Operações podem ser definidas como métodos ou processos internos, ações

interiorizadas, que atuam nas informações ou conceitos recebidos, coordenando suas relações de
modo simultâneo e reversível, e elaboram ou produzem novas ações mentais necessárias para a
realização de uma atividade (Leontiev, 1981b; Gazzaniga, Ivry, & Mangun, 2002; Piaget, 1967).
Cada atividade mental requer um conjunto diferente de operações apropriadas
para atingir seu objetivo, além de componentes motivacionais, volitivos e afetivos.
Primeiro, a estrutura psicológica da atividade tem caráter expandido e requer várias operações,
ações e procedimentos para sua execução, mas depois se torna condensada e convertida em uma
destreza automática. Desse modo, em sua fase inicial, a atividade requer numerosos
componentes (intenção e atenção conscientes; percepção visual, auditiva, tátil-proprioceptiva e
espacial; memória operacional, linguagem na interação com o instrutor) e várias regiões
cerebrais que os processam. Mais tarde, quando o domínio habilidoso é conseguido, a execução
da tarefa torna-se automática, parcialmente inconsciente, uma espécie de conhecimento
implícito (memória de procedimentos) que requer menos regiões cerebrais e menos tempo e
energia mental.
localização da lesão com base na análise dos sintomas usando testes apropriados a fim
de diagnosticar uma disfunção orgânica cerebral e, na medida em que se detectam dissociações
duplas, estabelecer qual mecanismo básico está alterado, podendo assim sugerir o lado e o local
da lesão cerebral.
Análise sindrômica usando uma bateria de testes neuropsicológicos e condições-
controle apropriadas pode ajudar a detectar a operação básica alterada e, por inferência, a região
cerebral lesada. A forma mais decisiva de controle é a comparação do desempenho nos testes do
paciente com o de indivíduos normais sadios, como condição para se poder atribuir o baixo
desempenho do paciente à sua lesão.
Além de um grupo-controle, tarefas-controle são necessárias para estabelecer se o
problema cognitivo ou comportamental do paciente resulta de disfunção de um determinado
componente (p. ex., perda do raciocínio espacial ou da memória de longo prazo) ou se é
consequência de um transtorno mais difuso (déficit atencional, depressão).
O método experimental consiste em isolar e testar variáveis individuais a fim de
verificar possíveis relações de causa e efeito ou associações entre eventos, geralmente adotando
desenhos tipo caso-controle. A fim de satisfazer o princípio da homogeneidade, todos os casos
devem ter o mesmo tipo de lesão, e todos os casos e controles devem ser idênticos quanto a
todas as variáveis influenciáveis, exceto aquela que está sendo estudada.
O problema com estudos de grupos é que lesões cerebrais produzidas por doenças
naturais nunca são exatamente iguais, elas variam de paciente para paciente quanto ao seu
tamanho, distribuição e manifestações psíquico-comportamentais. Além disso, estudos de
grupos têm critérios de seleção e inclusão muito rígidos, requerendo longo tempo para coleta de
número suficiente de pacientes, ou então os pacientes podem não estar em condições de serem
testados ou não querer ser testados no momento apropriado (Shallice, 1988).
Devido a essas limitações dos estudos de grupos, alguns autores (Caramazza, 1992)
argumentam que estudos de casos simples podem contribuir para uma melhor compreensão dos
processos cognitivos, mediante a análise do desempenho de pacientes individuais, fazendo
comparações entre múltiplos casos. De acordo com Gazzaniga e colaboradores (2002), o estudo
de caso simples contribui para entendermos melhor os componentes funcionais da cognição.
O problema com os estudos de casos simples é sua limitação em relacionar operações
cognitivas com estruturas neurais, mesmo em pacientes que têm um déficit cognitivo isolado
associado a uma lesão focal do cérebro (Gazzaniga et al., 2002). É difícil saber qual região
afetada está correlacionada com o déficit, uma vez que a lesão geralmente atinge diferentes
estruturas corticais e subcorticais, além de cada paciente ter idiossincrasias em sua organização
cognitivo-cerebral e diferentes reservas cognitivas ou potenciais pré-mórbidos, de tal modo que
uma lesão de mesmo local, tamanho e natureza pode produzir diferentes síndromes em
diferentes indivíduos.
Estudos de grupos podem ajudar a melhor compreender as correlações cérebro-
comportamentais. O local efetivo da lesão responsável por determinado déficit (p. ex., apraxia
da fala) é estabelecido incluindo-se todos os pacientes com o referido déficit em um grupo,
superpondo-se as posições das imagens de ressonância magnética de todos os pacientes do
grupo e procurando o local onde as lesões de todos eles se superpõem (“hot spot”), (Shallice,
1988).
Variáveis do paciente (Idade, Educação, Dominância manual, Sexo, Personalidade,
autobiografia, padrões afetivos e comportamentais, e experiência prévia com tarefas cognitivas
similares às dos testes. Variação circadiana das funções cognitivas, que têm pior desempenho
entre meio-dia e 14 horas e após as 23 horas. E ainda outros fatores como motivação, interesse,
ansiedade, inquietação, depressão e efeito colateral de medicamentos.
É importante controlar variáveis capazes de influenciar no desempenho dos testes
mediante o emprego de condições-controle apropriadas, a fim de detectar dissociações duplas,
as quais podem sugerir o componente básico que está alterado e, por inferência, a região
cerebral lesada. É também relevante escolher amostras neuropatológicas apropriadas, o
momento adequado para a avaliação neuropsicológica e de neuroimagem, bem como interpretar
os dados do grupo levando em conta variações interindividuais da organização neural-cognitiva,
idade, sexo, educação, assim como características psicológicas e socioculturais dos pacientes.
Métodos qualitativos e quantitativos, estudos de casos simples e de grupos, são todos válidos,
dependendo do objetivo da pesquisa.

Ansiedade e drogas
Enquanto o medo é a emoção que se dá na presença de um perigo real, a sensação
subjetiva de inquietude e apreensão, vivenciada em situações onde o perigo é penas vago e
potencial, é chamada de ansiedade. Sua finalidade também é preparar o organismo para uma
possível situação de enfrentamento. No entanto, dependendo da intensidade, da frequência e do
contexto no qual é apresentada, pode adquirir papel desajustador.
