RELATÓRIO DE PRÁTICA

Aluna: Patrícia Barros Nicodemos de Castro

Matrícula: 04136020
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RELATÓRIO DE AULAS PRATICAS: Bioquimica Humana

DADOS DO(A) ALUNO(A):

NOME:Patrícia Barros Nicodemos de Castro MATRÍCULA: 04136020

CURSO: Nutrição PÓLO: UNAMA – BR ( Ananindeua /PA)
PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): Claudeir Dias da Silva Junior

ATIVIDADE CATALÍTICA DA AMILASE SALIVAR

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.

Resposta: As glândulas salivares exibem dois tipos de secreção proteica: serosa e

mucosa. A primeira corresponde à secreção de várias enzimas, como a amilase salivar,
também frequentemente designada por a-amilase ou ptialina, lípase, fosfatases ácidas
e alcalinas e anidrase carbónica. A amilase salivar é uma enzima que atua provocando
a hidrólise do amido, um polissacarídeo muito abundante na alimentação, estando
presente, sobretudo, em alimentos de origem vegetal, nos quais constitui a principal
substância de armazenamento. Os materiais utilizados para o procedimento foram:
Pêra de borracha; Pisseta com água destilada; 6 tubos de ensaio; Pipeta de vidro
de 5ml; Estante para os tubos de ensaio; Cronômetro; Erlenmeyer; Proveta; Balão
volumétrico de 100ml; Banho-maria; Banho de gelo; Béquer; Papel Toalha; Solução
de amido a 1% e Solução de HCl 1:2.

2. Responda as Perguntas:

a) Qual a composição bioquímica do amido?

Resposta: O amido é um polissacarídeo encontrado em grande quantidade

na natureza e é formado por cadeias de amilose e/ou amilopectina. A amilose é
formada por unidades de glicose unidas por ligações glicosídicas α-1,4, e a
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amilopectina é formada por unidades de glicose unidas por ligações glicosídicas α-1,4
e α-1,6. Assim sendo, podemos dizer, de maneira resumida, que o amido nada mais é
do que uma molécula complexa formada por várias moléculas de glicose.

b) Qual o objetivo do uso de HCl, aquecimento e resfriamento no procedimento da

hidrólise química do amido?

Resposta: Reduzir o pH da solução, isto é, torná-la ácida. Um ótimo exemplo

de ação desse composto químico ocorre justamente no corpo humano, durante um
processo do sistema digestivo. Além dessa função, esse ácido também serve para
catalisar (acelerar reações químicas) reações orgânicas de pH baixo.

c) Descreva a sequência de transformações operadas pela amilase na molécula da

amilose.

Resposta: O iodo reage com as moléculas de amido e quando ele interage

com as cadeias de amilose produz uma cor azul devido a sua estrutura helicoidal.
Hidrólise nas ligações glicosídicas (α1 → 4) da amilose, resultando em Maltose, glicose
e amilopectina.

d) Explique os resultados obtidos durante o ensaio bioquímico.

Resposta: Tubo AE1; não houve hidrólise, Tubo AE2; não houve degradação
do amido e Tubo AE3; não houve degradação.
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REAÇÃO DE SELIWANOFF (REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE ALDOSES E

CETOSES)

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.

Resposta: Essa prática segue os mesmos princípios teóricos que embasam a

reação de Molisch, onde há formação de furfural e hidroximetilfurfural (HMF). Como
vimos, esses dois produtos, isoladamente, são incolores. Assim, adiciona-se um
composto fenólico ao meio para que seja desenvolvida coloração visível (nesse
caso, vermelha). A reação de Seliwanoff só se diferencia da reação de Molisch nos
reagentes utilizados: o ácido que causará a desidratação do carboidrato é o ácido
clorídrico (HCl) e o fenol que reage como o furfural e HMF é o resorcinol. Esse teste
permite diferenciar aldoses e cetoses porque a reação com a cetose é mais rápida e
mais intensa. Isso porque a formação do furfural é mais fácil que a formação do
hidroximetilfurfural. Os materiais utilizados foram: Solução 0,1M de frutose; Solução
0,1M de glicose; Água destilada; 3 Tubos de ensaio; Conta-gotas; Pipeta de 5 mL;
Becker; Banho-Maria e Reagente de Seliwanoff.

