e outros, 2008). Para alguns parasitóides já foram identificadas
moléculas específicas que induzem a oviposição, enquanto para outros a busca
está em andamento (Dias et al., 2010; Kainoh e Brown, 1994).
133
A suplementação com açúcar é importante para a criação de parasitóides
e afeta diversos aspectos do biocontrole. Diferentes açúcares podem
aumentar a produção de progênie. Por exemplo, melada de hospedeiros
pulgões causa um aumento na produção de progênie quando adicionado à
fonte normal de alimento (Hagley e Barbeiro, 1992). Além disso, o mel é uma
boa fonte de açúcar para a alimentação dos parasitóides, pois aumenta a
produção de progênie em vários parasitóides.Baggen e Gurr, 1998; Irvin e
Hoddle, 2007; Schmale et al., 2001; Teraoka e Numata, 2000). A
concentração de açúcar e a frequência alimentar também podem causar
aumento ou diminuição da fecundidade (Heping e outros, 2008). Por
exemplo, melada é uma fonte de alimento inferior a outras fontes de açúcar,
apesar de sua ocorrência generalizada.Wackers et al., 2008). Além disso, a
concentração de açúcar pode expandir o período reprodutivo dos
parasitóides (Azzouz et al., 2004; Heping e outros, 2008). A suplementação
com açúcar também aumentou a fecundidade dos parasitóides quando
liberados no campo (Tena e outros, 2015).
A longevidade de um organismo é uma história de vida importante e
característica de biocontrole. Isso ajuda na vida útil do produto e na
produtividade no campo. Freqüentemente, a influência que a nutrição tem
na longevidade reflete os resultados vistos na fecundidade. Por exemplo,
Trichogramma ostriniae, um parasitóide usado para controlar a broca
europeia do milho, exibe maior expectativa de vida e maior potencial
reprodutivo durante uma infecção natural do hospedeiro quando criado em
hospedeiros alternativos (Sitotroga cerealella, Trichoplusia ni,eEphestia
kuhniella)em vez de seu host de destino (Ostrinia nubilalis) (Hoffmann e
outros, 2001). Semelhante ao potencial reprodutivo, vários açúcares, como
sacarose, glicose e frutose, são frequentemente benéficos para a
longevidade dos parasitóides (Faria et al., 2008; Wackers, 2001; Wyckhuys e
outros, 2008). A adição de suplementos de açúcar, como mel, também pode
proporcionar maior longevidade (Irvin e Hoddle, 2007; Irvin et al., 2007; Sime
et al., 2006; Vattala et al., 2006; Wyckhuys e outros, 2008). Novamente, como
a fecundidade, a expectativa de vida pode depender da concentração de
açúcares e da frequência da alimentação (Heping e outros, 2008).
Presumivelmente, um agente de controle biológico que tenha melhores taxas
de crescimento e seja maior em tamanho é indicativo de um agente mais saudável
e eficaz. Kouame et ai. demonstraram que a qualidade do hospedeiro usado para
criar um parasitóide afeta a qualidade da vespa (Kouame e Mackauer, 1991). Um
hospedeiro maior produz um parasitóide maior e mais saudável. No entanto, a
qualidade do host não é necessariamente uma função linear do tamanho do host (
Sequeira e Mackauer, 1992).
Muitas das questões associadas à criação de parasitóides também se
aplicam à criação de insetos predadores. Existem várias dietas naturais e
artificiais que afetam o potencial reprodutivo em predadores com
ingredientes importantes, como suplementos de fígado, aminoácidos e
açúcares específicos para o inseto até o nível da espécie (Thompson, 1999).
Orius insidiosus,um inseto predador, cultivado em várias dietas, incluindo
ovos de hospedeiros alternativos, ninfas, adultos e pólen, mostrou taxas
mais altas de fecundidade quando cultivado em ovos de hospedeiros
alternativos sem suplementos adicionados (Calixto et al., 2013). O ácaro
predadorAmblyseius swirskiitiveram menor tempo de oviposição e aumento
de ovos depositados quando cultivadas em uma dieta artificial contendo
mel, sacarose, triptona, extrato de levedura, gema de ovo e hemolinfa de
inseto (Nguyen e outros, 2013). No entanto,N. tenuis,cultivadas em
hospedeiros fictícios tiveram uma diminuição na descendência em
comparação com o crescimento no hospedeiro natural (Mollá et al., 2013).