Ainda que não seja possível assegurar que animais não humanos compartilhem das
mesmas sensações subjetivas de ansiedade que os seres humanos, parece existir uma
correspondência muito grande entre as espécies em relação aos mecanismos neurais e funções
comportamentais subjacentes a essa emoção, desde a percepção de situações sinalizadoras de
um perigo em potencial até a organização das reações de defesa. Entre os mamíferos, essa
correspondência é ainda maior.
Como comparação, existem mais modelos animais de ansiedade do que para qualquer
outra função psicológica estudada experimentalmente em humanos (investigação pré-clínica de
novas drogas ansiolíticas, na avaliação fisiológica do mecanismo de ação dessas drogas, no teste
empírico de hipóteses comportamentais e fisiopatológicas relacionadas aos transtornos de
ansiedade em humanos, bem como no mapeamento da circuitaria neural que regula as reações
de defesa frente a situações de perigo em potencial.)
A antecipação de uma situação de perigo no ambiente tem início com processos
perceptuais mediados por duas classes de estímulos. A primeira sinaliza de forma inata para
todos os membros de determinada espécie animal algum grau de ameaça no ambiente. É o que
permite que ratos de laboratório, por exemplo, sejam capazes de reconhecer perigo potencial ao
detectarem o odor de um gato, mesmo sem nunca terem tido nenhuma experiência anterior com
o felino. São, pois, estímulos que sinalizam perigo e deflagram reações de defesa,
independentemente de qualquer aprendizagem prévia. A segunda classe compreende estímulos
que passam a sinalizar perigo em potencial como efeito de processos de aprendizagem .
Decorrem, pois, da interação do organismo com o meio ambiente. Por exemplo, estímulos
inócuos para ratos, como sons ou luzes de baixa intensidade, podem se tornar estímulos
sinalizadores de perigo para determinado rato caso esses estímulos sejam associados à presença
de um gato ou outras formas de estímulo aversivo. Após a aquisição dessa forma de
aprendizagem, denominada condicionamento clássico, o animal passa então a reagir
defensivamente na presença do novo estímulo.
Sinalizar e antecipar para o organismo alguma situação de perigo potencial no ambiente
e deflagrar reações de defesa compatíveis. Os modelos animais de ansiedade fundamentam-se
justamente na manipulação experimental desses estímulos e na observação consecutiva das
reações comportamentais e fisiológicas decorrentes.
Na ciência experimental, modelo é qualquer representação de um fenômeno complexo
em uma forma mais simples. A partir dessa perspectiva, é possível simular um fenômeno ainda
desconhecido por meio de sistemas conhecidos.
Na psicologia, o interesse pelo estudo do comportamento animal surgiu com o
behaviorismo. Mais tarde, esses modelos foram incorporados a diversas áreas do conhecimento
com objetivo de investigar diferentes aspectos do comportamento humano. Os modelos animais
de ansiedade procuram reproduzir uma situação ambiental de provável ocorrência de diferentes
formas de aversão ou desconforto.
Os padrões comportamentais e as reações fisiológicas ativadas em decorrência do
contato com essas fontes sinalizadoras de perigo em potencial são utilizados como medidas de
ansiedade e geralmente apresentam grande correspondência com as medidas de ansiedade em
humanos. Em uma perspectiva experimental, a situação ambiental aversiva representa a variável
independente, uma vez que essas situações são manipuladas pelo experimentador. Já as reações
comportamentais e fisiológicas decorrentes representam a variável dependente, pois são
registradas e analisadas de forma adequada com objetivo de investigar a existência ou não de
uma relação de causa e feito entre as duas variáveis.
Com base no tipo de variável independente manipulada experimentalmente para induzir
ansiedade, os modelos animais de ansiedade podem ser classificados em duas grandes
categorias: modelos de aprendizagem associativa e modelos etiologicamente fundamentados.
Um modelo animal de ansiedade deve atender satisfatoriamente a pelo menos um de
três critérios de validação: previsibilidade, semelhança e homologia. Se uma droga eleva os
níveis de ansiedade em humanos, também deve fazer o mesmo no modelo animal. A partir desse
referencial, espera-se que uma nova droga selecionada com potencial ansiolítico no modelo
animal apresente também propriedades ansiolíticas quando testada clinicamente. Em todos os
casos, a potência relativa dos efeitos em humanos e no modelo animal deve ser correspondente.
De fato, analogias entre transtornos de ansiedade e modelos animais têm sido aventadas,
mas devem ser transpostas com extrema cautela. Primeiramente porque os transtornos de
ansiedade são psicopatologias marcadas por reações desproporcionalmente elevadas,
descontextualizadas e/ou desajustadas, enquanto os comportamentos observados nos modelos
animais refletem, enquanto variáveis dependentes, reações adaptativas de defesa frente aos
estímulos sinalizadores de perigo em potencial. Além disso, um modelo pode, eventualmente,
ser capaz até mesmo de simular determinado sintoma de ansiedade, mas não necessariamente
outros sintomas que compõem o quadro clínico.
Modelos Associativos de Ansiedade
Teste de conflito
Este modelo foi um dos mais utilizados para o teste de drogas ansiolíticas. No
procedimento típico, uma resposta operante, como a de pressionar a barra para os ratos, ou a de
bicar um disco para os pombos, é ao mesmo tempo reforçada e punida. Os animais são
inicialmente expostos a uma contingência de reforçamento positivo sob esquema de intervalo
variável. Essa fase é seguida por curto período de time-out, durante o qual nenhuma resposta é
contingenciada por reforço. Já com uma resposta operante estabelecida, essa passa a ser
simultaneamente seguida de um reforço positivo (água ou alimento) e punida pela liberação
contingente de choques elétricos no assoalho da caixa experimental onde ocorre o processo de
aprendizagem. Esse período de conflito é sinalizado por um estímulo luminoso ou sonoro. Essa
situação gera um conflito do tipo aproximação-esquiva (evitação), resultando na redução da
frequência do comportamento que antes era somente reforçado positivamente.
Desde a demonstração de que ansiolíticos benzodiazepínicos aumentavam a taxa de
resposta no componente punido, esse efeito anticonflito passou a ser entendido como um efeito
ansiolítico. Drogas não ansiolíticas, incluindo antipsicóticos, analgésicos, antidepressivos e
psicoestimulantes, não interferem na taxa de resposta no componente punido.
