Avaliação qualitativa dos produtos farmacêuticos e correlatos: segurança, eficácia

terapêutica/cosmética e eficácia funcional.

Não deve haver nenhum patógeno nos produtos, por isso existe o controle de qualidade com
finalidade de não agregar toxicidade aos produtos de fins de diagnósticos ou terapêuticos.

Todos os produtos devem ser de boa qualidade com segurança, eficácia terapêutica e eficácia
funcional e as legislações possuem especificações para avaliação e posterior liberação dos
produtos.

Tipo de contaminante e a carga microbiana

Patógenos primários são potencialmente patogênicos, capazes de desencadear processos

infecciosos e desenvolver enfermidades.

Oportunistas – Geralmente não são patogênicos quando no seu habitat natural, mas a
depender das condições do hospedeiro pode vir a se tornar patogênico. Ex.: Candida albicans

Enterobactérias – Habitam trato intestinal do homem e também de animais de sangue quente.

Têm suas características: Fermentam glicose, lactose e outros carboidratos e produzem gazes.
1arios - Presente em maior quantidade. Ex.: Bacteróides, lactobacillus, E.coli e enterococcus.
Cultivo em meio de cultura contendo Ágar e os microrganismos se apresentarão na forma de
colônias. Bactérias, bolores e leveduras formam colônias de tamanhos, formas e aspetos
diferentes que servem para facilitar na identificação da espécie do microrganismo (M.O.) a
desejar.
2arios – Presente em menor quantidade. Ex.: Gênero Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter,
Clostridium (anaeróbio), Staphylococcus, Bacillus, leveduras e bolores. Presentes em nossa
flora intestinal.
Raros – Proteus, Providencia e Pseudomonas aeruginosas.

Classificação da flora fecal de acordo com o tipo de respiração e coloração pelo método de
Gram:

 Gram (-):
Aeróbicas (E. coli (maior destaque), Citrobacter, Klebsiella e Enterobacter)
Anaeróbicas (Bacteróides e lactobacillus)
 Gram (+):
Aeróbicas (Enterococcus, Staphylococcus e bacillus)
Anaeróbicas (Clostridium)
 Leveduras e bolores.

 Enterobacteriaceae
 Coliformes Totais

- Bastonetes gram (-)

- Aeróbicos ou anaeróbicos facultativo
- Não esporulados
- Capazes de crescer na presença de sais biliares ou agentes tensoativos
- Fermentam lactose na temperatura média entre 35 e 37 C(mesófilas)
- Produção de ácido, gás e aldeídos em até 48h.
- Estão presentes no meio ambiente emaguas com alto teor de material orgânico, solo e
vegetação em decomposição.
- Embora não seja considerado patogênico em condições normais, algumas cepas causam
diarreia infecções oportunistas.
- Todas as bactérias do grupo dos Coliformes totais produzem uma enzima chamada beta-
galactosidase, que promove a quebra da lactose em glicose e galactose.
- A enzima é detectada através do substrato Orto-nitrofenil–Beta-D-glicopiranosídeo
(ONPG).

 Coliformes Fecais ou Termotolerantes

– Resistente a altas temperaturas 44 -45 graus (termófilas)

- crescem e fermentam lactose em temperaturas maiores que os coliformes totais.
- São representados pelos gêneros, E. coli, Klebsiella, Enterobacter e citrobacter.
- Só a bactéria E. coli é exclusivamente de origem fecal, indicador de contaminação fecal.
- A E. coli possui uma enzima específica – a Beta-glicuronidase.
- Esta enzima é detectada através do substrato 4-metilumbeliferil-Beta-D-glicuronídeo
(MUG).

Características de um indicador de contaminação fecal:

- A E. coli é o MO encontrado em maior quantidade nas fezes de humanos e animais de
sangue quente;
- Persistência na água e resistência à desinfetantes, semelhantes aos MO patogênicos de
veiculação hídrica;
- Pode ser quantificado por métodos laboratoriais rápidos e simples.

 Bastonetes Gram (-)

 E. coli
- É considerada não patogênica, algumas cepas produzem enterotoxinas, dentre as quais 04
tipos são conhecidas como agentes etiológicos da diarreia humana, a saber: enteropatogênica
clássica, enteroinvasora, enterotoxigência, enterohemorrágica.
- Indicador de contaminação fecal;
- Comum no trato urogenital e pode causar infecções sendo (oportunista);
- Produz proteínas chamadas bacteriocinas que ajudam a manter o equilíbrio ecológico das
bactérias intestinais; eliminar bactérias que querem se sobrepujar.
- Dose infectante 10^6 - 10^9 (UFC)
- meio de cultura EMB (ÁGAR EOSINA AZUL DE METILENO), mais utilizado para isolamento da
E. coli deixam um Pigmento verde na placa.

 Salmonella sp.
- Potencialmente patogênico;
- Habita o trato intestinal de gado bovino e aves domésticas;
- o tempo de sobrevivência na água e no esgoto pode alcançar até 60 dias numa temperatura
de 20 a 30º C
- Possui cerca de 2000 sorotipos;
- Agente de gastroenterites;
- Não faz parte de nossa microbiota intestinal;
- Dose infectante 10^3 – 10^5 MO
- Meio de cultura: Ágar sulfito de bismuto. Deixam um Pigmento brilhante, cinza, na placa.