2.2. Nematódeos
Os ingredientes nutricionais também afetam a sobrevivência do EPN durante
o armazenamento e a aplicação. EPNs têm uma maior taxa de sobrevivência
quando armazenados em meio de alta osmolaridade e baixo pH.Lunau et al.,
1993; Strauch e outros, 2000). Além disso, são necessários materiais de
formulação ideais para distribuição comercial. Dependendo da espécie, EPNs
podem ter uma maior taxa de sobrevivência quando são armazenados em argila
versus uma esponja (Strauch e outros, 2000).
134 D. Blackburn et ai. / Controle Biológico 97 (2016) 131–138
Quando os EPNs são isolados de seu ambiente, eles são normalmente
rastreados quanto à virulência (geralmente mortalidade do hospedeiro). O
efeito que a nutrição tem na virulência do nematóide parece ser específico
da espécie e até mesmo da cepa. Grewal et ai. comparadoem vitroena Vivo
métodos de criaçãoSteinernema carpocapsaeeSteinernema scapteriscie não
encontraram diferenças significativas na infecciosidade ou mortalidade
entre os métodos paraS. carpocapsae (Grewal e outros, 1999). No entanto,S.
scapteriscicrescidoem vitrocausou taxas de mortalidade mais altas do que
quando produzidona Vivo.Por outro lado,Steinernema riobravenão exibiu
taxas de mortalidade significativamente diferentes quando formulado a
partir da produção de massa líquida ouna VivoProdução (Shapiro e McCoy,
2000). Outros estudos mostraram queS. carpocapsaefoi igualmente
virulento quando criado usandoin vivo, in vitrosólido, ouem vitrométodos
líquidos; no entanto,Heterorhabditis bacteriophorafoi menos virulento
quando cultivado usandoem vitrométodos líquidos em comparação comna
Vivoeem vitrométodos sólidos (Gaugler e Georgis, 1991). Assim, a produção
de EPNs eficazes requer condições de crescimento específicas da espécie.
A virulência da EPN é alcançada principalmente por suas bactérias
simbióticas.Han e Ehlers, 2000). Embora pouco se saiba sobre o papel da
nutrição na virulência desses endossimbiontes, trabalhos recentes
estudaram o efeito da nutrição na deterioração de características em
Photorhabdus luminescens,aHeterorhabditesimbionte (Blackburn e outros,
2016). Este estudo examinou o efeito da nutrição na subcultura repetida do
simbionte e descobriu que a nutrição desempenha um papel na
manutenção da estabilidade das características de biocontrole, incluindo
virulência e potencial reprodutivo, neste nematoide-simbionte. Além disso, a
mudança de um tipo de nutrição para outro reverteu os efeitos da
deterioração da característica.
Outra consideração importante é como a dieta do organismo hospedeiro
afeta a virulência do agente de biocontrole. Por exemplo, diferentes
suplementos à base de lipídios e proteínas adicionados à dieta do
hospedeiro resultaram em diferenças significativas em sua suscetibilidade a
Heterorhabditis indica (mas não paraS. riobrave (Shapiro-Ilan et al., 2008)).
Além disso, a dieta do hospedeiro afeta a virulência de EPNs contra outros
hospedeiros (Shapiro-Ilan et al., 2012a). Isso sugere que, em alguns casos, a
dieta do hospedeiro pode ser ajustada durante a fase de criação para
produzir agentes de biocontrole aprimorados.
A fecundidade e a nutrição também foram estudadas extensivamente em
EPNs. Tradicionalmente, as EPNs são cultivadas em suas bactérias simbióticas e
carecem de crescimento suficiente sem seus simbiontes. Esses nematóides são
afetados pela composição do meio em que são cultivados, bem como pelo meio
em que suas bactérias simbióticas são cultivadas. Além da complexidade da
criação desses organismos, está o fato de que os dois podem preferir diferentes
fontes de carbono. Gil e cols. rendimentos de nematóides testados usando
diferentes fontes de carbono (Gil e outros, 2002). Os nematóides têm maiores
rendimentos quando fontes de carboidratos são usadas em combinação com óleo
de canola; no entanto, suas bactérias simbióticas preferem a glicose como fonte
de carbono. Portanto, a produção eficiente de EPNs requer duas fontes
nutricionais diferentes, uma fonte inicial de glicose seguida por suplementos de
óleo após a fase de crescimento bacteriano. As fontes de proteína também
desempenham um papel no EPN e nos rendimentos bacterianos. Meios contendo
farinha de soja são ideais para o potencial reprodutivo bacteriano e EPN em
comparação com várias outras fontes de proteína (Cho, 2011).