Foi exatamente nesse modelo animal que as primeiras evidências do papel da serotonina
na ansiedade foram coletadas. No final da década de 1960, já se sabia que os benzodiazepínicos
liberavam o comportamento suprimido pelo conflito, em ratos e pombos, em doses
correspondentes às utilizadas clinicamente. Em seguida, demonstrou-se que drogas que
diminuíam a ação da serotonina (5-HT) no cérebro apresentavam efeito anticonflito semelhante
aos benzodiazepínicos.
O modelo apresenta certo grau de semelhança com situações encontradas na vida
cotidiana de seres humanos, pois representa uma situação de conflito, um dos principais
aspectos envolvidos na ansiedade em humanos.
Supressão condicionada
Também denominada resposta emocional condicionada. Neste procedimento, ratos
privados de água ou alimento são inicialmente treinados em uma tarefa operante, como
pressionar uma barra para obter um estímulo reforçador de forma intermitente. Após a
estabilização da resposta operante é iniciada a segunda fase, na qual ocorre uma aprendizagem
associativa. Um estímulo neutro, como luz ou o som, indica a ocorrência futura de um choque
elétrico. Após a fase de treino associativo, o animal retorna à condição operante e o estímulo
neutro, agora associado ao choque elétrico.
A aprendizagem aversiva é avaliada por meio de um índice de supressão de acordo com
a seguinte fórmula: [a / (a + b)], em que “a” representa o número de respostas na presença do
estímulo associado ao choque elétrico e “b” indica o número de respostas no período precedente
ao início desse estímulo. Um índice de supressão igual a 0,5 indica que o estímulo neutro ainda
não adquiriu qualquer propriedade aversiva; ou seja, a quantidade de respostas durante os
períodos “a” e “b” é igual e, portanto, não houve nenhuma supressão da resposta durante a
presença do estímulo condicionado. Quanto maior a propriedade aversiva desse estímulo menor
é o índice de supressão. Um índice igual a zero indica supressão máxima (ausência de respostas)
durante a presença do estímulo associado ao choque elétrico.
Embora vários relatos indiquem que drogas ansiolíticas em geral tenham a capacidade
de aliviar o efeito supressor do estímulo condicionado, o modelo não se mostra seletivo para
esses compostos.
Respostas de esquiva
O procedimento da esquiva ativa possui inúmeras variações. Em um dos primeiros estudos,
Mowrer e Lamoreaux empregaram uma shuttle-box, também conhecida por caixa de alternação
ou caixa de vai-e-vem. Esta e dividida em dois compartimentos iguais, separados por uma
barreira na qual o animal deve saltar para atravessar de um compartimento para o outro.
Choques nas patas podem ser acontecer no assoalho da caixa, enquanto uma luz ou um som
podem servir como estímulos de alerta. Nesse procedimento, o animal é colocado em um dos
compartimentos da caixa e depois de determinado período o estimulo de alerta e apresentado.
Quando isso ocorre, o animal deve ir para o outro compartimento antes da ocorrência de um
choque elétrico nas patas. Após curto período, o sinal de alerta é apresentado novamente, e o
animal deve retornar ao compartimento original para evitar o evento aversivo. Por esse motivo,
essa resposta é também denominada esquiva de duas vias.
Uma resposta de esquiva durante o estímulo de alerta cessa imediatamente esse estímulo e adia
o choque. Via de regra, nas primeiras tentativas, o animal tenta cruzar apenas com o choque,
caracterizando um comportamento de fuga. Após diversas tentativas, ele passa a emitir a
resposta de cruzar de um compartimento para o outro na presença do estimulo que antecede o
choque elétrico, caracterizando uma resposta de esquiva de duas vias.
Apesar do grau de semelhança e do poder de homologia relativamente altos desses modelos,
especialmente quando se refere a transtornos fóbicos, os efeitos de ansiolíticos, incluindo
benzodiazepínicos e agentes serotonérgicos, sao altamente contraditórios. De fato, mais do que
modelos animais de ansiedade, os paradigmas de esquiva ativa de duas vias, ou mesmo o de
uma via, tem sido mais frequentemente utilizado para estudo de processos de aprendizagem e
memória.
Como envolve um processo de aprendizagem em que uma resposta deve ser inibida, esse tipo de
esquiva também e chamada esquiva inibitória. Esse paradigma apresenta duas variações:
inibição do comportamento de descida de uma plataforma (step-down avoidance) e inibição do
comportamento de cruzar dois compartimentos (step-trough). No caso da esquiva inibitória da
descida da plataforma, o animal e colocado em uma pequena plataforma localizada cerca de 4 a
8 cm acima de um assoalho que pode ser eletrificado. Quando o animal coloca as quatro patas
no assoalho, um pequeno choque elétrico e liberado. Na sessão de teste, o animal e recolocado
na plataforma e a latência para descer e registrada e comparada com a latência de descida
durante o treino.
No caso da esquiva inibitória da resposta de cruzamento, o animal e colocado em um
compartimento muito iluminado e a latência da resposta de sair deste compartimento em direção
a outro, adjacente escuro, uma tendencia natural de roedores, e registrada.
Depois de entrar no compartimento escuro, o animal recebe um choque elétrico. Durante a
sessão de teste, em geral, 24 horas após a sessão de treinamento, o animal e recolocado no
compartimento iluminado e a latência para entrar no compartimento escuro e novamente
registrada.
Sobressalto intensificado pelo medo
A resposta de sobressalto (startle) intensificada pelo medo envolve uma fase de treino
e outra de teste. Durante o treino, metade dos animais e submetida a apresentações contingentes
de dois estímulos, uma luz seguida de um choque elétrico, enquanto a outra metade e submetida
a apresentações não contingentes dos mesmos estímulos. Durante o teste, os grupos sao então
expostos a som com alta intensidade (por exemplo, 110 dB), o que produz uma resposta reflexa
de sobressalto, cuja magnitude e medida por meio de um aparelho denominado estabilimetro.
Apenas metade da apresentação dos estímulos sonoros e precedida por um estimulo luminoso.
Os animais do grupo experimental que aprenderam a associação entre a luz e o choque elétrico
apresentam a resposta de sobressalto induzida pelo som intensificada pela luz. A amplificação
da resposta de sobressalto na presença da luz e interpretada como o efeito ansiogênica desse
modelo.
Diversos ansiolíticos, incluindo benzodiazepínicos e compostos serotonérgicos, atenuam a
magnitude da resposta de sobressalto ao som intensificado pela luz, sem provocar alteração no
padrão da resposta de sobressalto produzido pela apresentação do estimulo sonoro sozinho. O
modelo também tem se mostrado relativamente útil na detecção de efeitos ansiogênicos.