2. Responda as Perguntas:

a) Qual o princípio da técnica de Seliwanoff?

Resposta: Essa prática segue os mesmos princípios teóricos que embasam a

reação de Molisch, onde há formação de furfural e hidroximetilfurfural (HMF). Como
vimos, esses dois produtos, isoladamente, são incolores. Assim, adiciona-se um
composto fenólico ao meio para que seja desenvolvida coloração visível (nesse
caso, vermelha). A reação de Seliwanoff só se diferencia da reação de Molisch nos
reagentes utilizados: o ácido que causará a desidratação do carboidrato é o ácido
clorídrico (HCl) e o fenol que reage como o furfural e HMF é o resorcinol. Esse teste
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permite diferenciar aldoses e cetoses porque a reação com a cetose é mais rápida e
mais intensa. Isso porque a formação do furfural é mais fácil que a formação do
hidroximetilfurfural.

b) Qual o objetivo de utilizar um tubo apenas com água destilada.

Resposta: A água destilada deve ser utilizada no laboratório para deixar as

vidrarias completamente limpas, pois a água destilada é pura, então vai evitar que
as análises sofram algum tipo de interferência. ela proporciona menos interrupções
por conta de outras substâncias presentes na água, ou seja, foi usada como controle
negativo

c) Porque é necessário aplicar fervura e ácido clorídrico (HCl) durante o teste de

Seliwanoff?

Resposta: A função do HCL no teste de Seliwanoff é a de desidratar os

carboidratos ali presentes, e para que esse processo ocorra é preciso que haja
energia no meio e consequentemente essa energia vem da fervura. Ao desidratar os
carboidratos, o HCL forma furfurais e assume a coloração vermelha.

d) Explique os resultados obtidos durante o ensaio bioquímico quanto a presença de

aldose e cetoses.

Resposta: No tubo da glicose, não teve nenhuma alteração; no tubo da

frutose, houve mudança para vermelha e tubo da água, não houve nenhuma
alteração.
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PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.

Resposta: Este procedimento é realizado para verificar a influência de sais de

metais pesados e de ácidos fortes sobre a solubilidade da proteína, bem como a
influência do pH sobre a carga líquida da molécula polipeptídica. Os materiais utilizados
são: Ácido tricloroacético a 20%, Acetato de chumbo 10%, Ovoalbumina 10%, 2 tubos
de ensaio, Pipeta e Pera de borracha.

2. Responda as Perguntas:

a) Por que a ovoalbumina precipita na presença de ácidos fortes e metais pesados?

Resposta: No Tubo de ácido forte a precipitação foi imediata, foi teve

formação de um líquido leitoso, indicando a precipitação e a formação de alguns
aglomerados de proteínas. Enquanto no Tubo de metal pesado: houve precipitação
menos intensa do que no ácido forte.

b) Explique por que a ovoalbumina torna-se insolúvel após a precipitação.

Resposta: Alguns elementos conseguem privar e quebrar as estruturas da

proteína fazendo o processo de precipitação como o álcool e o calor, causando
assim a desnaturação das proteínas.

c) Explique os resultados encontrados no experimento.

Resposta: Em PH situado do lado alcalino do seu ponto isoelétrico, algumas

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proteínas combinam-se com cátions de metais pesados formando proteinatos

insolúveis. Os sais de metais pesados reagem com seu cátion com o ânion da
proteína (COO-) formando proteinatos, no caso de mercúrio de prata e de cobre,
estes proteinatos são insolúveis e por isso precipitam. Os ácidos fortes desnaturam
(precipitam) as proteínas, transformando-as em meta proteínas que são solúveis.

PRECIPITAÇÃO FRACIONADA POR SOLUÇÕES SALINAS CONCENTRADAS

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.