EPNs também requerem uma fonte lipídica em seu meio de crescimento
porque a maioria dos lipídios vem de uma fonte externa, em vez dede novo
síntese (Fodor e outros, 1994). Uma vez que os maiores rendimentos de
EPNs são estabelecidosna Vivo,fontes lipídicas em meios artificiais devem
ser semelhantes aos lipídios de insetos (Abu Hatab e outros, 1998). De fato,
foi demonstrado queem vitromídia com lipídios monoinsaturados
semelhantes aos lipídios de insetos, como canola e azeites, produzem os
maiores rendimentos de EPNs (Abu Hatab e Gaugler, 2001, 1999; Yoo e
outros, 2000). Além disso, diferentes fontes de lipídios podem influenciar os
rendimentos bacterianos, o que também afeta a produção de nematóides.
Yoo e outros, 2000). Otimizando a concentração do meio (incluindo car-
carboidratos, lipídios, proteínas, sais e fatores de crescimento) também desempenha um
papel nos rendimentos de bactérias e nematóides (Yoo e outros, 2001).
EPNs mostram variação de tamanho em diferentes tipos de mídia, incluindo
na Vivoeem vitrométodos. Yang e outros. mostraram que o comprimento e a
largura do corpo variaram em diferentes ambientes nutricionais (Yang e outros,
1997).Na Vivoambientes forneceram os maiores EPNs. Os meios de proteína
animal e os meios de mistura de proteína vegetal/animal produzem os próximos
maiores EPNs, enquanto os meios de proteína vegetal resultaram nos menores
EPNs, confirmando que as fontes nutricionais podem afetar a qualidade e/ou
tamanho do nematóide.
2.3. fungos
A composição do meio usado para armazenamento de fungos
entomopatogênicos é importante para a sobrevivência a longo prazo. Por
exemplo, o fungo entomopatogênicoisaria fumosoroseatem taxas de
sobrevivência mais altas após liofilização para distribuição com
porcentagens crescentes de glicose no meio (Cliquet e Jackson, 1999). A alta
concentração de casaminoácidos também aumentaI. fumosoroseataxas de
sobrevivência após métodos de liofilização (Cliquet e Jackson, 2005). Além
disso, o uso de galactose ou citrato de sódio como fonte de carbono
melhora a tolerância à dessecação em comparação com a glicose.Cliquet e
Jackson, 1999). Outro agente de biocontrole fúngicoBeauveria bassiana
mostra uma sobrevivência de armazenamento mais longa quando cultivada
em meios limitados por nitrogênio (Lane e Trinci, 1991).
As condições de crescimento podem afetar como um organismo
responderá às mudanças ambientais quando aplicado a sistemas agrícolas
após o crescimento em laboratório. Por exemplo, termotolerância deB.
bassianaé afetado pelas condições em que é cultivado (Ying e Feng, 2006).
Condições ideais usaram 4% de glicose ou 1% de amido como fonte de
carbono com Mn2+como aditivo de metal, enquanto a sacarose com Fe3+ou
Cu2+diminui significativamente a resistência térmica. Outros estudos
sugerem que o uso de grãos de milho e óleo de milho aumenta a
termotolerância.Kim e outros, 2011, 2010).
Conforme discutido na seção sobre predadores e parasitóides, vários
solutos e açúcares compatíveis podem fornecer proteção contra o estresse
ambiental. A trealose tem sido implicada em fungos entomopatogênicos
como um protetor de uma série de condições ambientais extremas, como
dessecação, mudanças de temperatura e estresse osmótico.Hallsworth e
Magan, 1996; Ying e Feng, 2006). Liu et ai. determinou que emB. bassianaÀ
medida que as condições ambientais retornam ao normal após o estresse
térmico, o mesmo acontece com os níveis de trealose, sugerindo a
importância da trealose durante condições estressantes (Liu e outros, 2009).
A produção de trealose pode ser estimulada estressando o organismo
durante o crescimento antes das aplicações de campo. Estudos mostraram
que durante o estresse térmico os níveis de trealose aumentam emB.
bassiana (Liu e outros, 2009). Além disso, a fome nutricional pode causar
aumento das concentrações de trealose.Thevelein e Hohmann, 1995).