O modelo apresenta alta previsibilidade de resposta farmacológica para ansiolíticos
benzodiazepínicos e serotonérgicos, porem pouca semelhança e moderado grau de homologia
com as teorias de ansiedade. Como desvantagens, além do estabilimetro ser altamente sensível e
sujeito a variações, o procedimento demanda grandes sessões de treino e teste.
Resposta condicionada de congelamento
Define-se congelamento (freezing) como a postura de agachamento quando há ausência total de
movimentos aparentes, exceto os responsáveis pela respiração. Essa resposta e uma reação de
defesa eficiente, uma vez que predadores tem dificuldade em detectar uma presa imóvel, e o
movimento representa um estimulo que desencadeia a resposta de ataque do predador. O
congelamento e considerado uma resposta incondicionada quando provocado por uma situação
ameaçadora inata. Por exemplo, ratos congelam quando expostos a predadores naturais, como
gatos. Congelamento também e considerado uma resposta condicionada quando produzido por
uma situação de perigo aprendida. O condicionamento contextual aversivo representa uma das
formas mais simples e rápidas de produzir esse tipo de aprendizagem. Nesse procedimento, um
rato e exposto a um novo contexto e, depois de alguns minutos, um choque elétrico nas patas e
apresentado. Quando o animal retorna ao mesmo contexto, na ausência do choque elétrico, ele
apresenta uma resposta de congelamento, geralmente próximo a um objeto, como na esquina da
caixa ou em contato com uma das paredes (próximo, ou tendencia para fazer contato com
objetos).
Existe uma relação direta entre a intensidade do choque elétrico e a quantidade de resposta de
congelamento do animal frente a estímulos associados ao choque elétrico. É necessário também
que exista uma associação entre os estímulos contextuais e o choque elétrico. Por exemplo,
quando o choque elétrico e apresentado simultaneamente com a colocação do animal na caixa
experimental, não se observa nenhum condicionamento contextual aversivo.
O que torna a resposta de congelamento um índice muito atraente e o fato de que o estado
emocional do animal pode ser avaliado diretamente, sem nenhuma forma de privação de
alimento, água ou qualquer outra forma de aquisição de resposta operante.
Ansiolíticos benzodiazepínicos, tais como água e Diazepam, assim como agonistas do receptor
5-HT1A, como a ipsapirona, ou inibidores da receptação da serotonina, incluindo citalopram e
fluoxetina, reduzem o congelamento condicionado frente a estímulos contextuais previamente
associados a choques elétricos. Por outro lado, compostos ansiogênicas, tais como o agonista
benzodiazepinico inverso dimetoxi-beta-carbolina, produzem comportamento semelhante ao
congelamento provocado pelo condicionamento contextual aversivo.
Modelos Etológicos de Ansiedade
Campo aberto
O teste do campo aberto e realizado em uma arena circular ou quadrada cercada por paredes de
forma que o animal não possa fugir. O assoalho e marcado com pequenos quadrados, o que
permite a quantificação da atividade locomotora do animal. Alta defecação e baixa atividade
locomotora indicariam a ansiedade do animal. Pode-se também utilizar a atividade locomotora
do animal no centro do campo aberto como medida da mais seletiva de ansiedade, enquanto a
atividade locomotora na periferia do aparato como um indicador da atividade locomotora do
animal. O efeito de drogas ansiolíticas tem sido amplamente demonstrado nesse modelo.
Interação social
A frequência e o tempo gasto pelo par de machos em diferentes tipos de interação social
pode ser classificada em duas categorias: comportamentos agressivos (por exemplo, agarrar,
chutar, boxear ou morder) e comportamentos não agressivos (por exemplo, cheirar e
comportamentos de limpeza da face). Durante o teste, observa-se apenas o comportamento de
um dos animais. Nesse teste, ambos os animais sao colocados em uma arena com o assoalho
marcado em quadrados de forma que se possa quantificar a atividade motora do animal. Ambos
os animais sao individualmente aclimatados a arena, pelo menos um dia antes do teste. O
aumento na interação social sem o aumento concomitante na atividade motora e um indicador
de efeito ansiolítico. Ansiolíticos benzodiazepínicos e serotonérgicos aumentam a interação
social, enquanto drogas ansiogênicas promovem efeito oposto. O modelo também possui boa
seletividade, uma vez que agentes não ansiolíticos não alteram a interação social.
Filhotes de ratos produzem vocalizações ultrassónicas quando separados de suas mães
e irmãos. Essa vocalização, que tem a capacidade de desencadear um comportamento de
busca da mãe, caracteriza-se por frequências que variam entre 30 e 90 kHz, com uma duração
de 1 a 20 ms e intensidade de 60 a 100 dB. Nesse paradigma, quando um rato filhote entre 4 a
16 dias de idade e separado de sua mãe e irmãos por um breve período, costuma emitir uma
vocalização de 40 kHz. O teste pode ser realizado em duas condições distintas. Os filhotes sao
colocados em isolamento em ambiente quente (37°C) ou frio (18°C) por cinco minutos. O
número total e a duração das vocalizações ultrassónicas emitidas pelos filhotes durante este
período sao utilizados como índice de ansiedade. Compostos ansiolíticos benzodiazepínicos
diminuem a frequência de emissões dessas vocalizações, porém, os resultados com drogas
serotonérgicas e agentes ansiogênicas sao contraditórios
Transição claro-escuro
O modelo baseia-se na aversão inata que os roedores tem por áreas iluminadas. O instrumento
consiste em uma caixa com dois compartimentos iguais, conectados por uma pequena porta. Um
compartimento e iluminado e o outro escuro. Coloca-se o animal no compartimento escuro e
vários parâmetros, tais como a distância percorrida em cada compartimento da caixa, o numero
total de transições entre o compartimento claro e escuro, a latência para entrar em cada um dos
compartimentos e o tempo gasto em cada compartimento, podem ser medidos. O número total
de transições parece ser um índice de atividade locomotora, ao passo que o aumento seletivo no
número de transições do ambiente escuro para o claro, bem como o maior tempo de
permanência nesse último, e tido como índice de atividade ansiolítica. Os efeitos ansiolíticos
dos benzodiazepínicos e de agonistas dos receptores 5-HT1A já foram detectadas nesse modelo
animal.
