Curso de Farmácia

Bioquímica prática: Carboidratos: 2ª parte

NOME: ________________________________________________________________
Turma de laboratório_______________________Bancada nº ( )
Colegas de bancada: _______________________________________________________________

1 OBJETIVOS

Análise qualitativa carboidratos à presença de cetoses (reação de Seliwanoff), hidrólise de um dissacarídeo e análise
qualitativa de amido.

2 INTRODUÇÃO
A sacarose, ou açúcar de cana, é um dissacarídeo de glucose e frutose, sendo extremamente abundante no reino
vegetal e é conhecida como açúcar de mesa. Em contraste com a maioria dos dissacarídeos e oligossacarídeos, a
sacarose não possui átomos de carbono anomérico livres, uma vez que os átomos de carbono anoméricos de ambos os
monossacarídeos estão ligados entre si e não podem sofrer oxidação. Por esta razão, a sacarose não age como açúcar
redutor.

Figura 2 – Estruturas de lactose (açúcar redutor) e da sacarose (açúcar não redutor)

O amido e a sacarose são açúcares não-redutores, cujas ligações glicosídicas são hidrolisadas pelo tratamento
com ácidos fortes à quente, produzindo monossacarídeos. Estes produtos, por sua vez, são açúcares redutores, pois
possuem uma hidroxila livre no carbono anomérico. A comprovação da hidrólise ácida do amido e da sacarose se dá
pela positividade da reação de Benedict.

3 DESENVOLVIMENTO
3.1 Material

EPIs
Máscara Jaleco óculos
Em cada bancada
Água destilada Reagente de Benedict Solução de sucralose
Algodão Tubos de ensaio Reagente Seliwanorff
Solução de amido 2% Soluções de carboidratos Solução de iodo
Reagente de molisch Solução de sucralose reagente de Barfoed
HCL 3 mol/L NaOH 3 mol/L H2SO4 conc

3.2 Procedimentos

3.3.1 Hidrolise ácida de sacarideos

 2ª parte: Adicione 4-5 gotas de solução de HCl 3 mol/L a 5 mL de solução de sacarose e aqueça em banho-maria
por 5 min, a seguir adicione 4-5 gotas de NaOH 3 mol/L. Faça o mesmo com uma solução 1% de amido mas deixe
aquecer por cerca de 30 min. Faça o teste de Benedict usando 1-2 mL das soluções acidificadas (sacarose e amido) e
compare os resultados obtidos com as soluções sem a adição de ácido.

Amostras Amido Sacarose

Cor

+ ou -

Conclusão:

3.2.2 - Reação com o reagente de Seliwanoff: distingue cetoses de aldoses:

Coloque 2-3 gotas de soluções de carboidratos em diferentes tubos de ensaio. Adicione 5 mL de solução de
resorcinol. Coloque todos os tubos em banho-maria. Anote a cor em cada tubo de ensaio após 1 min e após 4 min. O
desenvolvimento de cor vermelha após 4 min constitui teste positivo para cetoses. Aldoses reagem mais lentamente.
Ceto-hexoses: solução vermelho-cereja
Cetopentoses: solução azul esverdeada.
Aldoses: não há desenvolvimento de cor.

Essa prática segue os mesmos princípios teóricos que embasam a reação de Molisch, onde há formação
defurfural e hidroximetilfurfural (HMF). Esses dois produtos, isoladamente, são incolores. Assim, adiciona-se um
composto fenólico ao meio para que seja desenvolvida coloração visível (nesse caso, vermelha). A reação de
Seliwanoff só diferencia-se da reação de Molisch nos reagentes utilizados: o ácido que causará a desidratação do
carboidrato é o ácido clorídrico (HCl) e o fenol que reage como o furfural e HMF é o resorcinol
Esse teste permite diferenciar aldoses de cetoses porque a reação com a cetose é mais rápida e mais intensa. Isso
porque a formação do furfural é mais fácil que a formação do hidroximetilfurfural.

Figura 3 - Reação de Seliwanoff com cetose

Preparo do reagente de Seliwanoff: dissolver 0,05g de resorcinol em 100 mL de HCl diluído (na proporção 1:2).

Resultados
Amostras Lactose Maltose Amido Sacarose Frutose Dextrose
 Cor

+ ou -

Colocar os tubos em banho-maria em ebulição, durante 10 minutos, observando os tubos de 3 em 3 minutos.

Observe se em alguns tubos a reação é mais rápida e intensa.

Conclusão

3.2.3 - Reação com Iodo: Reação do amido

Em um tubo de ensaio colocar 5,0 ml de água destilada, 10 gotas de amido 1% e uma gota de Lugol Verificar o
aparecimento de uma intensa coloração azul, que desaparece pelo aquecimento brando (banho maria), e reaparece,
porém, mais fraca, pelo resfriamento rápido.

Preparo da reação com iodo (Lugol): dissolvem-se 2 g de iodeto de potássio (KI) em 100 ml de água destilada. 2. Acrescentar
1 g de cristais de iodo. 3. Completar a 300 ml de água destilada. Manter em frasco âmbar ou coberto com papel alumínio.

Anote as mudanças observadas.

Explique o porquê da “coloração azul”

Procure na literatura, a estrutura do glicogênio, e responda se o teste daria positivo ou negativo, justificando sua
resposta.

Qual a diferença estrutural entre:

a) amilose e celulose

b) amilose e amilopectina
c) amilopectina e glicogênio

d) celulose e quitina

Bibliografia
CISTERNAS, José Raul. Fundamentos de bioquímica experimental. 2. ed. São Paulo: Editora Atheneu, 2001. 275
p.