Outros fatores que afetam os níveis de trealose incluem temperatura, pH e
disponibilidade de água.Hallsworth e Magan, 1996; Ying e Feng, 2006).
A composição do meio de crescimento usado para cultivar
microorganismos também afeta os tipos e quantidades de solutos
compatíveis produzidos em fungos. Por exemplo, adicionar certos
carboidratos ao meio pode aumentar os níveis de trealose emB.
bassiana, Metarhiziumsp., eIsária farinosa (Hallsworth e Magan,
1994). Adicionalmente, métodos descoberto sobre não-
fungos entomopatogênicos podem fornecer informações úteis que podem
ser aplicadas a fungos entomopatogênicos. Por exemplo,amor de cândida,
um agente de biocontrole antifúngico, teve um aumento na sobrevivência
com a adição de açúcares protetores à sua formulação de mídia (Abadias et
al., 2001; Torres e outros, 2003). É concebível que a adição desses açúcares
aos meios de crescimento para fungos entomopatogênicos também forneça
proteção contra estressores ambientais.
Estudos sobre fungos entomopatogênicos mostraram que a
virulência é muitas vezes baseada no ambiente em que foram criados.
 D. Blackburn et ai. / Controle Biológico 97 (2016) 131–138
Por exemplo, Safavi et al. e Shah et ai. testou várias cepas deB. bassianae
Metarhiziumspp. para virulência após o crescimento em diferentes tipos de
mídia (Safavi et al., 2007; Shah e outros, 2005).Metarhizium spp. eB. bassiana
são mais virulentos quando cultivados em meio de estresse osmótico (OSM)
contendo 8% de glicose, 2% de peptona e 5,5% de KCl (Shah e outros, 2005).
No entanto, uma cepa deB. bassianaé mais virulento quando cultivado em
meio pobre em nutrientes com 2% de peptona. Isso sugere que a mídia ideal
pode ser específica da cepa. Além disso, estudos sobreI. fumosorosea
mostrou que OSM produz os organismos mais virulentos em duas cepas,
mas não em um terceiro (Ali e outros, 2009).
A nutrição também demonstrou ter um efeito sobre o potencial reprodutivo
de fungos entomopatogênicos.I. fumosoroseatem sido extensivamente
investigado como agente de biocontrole, incluindo como cultivá-lo em laboratório
para obter os maiores rendimentos possíveis. O aspartato e o glutamato como
fonte de nitrogênio produzem os maiores rendimentos de blastosporos, e o zinco
é essencial para altas taxas reprodutivas.Cliquet e Jackson, 1999). Além disso, os
casaminoácidos, além de promover a sobrevivência, aumentam a produção de
esporos (Jackson e outros, 2003). Maiores concentrações de casaminoácidos
resultam em maiores rendimentos de esporos, independentemente das
concentrações de glicose (Cliquet e Jackson, 2005).
Vega et ai. conduziram um estudo sobre vários tipos de mídia e seus efeitos
em diferentes espécies/cepas de fungos entomopatogênicos (Vega e outros, 2003
).B. bassianacepas se comportam de maneira diferente em ambientes variados; no
entanto, outros gêneros parecem ser mais estáveis (Safavi et al., 2007; Vega e
outros, 2003).I. fumosoroseamostraram diferenças na produção de esporos entre
seis tipos de meios, bem como entre diferentes isolados (Ali e outros, 2009). Dois
isolados se reproduziram melhor em meio pobre em nutrientes, enquanto o
terceiro teve a maior capacidade reprodutiva quando cultivado em baixa relação
C/N. Todos os isolados apresentaram os menores rendimentos de conídios em
meio de quitina peptona. As tendências gerais dos efeitos nutricionais nos fungos
parecem ser específicas do gênero, fornecendo mais evidências para a otimização
do organismo individual.
Os meios ideais para o crescimento de fungos são específicos da espécie
e, às vezes, até específicos da cepa. MaioriaB. bassianacepas crescem
melhor em meios com uma relação C/N de 10:1, 1% de peptona ou quitina
peptona (Safavi et al., 2007). No entanto,Metarhiziumspp. cepas preferem
meios com uma relação C/N de 35:1 eI. fumosoroseaexibe maiores taxas de
crescimento em meio nutriente de quitina peptona (Ali e outros, 2009; Safavi
et al., 2007; Shah e outros, 2005). Além disso, certos metais como o zinco
podem ser necessários para o crescimento (Cliquet e Jackson, 1999).
