UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL

FACULDADE DE FARMÁCIA
DEPARTAMENTO DE ANÁLISES

Disciplina de Bioquímica Clínica I

Relatório de Aula Prática

AULA: Enzimas II (Amilase, Lipase, Gama GT e Fosfatase alcalina)

Nomes: Jessika Lara e Thayana Tabarkiewicz

Importância Clínica dos métodos:

Amilase - O aumento de sua atividade é utilizado para diagnóstico de doenças pancreáticas e

também de doenças não pancreáticas, como: insuficiência renal, caxumba, tumores de pulmão e
serosos de ovário, cetoacidose diabética e lesão nas glândulas salivares. Já sua diminuição pode
ser caracterizada por gravidez, ICG, câncer gastrointestinal e fraturas.

Lipase - Quando aumentada (hiperlipasemia) serve para diagnóstico de distúrbios pancreáticos, e

quando encontrada na urina indica problema na filtração glomerular.

Gama GT - Observa-se seu aumento em colestase intra ou extra hepática, consumo de álcool,
neoplasias hepáticas ou metástases, hepatites infecciosas e no uso de fenitoína, fenobarbital,
carbamazepina, ácido valpróico e contraceptivos. Já fármacos como azatioprina, clofibrato,
estrógenos e metronidazol diminuem sua atividade.

Fosfatase Alcalina - Investigação das desordens hepatobiliares (aumento conjunto das

transaminases) e ósseas, também está aumentada na gravidez e menopausa.

Princípios dos métodos:

Amilase - Método amiloclástico - cinético colorimétrico (CARAWAY modificado)

A enzima amilase hidrolisa o amido liberando moléculas de açúcares e dextrina, e com a adição
de iodo ocorre a formação de cor azul com o amido que não foi hidrolisado pela enzima. Quanto
maior a atividade da enzima, menos amido não hidrolisado e menor a intensidade da cor azul
(inversamente proporcional).

Intervalos de referência:
• SORO: 28- 100 U/L (KIT LABTEST: 60 – 160 U/dL)
• URINA: 50- 140 U/HORA (KIT LABTEST: 50-140 U/HORA)

Lipase - A enzima hidrolisa o substrato cromogênico em meio alcalino a um ácido éster

dicarbônico instável que se hidrolisa espontaneamente, resultando em ácido glutárico e
metilresorufina (cor vermelha), com pico de absorção a 580 nm. Quanto mais vermelho o
resultado, maior é a atividade da lipase (diretamente proporcional).
Gama GT - Método cinético - fotométrico
A gamaglutamil transferase catalisa a transferência do grupamento glutamil da L-gama
glutamil-p-nitroanilida para a glicilglicina, formando gamaglutamilglicilglicina e p-nitroanilina. A
p-nitroanilina tem elevada absorbância em 405 nm, é diretamente proporcional à atividade de
gama GT na amostra.

Intervalos de referência:
• MULHERES: 5-38 U/L
• HOMENS: 7-55 U/L

Fosfatase Alcalina - Reação enzimática em que ocorre hidrólise alcalina do grupo fosfato,
formação do cromógeno p-nitrofenol, a quantidade de p-nitrofenol formada, tem absorbância em
405 nm, é diretamente proporcional à atividade da fosfatase alcalina na amostra.

Intervalos de referência:
• HOMENS: 53- 128 U/L
• MULHERES: 42- 98 U/L
• CRIANÇAS: 54 -369 U/L

Exercício:
Um bioquímico realizou a análise da atividade das enzimas lipase e amilase em amostras de
soro de 2 pacientes (amostra 1 e amostra 2) e das enzimas fosfatase alcalina e gama GT em
amostras de soro de outros 3 pacientes (amostras 3, 4 e 5). Todos os pacientes são adultos e do
sexo masculino. Os valores de absorbância encontrados nos diferentes métodos estão descritos
nas tabelas abaixo.

Lipase Absorbância 90s Absorbância 180s

Calibrador (conc. 93U/L) 0,032 0,118
Amostra 1 0,044 0,128
Amostra 2 0,030 0,195

Lipase
A = [(Teste A180-A90)/(Ref A180-A90)]xCC
A1 = [(0,128-0,044)/(0,118-0,032)]x93 = 90,84 U/L
A2 = [(0,195-0,030)/(0,118-0,032)]x93 = 178,43 U/L

Amilase Absorbância
controle 0,344
Amostra 1 0,310
Amostra 2 0,194

Amilase
A1 = [(0,344-0,310)/0,344]x800 = 79,07 U/dL
A2 = [(0,344-0,194)/0,344]x800 = 348,84 U/dL

Fosfatase Alcalina Absorbância 1 Absorbância 2

Amostra 3 0,180 0,380
Amostra 4 0,390 0,444
Amostra 5 0,340 0,650

Fosfatase Alcalina
Ateste = (A2 - A1/2)xF2764
A3 = (0,380-0,180)/2x2764 = 276,4 U/L
A4 = (0,444-0,390)/2x2764 = 74,63 U/L
A5 = (0,650-0,340)/2x2764 = 428,42 U/L
 Gama GT Absorbância
padrão 0,840
Amostra 3 0,122
Amostra 4 0,462
Amostra 5 0,680

GGT (U/L) = (Abs teste/Abs padrão)x125

A3 = (0,122/0,840)x125 = 18,15 U/L
A4 = (0,462/0,840)x125 = 68,75 U/L
A5 = (0,680/0,840)x125 = 101,19 U/L

Baseado nos valores obtidos, calcule as atividades enzimáticas nas 5 amostras, correlacionar os
achados encontrados e sugira qual a hipótese diagnóstica (HD) mais provável.

Lipase (U/L) Amilase (U/dL) Fosfatase Gama GT (U/L) HD

Alcalina (U/L)
Amostra 1 90,84 79,07 C
Amostra 2 178,43 348,84 D
Amostra 3 276,4 18,15 B
Amostra 4 74,63 68,75 A
Amostra 5 428,42 101,19 E

Hipóteses diagnósticas possíveis:

A) Consumo de álcool
B) Metástase óssea

C) Pancreatite aguda

D) Obstrução do ducto pancreático

E) Colestase