Interação presa-predador
Animais, em seu ambiente natural, coabitam com predadores. Graças ao processo de seleção
natural, estímulos olfativos, sonoros ou visuais de predadores evocam na presa, de forma inata,
comportamentos de defesa. Um dos modelos mais conhecidos que utiliza a interação presa-
predador foi desenvolvido pelo casal Blanchard.6 Nesse modelo, existem três testes bem
definidos. Em um deles, ratos selvagens sao expostos a estímulos inatos sinalizadores de
ameaça em potencial, como o odor de um gato ou exploração de um ambiente previamente
frequentado por um gato. Nos outros dois testes, esses animais sao expostos a diferentes tipos de
estímulos de perigo real ou potencial, variando-se a proximidade do predador em condição
distante (estimulo distal) ou muito próximo a presa (estimulo proximal). Enquanto o teste que
avalia o perigo em potencial está associado a ansiedade, os outros dois estão relacionados ao
medo e ao pânico, respectivamente.
De acordo com a previsão farmacológica que valida o modelo, ansiolíticos benzodiazepínicos
diminuem os comportamentos relacionados a ansiedade, mas não alteram as reações associadas
ao medo (estímulos de perigo distal) e ao pânico (estimulo de perigo proximal). Os resultados
com drogas potencialmente ansiolíticas que atuam como antagonistas 5-HT2, tem sido, contudo,
contraditórios. Outro problema associado ao uso desse modelo e que poucos laboratórios
possuem condições de replicar o procedimento experimental nas condições em que foram
padronizados.
Ocultação defensiva condicionada
este modelo manipula a tendencia natural que ratos apresentam para enterrar em suas gaiolas
um objeto que adquiriram por aprendizagem associativas, propriedades aversivas. Este
comportamento de ocultação e tido como uma resposta defensiva de roedores e pode ocorrer em
situações nas quais exista longo intervalo entre o momento da aprendizagem associativa,
quando o objeto adquire propriedades aversivas, e a condição de teste em que o animal e
exposto a esse objeto. Objetos pontiagudos associados a choques elétricos tem sido utilizado.
A redução da frequência do comportamento de ocultação e interpretada como um efeito
ansiolítico. Ansiolíticos benzodiazepínicos, mas não serotonérgicos, atenuam esse
comportamento, enquanto drogas não ansiolíticas não produzem efeito algum. O modelo não
apresenta medida satisfatória de atividade locomotora do animal e seu grau de semelhança a
situações clinicas e bastante limitado.
Labirinto em cruz elevado
Atualmente, o labirinto em cruz elevado figura entre os modelos animais de ansiedade mais
utilizados para o estudo experimental de drogas ansiolíticas. o modelo explora o conflito entre a
tendencia natural de roedores de explorar ambientes novos e a aversão o medo natural que ratos
apresentam a altura e espaços abertos.
O instrumento consiste em quatro braços, sendo dois abertos e dois outros envolvidos por
paredes laterais. Os braços sao dispostos perpendicularmente uns aos outros, formando uma
cruz, e sao elevados alguns centímetros (geralmente 40 ou 50 cm) do solo. O arranjo dos braços
permite que os animais percebam simultaneamente o precipício e o espaço aberto. Nessa
situação, os animais exploram mais os braços fechados que os abertos. A tendencia de evitar os
braços abertos se deve mais ao espaço aberto do que a altura.
O procedimento-padrão consiste em expor livremente os animais por 5 minutos ao labirinto. As
porcentagens de entrada e tempo gasto nos braços abertos representam indicadores de
ansiedade. Já o total de entradas nos braços fechados, ou o número absoluto de entradas nos
braços fechados, são empregados como índice de atividade locomotora. Ansiolíticos
benzodiazepínicos aumentam as porcentagens de entrada e tempo gasto nos braços abertos,
enquanto drogas ansiogênicas promovem efeito oposto. Esses índices clássicos de ansiedade no
modelo sao, contudo, sensíveis a drogas serotonérgicas.
Labirinto em “T” elevado
Baseado em um princípio semelhante ao do labirinto em cruz elevado, este modelo explora a
aversão inata que ratos e camundongos apresentam a espaços abertos e altos. Ao contrário do
labirinto em cruz elevado, o labirinto em “T” avalia dois comportamentos de defesa distintos:
fuga e esquiva. O instrumento apresenta três braços de dimensões iguais, suspensos a 50 cm do
chão. Um dos braços e fechado por paredes laterais e os outros dois sao abertos, os braços sao
dispostos de maneira a formar um “T”. O procedimento envolve duas etapas. Inicialmente, o
rato e exposto ao braço fechado do labirinto e recebe treinos em tarefa de esquiva inibitória, na
qual passa a evitar os braços abertos. Esse comportamento está relacionado a ansiedade diante
de um perigo em potencial e é medido pelo aumento da latência que o animal leva para sair do
braço fechado ao longo de três tentativas. Na segunda etapa, o mesmo animal e colocado na
extremidade de um dos braços abertos, registrando-se a latência da resposta de sair desses
braços. Essa última resposta e definida como fuga.
Tem sido sugerido que a resposta de esquiva inibitória está associada ao transtorno de ansiedade
generalizada e a resposta de fuga com o pânico. Essa ideia tem sido corroborada pela validação
farmacológica do modelo. Os principais resultados indicam que ansiolíticos benzodiazepínicos e
a buspirona prejudicam o comportamento de esquiva dos braços abertos, sugerindo um efeito
ansiolítico. O comportamento de fuga, entretanto, e inibido por antidepressivos e outras drogas
utilizadas no tratamento farmacológico do transtorno do pânico.
Estimulação da Matéria Cinzenta Periaquedutal Como Modelo de Pânico
matéria cinzenta periaquedutal na sua porcao dorsal (MCPD). A estimulação elétrica da MCPD
de forma gradual produz em ratos, inicialmente, uma esposta de congelamento. A partir de
determinada intensidade, a resposta de congelamento desaparece e tem início uma resposta de
fuga muito intensa, caracterizada por corridas e saltos. Essas respostas de defesa induzidas pela
estimulação elétrica da MCPD sao utilizadas como diferentes modelos animais de pânico. Um
aspecto interessante da estimulação elétrica da MCPD e que, após a estimulação no limiar que
produz as respostas de correr ou saltar, essas respostas de fuga desaparecem assim que a
estimulação elétrica termina. Nesse momento, e iniciada uma nova resposta de congelamento.