2.4. Bactérias
As bactérias são provavelmente o agente de biocontrole mais difundido.
Como visto com os organismos discutidos anteriormente, a composição do
meio de crescimento pode aumentar a produção de solutos compatíveis.
Pocard et ai. mostraram que uma variedade de protetores se acumulam em
ambos osPseudomonas mendocinaePseudomonas psendoalcaligenes,de
acordo com o tipo de condições de cultura em que foram cultivadas (como
diferentes íons ou outros solutos compatíveis) (Pocard e outros, 1994). Além
disso, a suplementação do meio de crescimento com solutos compatíveis
permite que as bactérias absorvam essas moléculas e as utilizem como
protetores cruzados. D'souza-Ault et al. mostraram crescimento aumentado
quando glicina betaína é adicionada a culturas estressadas osmoticamente
dePseudomonas aeruginosa (D'Souza-Ault et al., 1993). Embora não sejam
agentes de biocontrole, eles mostram o potencial de usar a nutrição para
aumentar a sobrevivência bacteriana por meio de solutos compatíveis.
Indiscutivelmente, o agente de biocontrole mais bem estudado é a bactéria
Bacillus thuringiensis,também conhecido como Bt. Por um século, este organismo
foi estudado e usado com sucesso para a supressão de pragas de insetos. Tem
havido uma ampla gama de estudos investigando os melhores métodos de cultivo
de Bt. Por exemplo, Ozcan et al. mostraram que o Bt teve maiores taxas de
crescimento na cama de frango em comparação com o meio sintético (Ozcan et
al., 2010). Além disso, oB. thuringien-
135
manasubesp.Kurstakicresceu melhor que oB. thuringiensissubesp.
israelenseeB. thuringiensissubesp.tenebrionis.
A maioria dos estudos de Bt investigou como a mídia afeta a atividade
inseticida. Os resultados são específicos para subespécies e cepas de Bt,
demonstrando a importância do aprimoramento nutricional de
características de biocontrole para organismos individuais.B. thuringiensis
subesp. aizawaiapresentou a maior toxicidade em três tipos de meios
diferentes de trinta testados; farelo de semente de algodão, farinha de soja
desengordurada e farelo de glúten de milho (Morris e outros, 1997). No
entanto,B. thuringiensissubesp.Kurstakimostraram produção aumentada de
toxina com meios contendo peptona e cistina (Vora e Shethna, 1999). Além
disso, a produção de endotoxinas aumenta ao adicionar MnSO4ou MgSO4,
mas KH2PO4inibe a produção de endotoxinas (Ennouri et al., 2013). Essa
subespécie também se desenvolveu bem em vários lodos de efluentes, que
além de promover o crescimento, gera maior produção de endotoxinas em
relação aos meios sintéticos (Yezza e outros, 2006, 2005).
B. thuringiensissubesp.israelensetambém foi exaustivamente
testado para a produção de endotoxinas em vários tipos de meios utilizando
diferentes fontes de nitrogênio e carbono (Ozkan e outros, 2003). Esta
subespécie pode usar fosfato de amônio ou sulfato de amônio como fonte
de nitrogênio e pode usar inulina, dextrina, maltose, lactose, soro de leite ou
glicerol como fonte de carbono; entretanto, glicose, amido e melaço inibem
a produção de endotoxinas.Ângelo et al., 2014; Ozkan e outros, 2003).
Comumente, várias subespécies de Bt requerem uma fonte de fosfato
inorgânico para alta produção de endotoxinas.Kurt e outros, 2005; Ozkan e
outros, 2003). Este agente de biocontrole bem estudado exibe variabilidade
em organismos em crescimento para maior eficiência de biocontrole e
reforça a importância da nutrição no biocontrole.