Resposta: Esse processo é importante para a separação das proteínas,

levando em conta que a concentração de sal necessária para a precipitação é
diferente para cada proteína. Os materiais utilizados no procedimento são:
Ovoalbumina a 10%; Solução de sulfato de amônia concentrada; Água destilada; 2
tubos; Pipeta de vidro e Pera de borracha.

2. Responda as Perguntas:

a) Explique os conceitos de “Salting out”, “Salting in” e camada de solvatação?

Resposta: salting-out: é um processo pelo qual substâncias solúveis em

água são excluídas da fase aquosa pela adição de sais; salting in: refere-se ao efeito
em que o aumento da força iônica de uma solução aumenta a solubilidade de um
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soluto, como uma proteína. Este efeito tende a ser observado em forças iônicas mais
baixas; Camada de solvatação: Entende-se pelo fenômeno que ocorre quando um
composto iônico ou polar se dissolve em uma substância polar, sem formar uma nova
substância. As moléculas do soluto são rodeadas pelo solvente. A solvatação acontece
tanto em soluções iônicas quanto moleculares.

b) Qual o princípio bioquímico do experimento?

Resposta: Quando adicionamos sais neutros a uma solução, ocorre um

aumento da força iônica (aumento da concentração de íons) do sistema. Assim, quando
adicionamos pequenas quantidades de sal a uma solução contendo proteínas, as
cargas provenientes da dissociação do sal passam a interagir com as moléculas
proteicas, diminuindo a interação entre elas.

c) Explique os resultados encontrados durante o experimento.

Resposta: No tubo B onde foi colocada a água destilada não conseguimos

perceber a formação desse precipitado. Enquanto no tubo A vemos a presença de um
precipitado esbranquiçado que demonstra a precipitação das proteínas da ovoalbumina
(proteína do ovo) em concentração salina com o sulfato de amônio.
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REAÇÃO DE BENEDICT (IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES)

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.

Resposta: O Reagente de Benedict é uma solução de sulfato de cobre,

carbonato de sódio e citrato de sódio em água. É usado para detectar a presença de
certos tipos de carboidratos conhecidos como açúcares redutores. Estas
substâncias podem ser submetidas a reações químicas em que se dão electrões
para outros compostos, o que resulta na produção de novas substâncias, e eles
reagem desta maneira com reagente de Benedict para produzir um composto
insolúvel, de cor avermelhada. A glicose e a frutose produzem uma reação positiva,
mas a sacarose (açúcar de mesa) não. O reagente é usado no teste de alimentos e
para detectar a glicose na urina, que pode ser um sinal de diabetes. Os materiais
utilizados no experimento são: Pipetas de vidro 5ml; Pipeta de vidro 5mL; Tubo de
ensaio; estante para tubos de ensaio; Pêra de borracha; Papel toalha; Descarte para
pipetas; Frasco com água destilada; reagente de Benedict; Solução de sacarose 1%;
Solução de glicose 1% e Banho-maria.

2. Responda as Perguntas:

a) Explique o princípio da técnica bioquímica do experimento.

Resposta: É uma solução de sulfato de cobre, carbonato de sódio e citrato de

sódio em água

b) Qual o conceito de “açúcares redutores”?

Resposta: Açúcar que, em solução básica, apresenta um grupo carbonílico

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livre aldeído. Sua capacidade de redução se dá pela presença de um grupo aldeído

ou cetona livre. Todo monossacarídeo, alguns dissacarídeos e oligossacarídeos.

c) Explique os resultados encontrados no experimento.

Resposta: A água que foi o controle negativo após o aquecimento, como

esperado, não teve nenhuma reação, uma vez que a água não é um açúcar redutor,
percebemos que a cor que está no tubo é do reativo de Benedict, portanto não
houve mudança de cor na sacarose, após o aquecimento, percebe-se que não
houve redução e nem reação entre os íons, a sacarose não é um carboidrato
redutor, não tem a hidroxila (carbonila que faz a reação com os íons cúpricos). Na
glicose após o banho maria de 5 minutos houve uma modificação para a cor
esverdeada indicando a redução dos íons (reação do cobre) neste caso não á
formação do óxido cuproso mas, percebemos uma diferença entre a sacarose e a
glicose ou seja, a glicose é um agente redutor.

d) Explique como o experimento pode ser aplicado nas atividades na área clínica.