Sabe-se, hoje, que esse congelamento após se diferencia bastante não só daquele induzido nos
momentos iniciais da estimulação direta da MCPD, mas também daquele induzido por
estímulos contextuais aversivos. Tem sido sugerido que o congelamento após sirva de modelo
para o transtorno do pânico, mas não para o ataque de pânico, ideia corroborada
farmacologicamente. Assim, agonistas serotonérgicos utilizados no tratamento do pânico
aumentam, paradoxalmente, os sintomas de ansiedade.

teoria serotonérgica clássica da ansiedade. De acordo com essa teoria, a serotonina e um

neurotransmissor ansiogênica e drogas ou outras intervenções que reduzam a ação desse
neurotransmissor no cérebro diminuem a ansiedade.
Muitos modelos que foram anteriormente validados com base nos efeitos de benzodiazepínicos
falham na detecção de compostos serotonérgicos. Mas, a despeito dessas limitações, os modelos
animais ainda representam ferramentas indispensáveis na pesquisa experimental das bases
comportamentais e neurobiológicas da ansiedade. As implicações desses estudos para a seleção
de novos compostos ansiolíticos sao inquestionáveis.

DROGAS
Mesmo que o uso de drogas de abuso comece por motivos pessoais, a adição leva a perda de
controle, mudando o foco de outras ações para persistir no uso do agente. Adições são
caracterizadas pelo uso compulsivo e descontrolado de uma droga ou de uma atividade, com
resultados mal adaptados e destrutivos. Variáveis genéticas e ambientais contribuem para
iniciação de uso de agentes aditivos e para a transição de uso a adição.
Adicionalmente, fatores epigenéticos são muito importantes para o desenvolvimento dos
fenótipos, e tais modificações podem ser influenciadas por genótipos ou o ambiente. Portanto,
modelos de abuso de drogas seriam também para prever a interação entre genótipos, fatores
ambientais e epigenéticos, que causam o fenótipo específico. Todos estes fatores são
apropriados para serem modelados no animal experimental.
Assim como os humanos, animais de laboratório voluntariamente auto-administram as drogas,
como agentes psicoestimulantes, opióides e etanol. Os modelos animais utilizados para estudar
a dependência química incluem, além da auto-administração da droga, a discriminação de
estímulos, dentre eles o condicionamento de lugar, e a auto-estimulação intracraniana, e procura
avaliar diversos aspectos da dependência, desde o processo de aquisição do uso de drogas, como
o potencial de reforço positivo das drogas, o potencial de reforço negativo da abstinência de
drogas, o potencial de geração de escalada no uso da droga e aspectos associados à recaída.
Vários outros modelos são usados para estudar os efeitos agudos ou crônicos das drogas.
Nenhum modelo não-humano é perfeito, já que nenhum dos modelos pode representar todas as
características do complexo traço biopsicossocial humano, como motivação para o excesso de
consumo de droga ocasional, o desenvolvimento de dependência e estabelecimento do impacto
a saúde.
A validade preditiva em um modelo animal auxilia na previsão do tratamento da desordem
humana em geral, baseado no desempenho do modelo. A validade preditiva se refere a
habilidade do modelo de identificar as drogas com valor terapêutico nos seres humanos
(referido como “exame medico”, acima), sem responder a drogas que não são eficazes na
condição humana.

Modelos baseados em sintomas de abuso/ dependência de drogas raramente apresentam

asíndrome de dependência completa. Freqüentemente tentam representar alguns dos aspectos da
auto-administração da droga, intoxicação aguda, exagero de consumo, tolerância ou a
sensibilização menos freqüente, recaída ou reinstalação da droga, discriminação da droga, uso
escalado das drogas e o relapso. os roedores aprendem a realizar ações de apertar alavancas
ou pressionar o focinho dentro de um buraco para receber a injeção intravenosa de todas as
drogas potencialmente aditivas aos seres humanos.
Existem maneiras diferentes de avaliar os efeitos comportamentais das drogas em um cenário
pré-clinico, muitos deles usando a) equipamento para avaliar movimentos ou ações, b) escalas
para determinar a intensidade dos efeitos comportamentais observados com doses diferentes das
drogas, e c) o modelo etológico que descreve as seqüencias dos atos e posturas após filmagem
em vídeos, depois da administração da droga. Estas avaliações são usadas para intoxicações
agudas e prolongadas. Existem paradigmas para acessar a resposta ao abuso as drogas entre
camundongos e ratos. Medidas de intoxicação, tolerância, dependência, e sintomas de
abstinência são avaliados por um observador treinado, usando um meio de contagem
estandardizado no local ou após filmagens. Observações de saúde geral, comportamento na
gaiola, habilidades sensoriais, e funções motoras devem ser primeiro conduzidas por um exame
físico e das funções motoras dos animais.
A locomoção exploratória pode ser testada numa caixa automatizada, equipada de fotocélulas
ou observada diretamente ou com a gravação de um vídeo no campo aberto para todas as drogas
novas. As drogas que são estimulantes do SNC geralmente aumentarão a locomoção, enquanto
que os depressores do sistema nervoso central diminuirão a locomoção, de uma maneira que
seja dependente de doses. Efeitos adicionais como a alimentação, as funções de aprendizado e
memória, sensibilidade a dor, comportamentos relacionados a ansiedade, comportamentos
relacionados a depressão ou comportamentos relacionados a esquizofrenia; comportamentos
sexuais e reprodutivos, interações sociais também podem ser testadas avaliação da tolerância e
sensibilidade, assim como abstinência.
Modelos animais tem revelado reações de ansiedade com todas as drogas de abuso durante o
abstinência aguda. A variável dependente é geralmente uma reação passiva a um estimulo novo
e/ou aversivo, assim como no campo aberto ou labirinto em cruz-elevado, ou uma reação ativa
em resposta a um estimulo aversivo.
Modelo Alostático para explicar as mudanças persistentes na motivação e nas habilidades de
controle regular que são associadas com a recaida. O estado alostático representa um desvio do
funcionamento normal (homeostático) em um individuo, que inclui uma alteração na
recompensa e o estabelecimento de pontos de autoregulação (revisado em Le Moal e Koob,
2007). O estado alostático, se relaciona com consumo compulsivo da droga e a perda de
controle para consumi-la, se relaciona com desequilíbrio de diversos sistemas
neuroquímicos envolvidos na recompensa da droga. Alguns sintomas de abstinência do etanol
em seres humanos podem ser modelados em animais (Becker, 2000). Efeitos disfóricos, assim
como a ansiedade e a depressão, podem ser modelados com testes como o labirinto em cruz-
elevado, teste de interação social, ou teste claro-escuro para a ansiedade e o teste de natação
forcada
ou o teste de suspensão pela cauda em camundongos, para a depressão. Considerando as
medidas relacionadas a ansiedade, deve-se observar que elas podem ser confundidas pela
diminuição marcada do nivel de atividade que é observado em roedores durante a fase inicial de
abstinência.