2.5. baculovírus
Os baculovírus não são facilmente produzidos em massa e é difícil
determinar como a nutrição afeta as características de biocontrole, uma vez
que eles têm uma gama estreita de hospedeiros, resultando na falta de
opções de cultivo. No entanto, a formulação para dispersão ótima no campo
tem sido estudada. Por exemplo, compostos branqueadores ópticos que são
frequentemente usados em indústrias têxteis e de detergentes
demonstraram proteger os baculovírus da radiação UV quando adicionados
antes da distribuição.Dougherty et al., 1996; Shapiro, 1992). Nem todos os
branqueadores ópticos são eficazes (Shapiro, 1992); e otimizar o tipo e a
concentração de branqueadores ópticos é necessário ao formular esses
vírus para uso em biocontrole. Estudos que investigaram outros
componentes, incluindo lignina e farinha de milho, mostraram que
formulações com farinha de milho pré-gelatinizada e lignato de potássio
proporcionaram maior proteção contra a luz solar e a chuva.Tamez-Guerra
et al., 2000). Compreender como a nutrição afeta diretamente a virulência
dos baculovírus é difícil. No entanto, os branqueadores ópticos não são
apenas importantes para a proteção ambiental, mas também são eficazes
para aumentar a atividade viral quando incluídos na formulação de
distribuição final.Boughton et al., 2001; Dougherty et al., 1996; Lasa et al.,
2007; Shapiro, 1992).
3. Conclusões
Embora ainda não seja uma disciplina florescente, estudos sobre os
efeitos da nutrição em agentes de controle biológico indicaram claramente
que a nutrição pode ter efeitos de amplo alcance na produção e
implementação bem-sucedida de agentes de controle biológico (Bonaterra
et al., 2007; Cabrefiga et al., 2011; Gil et al., 2002; Hoffmann et al., 2001;
Teixido et al., 1998; Yoo e outros, 2001). Diferenças nutricionais entreem
vitroena Vivométodos podem causar mudanças drásticas na eficiência
desses agentes (Abu Hatab e Gaugler, 1999; Blossey e outros, 2000).
Curiosamente, diferentes espécies que são mecanisticamente semelhantes
muitas vezes respondem ao mesmo tipo de cultura em uma variedade.
136 D. Blackburn et ai. / Controle Biológico 97 (2016) 131–138
edade de maneiras. A única semelhança entre os diferentes agentes de
biocontrole é a falta de requisitos nutricionais ou de crescimento
semelhantes. Mesmo entre cepas da mesma espécie, a eficiência
geralmente varia para regimes nutricionais semelhantes. Isso sugere que a
produção e a formulação de cada organismo podem se beneficiar
significativamente da nutrição individual e da otimização da cultura.
A produção em massa de agentes de controle biológico inclui várias
compensações a serem consideradas. Alguns regimes nutricionais melhoram
algumas características em detrimento de outras. Por exemplo, predadores
cultivados em meios artificiais podem ter um aumento de tamanho, mas têm
tempos de desenvolvimento mais longos (Cohen e Smith, 1998). Os produtores
devem determinar quais características são mais importantes para o agente de
biocontrole mais eficiente para reduzir o número de pragas de artrópodes. Além
disso, considerações de compensações econômicas são necessárias para
estabelecer as melhores fontes nutricionais. Com cada agente de biocontrole, as
empresas e produtores devem determinar as melhores fontes nutricionais para
agentes de biocontrole eficazes, mantendo os custos baixos para tornar a
produção econômica e competitiva. Para EPNs pode ser a diferença entre usarna
Vivométodos ouem vitro (sólidas ou líquidas). No entanto, para predadores e
parasitóides, significa considerar a melhor dieta artificial versus um hospedeiro
natural ou fictício.
Apesar dos muitos avanços ocorridos ao longo do último século, ainda
não se sabe muito sobre como métodos específicos de produção,
formulação e aplicação de agentes de controle biológico afetam sua eficácia.
Pesquisas futuras devem se concentrar em espécies individuais ou cepas de
agentes de biocontrole para otimizar as fontes nutricionais que aumentarão
a produção, aumentarão as características que melhorarão a eficiência
geral, diminuirão os custos e diminuirão qualquer perda potencial de
características. Pesquisadores e desenvolvedores devem fazer perguntas
importantes em relação à criação de organismos de controle biológico,
como, ''O organismo deve ser cultivadona Vivoou em vitro?As qualidades
desejadas são observadas em um hospedeiro natural ou em um hospedeiro
fictício/dieta artificial? Este organismo requer suplementos/moléculas
adicionais para produzir características ideais?” As respostas a essas
perguntas são necessárias para alcançar todo o potencial da tecnologia de
controle biológico.
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