Resposta: Uso do Reagente de Benedict para monitorar Diabetes - reagente

de Benedict também reage com açúcares redutores, ou seja, açúcares que reagem
positivamente com o reagente de Benedict, ou seja, reagem com o reagente de
Benedict, por isso podem ser chamados de açúcares redutores; pois durante a
oxidação reduzem a quantidade de açúcar presente no reagente. Cu2+.
Curiosamente, a frutose e muitas outras cetoses também podem reduzir os
açúcares, embora as cetonas não sejam oxidadas pelo reagente de Benedict. O que
acontece com essas cetoses é que elas se reorganizam em aldoses na presença da
solução teste básica de Benedict. Por exemplo, a D-frutose é convertida em
D-glicose ou D-manose, cada uma das quais reduz o açúcar. Essa capacidade de
detectar aldoses (monossacarídeos) torna o reagente de Benedict muito útil para
monitorar o diabetes, detectando a presença de glicose na urina. O teste é de
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natureza qualitativa, ou seja, é usado apenas para verificar a presença de açúcares

redutores para determinar a quantidade. No entanto, ele pode ser usado como um
teste quantitativo bruto, na medida em que uma cor esverdeada indica apenas um
pouco de açúcar redutor; amarelo, um pouco mais; e vermelho, muito.

REAÇÃO DE BIURETO

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.

Resposta: As proteínas são biomoléculas importantíssimas para a

configuração do nosso corpo. Fazem parte da formação das membranas celulares,
podem função enzimática, estrutural e para que seja possível caracterizar o tipo de
proteína que se tem interesse na reação de Biureto, um reagente que ao se ligar
com os peptídeos das proteínas resultando na cor violácea. Os equipamentos
utilizados são: Pipetas, pêra de borracha, tubos de ensaio e estantes para tubos.
Soluções: ovoalbumina 10%, reagentes Biureto, água destilada. Procedimento
experimental ,um tubo de ensaio com 1ml de água destilada serviu como controle e
em outro tubo foram adicionados ovoalbumina 10% e biureto (não foi explicada a
quantidade, mas acredita-se que foi 1ml de cada).

2. Responda as Perguntas:

a) Explique o princípio bioquímico da reação de Biureto.

Resposta: A reação do biureto é resultado da formação de um complexo

entre Cu +2 e as proteínas ou peptídeos com mais de dois aminoácidos. As ligações
peptídicas são ligações amida, e o par de elétrons dos átomos de nitrogênio das
amidas encontram-se disponíveis, podendo o princípio do biureto reativo é a
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identificação de compostos de proteínas, porque as ligações presentes na molécula

de biureto são semelhantes as ligações peptídicas na formação de proteínas. A
reação é qualitativa e depende da complexidade A da proteína ou peptídeo em
questão. A cor do produto A, reação (presença de biureto) varia muito. Proteína,
geralmente produz uma cor roxa e o peptídeo produz uma cor rosa. A reação
também será quantitativa em termos de quantidade, quanto maior a quantidade de
proteína no meio, maior será a intensidade da cor.

b) Qual o tipo de ligação que ocorre entre o Biureto e as moléculas identificadas?

Resposta: O reagente biureto é uma solução de sulfato de cobre (CuSO 4) e

bitartarato de sódio e potássio (KNaC4H4O6) são formados quando reagem com íons
de cobre, produto violeta. A reação do biureto é positiva para proteína (peptídeo com
três ou mais resíduos de aminoácidos). A reação também é muito positiva para aqueles
que contêm dois grupos carbonil diretamente conectados (-CONH2) ou através de um
único átomo carbono ou nitrogênio.

c) Explique os resultados encontrados no experimento.