Usando modelos animais, esta sensibilização dos sintomas de abstinência foram documentadas
por um aumento de comportamentos como ansiedade, medidos pelo teste claro-escuro, aumento
da magnitude de comportamento convulsivo, e alterações no EEG, medidas por mudanças nos
padrões de sono com REM e incidência de “brief spindle episodes”.
Assim como entre os humanos, a maioria dos animais de laboratório precisa aprender a usar a
droga, decidir se tem prazer ao usá-la e repetir o uso, antes de se tornarem dependentes. A auto-
administração em animais replica aspectos dos seres humanos, pelo uso de métodos operantes e
não-operantes. Este método tem alto grau de validade de semelhança e podem ser utilizados
para descrever endofenótipos.
Drogas de abuso são prontamente auto-administradas endovenosamente por animais
experimentais e, em geral, drogas que são auto-administradas por animais e humanos tem risco,
com potencial de abuso, apesar das diferenças entre espécies e entre cepas quanto ao grau de
auto-administração da droga. Drogas que causam dependência em humanos são auto-
administradas por animais e as que não são auto-administradas, não são aditivas aos humanos.
Para métodos operantes a principal consideração é que o animal executa voluntariamente
resposta simples ou mais complexa como pressionar uma alavanca, ao associar que este ato
levará a oferta de uma dose de droga. Há relação entre resposta (número de atos motores) e
reforço (droga), conhecido como o esquema de reforço e descreve quantos atos motores são
necessários para serem reforçadores, quanto tempo deve se passar até o próximo reforço estar
disponível e que pistas (luz ou sons) sinalizam a disponibilidade do reforço.
Para estes estudos, animais são preparados cirurgicamente com cateteres intravenosos na veia
jugular, que permitem injeções de drogas de forma automatizada. Após, são treinados a
pressionar uma barra ou alavanca para receberem doses de drogas, como heroína ou cocaina. O
modelo de auto-administração endovenoso de drogas se dá através de um paradigma de
condicionamento operante, com o pressionar de uma alavanca gerando a injeção da droga. Dois
parâmetros importantes a serem levados em consideração são o intervalo inter-injeção mínimo e
a dose unitária. Costuma-se usar um intervalo de tempo entre cada injeção da droga para que o
animal não possa iniciar novas injeções até que a injeção atual tenha terminado pode acontecer
esquemas de padrão progressivo, há a exigência de número crescente de respostas para
desencadear a injeção da dose de droga. Este esquema é usado para determinar o esquema fixo
máximo que um sujeito completa para receber uma injeção reforçadora de droga. Há aumento
progessivo da FR (de 1 ou 5 para 7,9,18,25,35,45, etc...) até que o animal deixe de ¨trabalhar¨,
ou seja, bater na alavanca, para receber uma dose de droga. O ponto de ruptura, “break point”, é
definido como a primeira exigência de relação fixa aumentada em que o animal desiste de gerar
estímulos na tentativa de obter a droga, representando o máximo de trabalho que um indivíduo
executaria para obter a droga. O ponto de ruptura representa a eficácia reforçadora da droga.
Outra forma de avaliar a auto-administração é pelo uso da via oral onde os animais são alojados
individualmente e dois bebedouros são oferecidos, um com água e o outro com solução da
droga. Este procedimento é usualmente utilizado com etanol (Samson 1986), mas também com
cocaína ou derivados opioides para permitir escolha da solução pelo animal. Nesse
procedimento é usada a avaliação do volume total consumido e da escolha pelo consumo da
droga, representada pela proporção de volume de droga consumido em relação ao volume total
consumido (Barros e Miczek 1996, Jentsch 1998). Caracteriza-se preferência pela droga quando
o animal ingerir mais de 50% do volume líquido de droga e aversão quando optar por utilizar
uma proporção de água maior do que de droga. Também podem ser usados procedimentos de
condicionamento operante na auto-administração oral de drogas de abuso (Macenski 1998).
Uma limitação da auto-administração oral relaciona-se com a aversão de sabor à solução da
droga, como é o caso do etanol, que limita o consumo e prejudica os resultados, bem como
críticas quanto a validade de face do modelo, no caso de drogas que são consumidas por outras
vias que não a oral, como a cocaína.
Quando os animais estão habituados a consumir solução de sacarose+etanol 10%, a sacarose é
removida gradualmente até que o animal esteja consumindo quantidades grandes de etanol em
períodos curtos (15 minutos) ou longos de tempo. Oferecer a opção de vários bebedouros com
concentrações múltiplas de etanol ao invés de um único bebedouro também aumenta o consumo
de etanol.
O modelo animal de auto-administração é o “padrão-ouro” para averiguar as propriedades
reforçadoras de drogas de abuso, e é usado para triagem de agentes farmacológicos antes da
liberação no mercado farmacêutico, além de aumentar conhecimentos sobre os correlatos
neurobiológicos do prazer e reforço.
Animais adquirem reinstalação, após a extinção, muito mais rápido que o estabelecimento
prévio de auto-administração da droga. A auto-administração de droga pode ser readquirida pela
oferta de uma dose não pareada a qualquer comportamento, pela administração de droga
intraperitoneal, por apresentação de uma pista (som ou luz), ou apresentação de stress.
Modelos de intoxicação ou ¨bebedeira¨. Dois métodos que modelam como os animais bebem
a ponto de intoxicação são o “beber no escuro” e “esquema de grande consumo de etanol”. O
procedimento beber no escuro usa o fato de que a maioria dos comportamentos consumatórios
em roedores ocorre durante o período da noite. Este procedimento mede consumo de acesso
limitado de etanol por 2 a 4 hrs, nas primeiras horas do período escuro, onde os camundongos
C57BL/6 bebem doses que produzem níveis sanguíneos acima de 100 mg% de etanol.
Modelos de Dependência. Em geral, procedimentos que avaliam os efeitos da história de
exposição ao etanol para estabelecer dependência física na auto-administração periódica de
etanol são categorizados como “modelos de dependência.” Estudos que medem consumo de
etanol em animais após a história de exposição a etanol descrevem aumento da auto-
administração de etanol em animais dependente.