 Pseudomonas aeruginosas
- Habita o trato urinário, feridas e queimaduras (infecção hospitalar)
- Causa abcessos, septicemia e meningite
- Agente de infecções oftálmicas
- Comum em solos e ambientes naturais
- Podem crescer em temperatura de refrigeração
- Capaz de sintetizar grande número de enzimas e por isso reproduzem-se mais, pois degradam
matérias orgânicas e inorgânicas
- Habilidade para crescer em resíduos de sabão e antissépticos à base de quaternário de
amônio
- Resistente à maioria dos antibióticos
- Meio de cultura: Ágar cetrimida [Piocianina (azul) e Fluoresceína (amarelado)]

 Endotoxinas bacterianas (presas na parede celular)

- Lipopolissacarídeos (LPS) associados à membrana externa das bactérias gram (-)
- A presença de bactérias gram (-) que contêm LPS em sua membrana pode causar reação
pirogênica no homem na faixa de no mínimo 1ng/kg (limite estabelecido)

 Cocus gram (+)

 Staphylococcus aureus
- Suporta alta pressão osmótica e baixa umidade
- Cresce e sobrevive em secreções nasais em portadores sãos
- Produz coagulases (enzimas que formam coágulos de fibrina no sangue)
- produz exotoxinas associadas à inúmeras síndromes
- Desenvolve alta resistência à antimicrobianos
- infecta feridas cirúrgicas
- síndrome de choque tóxico (SCT)
- Enterotoxina (infecção alimentar)
- Leucocidina (destrói leucócitos e fagócitos)
- Coagulases (coagula o plasma)
- Foliculite
- Toxinas alfa e delta que destroem células humanas
- Meio de cultura: Ágar sal-manitol (ambiente hipertônico)

 Bastonetes gram (+)

 Clostridium sp.

- Anaeróbios obrigatórios
- 3 a 8 Micrômetros contendo endósporos (resistentes)
- Presente no trato intestinal do homem em menor quantidade que a E. coli
- Pode se originar do solo ou no trato intestinal de animais domésticos (bovino e equino)
- Catalase negativo
- Temorresistentes, podem sobreviver a 80ºC
- Produzem exotoxinas (produzem e liberam, depois de instalado, no sítio infeccioso do
hospedeiro)
- Produzem colagenase

 Clostridium perfringens (gangrena, necrose)

- Produzem a toxina alfa que destrói as células adjacentes do tecido infectado causando a
gangrena gasosa
- Enterotoxinas responsáveis pela infecção alimentar em adultos (gado bovino, equino)
  Clostridium tetani
- Neurotoxina (exotoxina- tetanospasmina)

- 130 microgramas pode levar uma adulto a morte

- Atua no SNC inibindo o relaxamento muscular e causando a paralisia rígida

 Clostridium botulinum
- Produz a neurotoxina (toxina botulínica) que é a substância natural mais tóxica conhecida e
atua no SNPeriférico, especificamente, na junção neuromuscular, interrompendo a liberação
de acetilcolina causando a paralisia flácida (redução do tônus muscular).
- Enterotoxinas responsáveis pela infecção alimentar em

 BOLORES E LEVEDURAS

 Candida albicans (PATÓGENO OPORTUNISTA)

- Fungo unicelular não-filamentoso de células esféricas ou ovaladas
- Reproduz por brotamento formando pseudo-hifas
- Adere ao epitélio
- Meio de cultura: Ágar sabarô dextrose

 MICOTOXINAS
- Metabólitos secundários da biossíntese de fungos
- elevada toxicidade em pequenas quantidades
- Associados à fungos toxigênicos do gêneros Aspergillus, Fusarium e Penicillium
- Presença de contaminação por longos períodos de estocagem alimentar produz micotoxinas
(ex.: grãos de amendoim)
- Vias que levam à contaminação: ingestão, via dérmica e via inalatória
- a exposição pode produzir efeitos teratogênicos, mutagênicos, carcinogênicos e
imunossupressores

 MICOPLASMAS
- Menores MO Considerados parasitas com capacidade de autorreplicação
- São bactérias sem parede celular
- não se coram por gram
- formas e tamanhos variados de 0,2 a 0,3 micrômetros
- Grande concetranção de lipídios que fortalecem a membrana citoplasmática
- O citoplasma exerce e mantém a mesma pressão osmótica do ambiente externo bombeando
Na+ para fora da célula
- Patogênico
- No homem, colonizam o revestimento epitelial das paredes do trato respiratório e urogenital
- Mycoplasma pneumoniae (pneumonia atípica primária)
- Ureaplasma urealyticum
- Contaminantes frequentes em culturas de células e tecidos
- Sua presença não produz turvação nos meios de cultura nem alterações celulares visíveis
- Penicilina e estreptomicinas são adicionadas aos meios de cultura para evitar o seu
crescimento