Estudos recentes demonstraram que ratos aumentaram significativamente auto-administração
oral de etanol e mantém comportamentos de obter etanol para evitar a abstinência (Roberts et
al., 1996). Estudos subseqüentes determinaram que “beber induzido por abstinência” era mais
pronunciado quando a exposição a etanol (etanol vaporizado) era intermitente .
Modelos de Reinstalação. Nas duas últimas décadas, aumentou a atenção sobre modelos
animais de fissura e recaída ao etanol Um achado curioso é que uma dose de etanol, é um
estímulo fraco para a reinstalação, sendo necessário a apresentação concorrente de estímulo
associado ao etanol (Lê e Shaham, 2002; Nie e Janak, 2003) e é descrito que estresse por
choque nas patas é muito mais efetivo em reinstalar o comportamento de busca etanol.
Este “efeito de privação de etanol ” refere-se ao aumento transitório do consumo de etanol que
ocorre após abstinência. Este efeito de privação de etanol pode ser considerado um modelo de
recaída (Sanchis-Segura e Spanagel, 2006), mas não é claro se o etanol está agindo como uma
pista (gosto e cheiro) ao hábito ou se há ¨fissura¨.
Condicionamento de lugar. Condicionamento de lugar é usado com roedores para estudo de
motivação positiva (reforçador) ou negativa (aversivo) aos efeitos de experiências (intoxicação,
retirada, abstinência). O protocolo para induzir CPP com a droga consiste de três fases:
habituação ao equipamento; condicionamento (oito ou mais sessões de 5-min quando droga é
pareada com uma pista no chão ou paredes (CS +); veículo é pareado com o outro tipo de chão
ou paredes (CS -). Estudos de condicionamento de lugar tipicamente concluem com um teste
30–60 min que oferece ao animal a escolha entre o CS+ e CS- após administração de veículo ou
droga (Cunningham et al., 2006). Aversão condicionada de lugar tem sido usada para medir o
estímulo aversivo dos efeitos de retirada, principalmente no contexto de opióides (Hand et al.,
1988; Stinus et al., 1990).
Uma droga é injetada e o sujeito é colocado em um ambiente teste, com pistas ambientais
distintas, por exemplo, com paredes com padrão xadrez preto-branco. Quando injetado com
solução controle, o animal é colocado em ambiente neutro, com paredes claras. O procedimento
é repetido por vários dias, durante os quais os animais adquirem a associação entre o estado
subjetivo produzida pela droga e o ambiente, durante o estado de intoxicação. Quando o animal
é retestado em um aparelho que contém as pistas ambientais associadas a droga em um
compartimento e um ambiente neutro em outro, ele se desloca em direção ao ambiente com as
pistas, se estiver em situação de uso de droga ou ao ambiente neutro se não estiver. A escolha
do animal por permanecer mais tempo em um determinado ambiente gera uma medida direta do
efeito de reforço condicionado da droga. Tal procedimento pode ser usado tanto para avaliação
do reforço positivo da droga (Le Pen e cols., 1998, Cunningham e cols., 1999, Shippenberg e
Heidbreder, 1995) como de reforço negativo da abstinência (Emmet-Oglesby e cols., 1990,
Gellert e Holtzman, 1979, Dentro dos mesmos conceitos básicos encontramos ainda a aversão
condicionada de sabor. Neste teste, uma solução de sabor agradável (p. ex.: sacarina) é pareada
com a administração de uma droga e observa-se o quanto o animal vai evitar o consumo desta
substância posteriormente, representando uma versão da possibilidade de ter a sensação do uso
da droga novamente. É um teste usado para avaliar os efeitos aversivos do uso agudo de uma
droga, que são independentes de suas propriedades reforçadoras (Gouldie 1987, Riley e Tuck,
1985). Durante o teste de discriminação o experimentador tenta determinar se o sujeito: “está
com vontade de sentir um efeito específico da droga em contraste com efeitos gerais de drogas”
De fato, o estímulo discriminativo corresponde aos efeitos subjetivos experimentados por
indivíduos intoxicados (Spanagel , 2009).
Auto-estimulação intracraniana é utilizada há muito tempo para medir o reforço agudo de
drogas de abuso em ratos e camundongos, em comparação com um estímulo prazeroso. Pode
ser administrada por eletrodos monopolares ou bipolares. Enquanto ratos respondem em a
alavanca, camundongos respondem em uma roda e as respostas operantes corretas favorecem o
reforço da estimulação cerebral. Para quantificar as respostas, estudos incluem diferentes
variantes: o desvio das curvas, detecção do limiar e auto-titulação Drogas de abuso, quando
administradas agudamente, diminuem os limiares cerebrais de reforço por estimulação com
pouca ou nenhuma tolerância para este efeito (Kornetsky e Esposito,1979) e quando
administrado crônicamente aumenta limiares de reforço durante a retirada.
A estimulação elétrica das áreas cerebrais produz dois efeitos. Um efeito motivacional,
transitório, extremamente poderoso, que potencializa seletivamente o comportamento de auto-
estimulação, excluindo a expressão de outros comportamentos. Um efeito de reforço, que
aumenta a probabilidade de que a resposta geradora da estimulação venha a ser repetida e o
armazenamento da experiência na memória o que leva a modificação do comportamento
subseqüente. De maneira geral, esses dois efeitos são medidos em conjunto.
A auto-estimulação intracraniana tem como vantagem: o estímulo direto dos sistemas de
recompensa, evitando a parte aferente do sistema e resultados de interação; gera dados
quantitativos que podem ser analisados por testes estatísticos paramétricos; não são necessários
estados de privação e não há saciedade, podendo as sessões serem realizadas repetidamente por
longos períodos de tempo; o treinamento na tarefa operante é rápido, uma vez que a estimulação
elétrica é um potente reforçador; o comportamento e limiares aferidos nessa técnica são estáveis
ao longo do tempo, assim podem ser usadas técnicas de medidas repetidas que tem maior poder
estatístico mesmo com amostras menores. As desvantagens envolvem a necessidade de cirurgia
para implantação do eletrodo; o fato de que nem todos os animais nos quais é feita a cirurgia
vão exibir a resposta esperada, principalmente por mau posicionamento do eletrodo; a maior
parte dos esquemas usados requerem treinamento de uma a três semanas antes de qualquer
coleta de dados