Resposta: No tubo A (ovalbumina), o teste foi positivo. Houve uma coloração

violeta, confirmando a presença de proteína. No tubo de controle experimental B
(água destilada), o resultado foi negativo, conforme o esperado.
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REAÇÃO DO LUGOL (IDENTIFICAÇÃO DE POLISSACARÍDEOS)

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.

Resposta: Os polissacarídeos são sacarídeos que são compostas

macromoléculas, temos na classificação dos carboidratos que são chamados de
açúcares, os manômetros, os monossacarídeos, dissacarídeos e o polissacarídeos,
dentre os polissacarídeos mais comuns que encontramos na natureza e
principalmente de âmbito vegetal, temos o amido. O amido faz parte da nossa
alimentação onde encontramos ele em diversos alimentos. Os materiais utilizados
são: 2 Pipeta de vidro de 1ml 2 Tubos de ensaio Solução Lugol 2% Solução de
amido 1% Pêra de borracha Pipeta Pasteur Água destilada.

2. Responda as Perguntas:

a) Explique o princípio bioquímico da utilização do lugol na identificação de

polissacarídeos.

Resposta: O lugol é uma solução de iodo que ele reage com as ligações da
amilopectina e da amilose dentro dos carboidratos do polissacarídeo.

b) Explique para quais situações essa técnica pode ser utilizada.

Resposta: O teste de Schiller é um exame de diagnóstico que consiste na

aplicação de uma solução com iodo, o Lugol, na região interna da vagina e no colo
do útero e tem como objetivo verificar a integridade das células dessa região.

c) Explique os resultados encontrados no experimento.

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Resposta: A primeira amostra houve alteração de cor, ficou azulada,

esverdeada, indica a presença do amido. Na segunda amostra não houve alteração
de cor, o que indica a ausência do amido.

REAÇÃO DE SAPONIFICAÇÃO

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.

Resposta: A saponificação nada mais é do que uma reação que cria um sal
orgânico e um álcool por meio de um éster de base inorgânica em uma solução
aquosa. Em outras palavras, a mistura do éster, uma substância resultante da
reação entre um álcool e um ácido, com uma base resulta em um sal orgânico,
também chamado de sabão. Os materiais utilizados foram: 4 Pipetas de vidro de 5
ml, 2 Pipetas de vidro de 1ml, 3 Tubos de ensaio, Solução de hidróxido de potássio
10%, Solução de Cloreto de Cálcio, Óleo de soja, Pera de borracha e Banho maria

2. Responda as Perguntas:

a) Explique bioquimicamente o que são ácidos graxos e triglicerídeos.

Resposta: Os triacilgliceróis recebem esse nome porque são originados da

reação entre uma molécula de glicerol (um triálcool) e três moléculas de ácidos
graxos (AG). Essa Associação dá-se através de uma reação de esterificação.
Portanto, os triacilgliceróis são esteres de ácidos graxos.

b) Explique a fundamentação teórica da técnica de saponificação.

Resposta: A reação de saponificação ocorre quando um éster em solução
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aquosa de base orgânica origina um sal orgânico e álcool. A Reação de

saponificação também é conhecida como hidrólise alcalina, através dela é que se
torna possível o feitio do sabão.

c) Explique os resultados encontrados no experimento.

Resposta: No tubo 1, misturamos óleo com solução de potassa alcoólica
aquecemos no banho-maria a 100ºc durante cinco minutos. Ao retirar, agitamos e
percebemos a presença de espuma. No tubo 2, colocamos água destilada e a
solução de sabão e agitamos. Notamos a formação de precipitado.

SOLUBILIDADE DOS LIPÍDIOS

1. Descreva os procedimentos realizados durante a aula, explicando as etapas e quais

materiais utilizados.

Resposta: Os lipídeos são uma biomolécula muito importante. Temos várias

categorias como os ácidos graxos, e temos os triglicerídeos, os fósforo lipídeos,
todos eles fazendo parte de alguma função do nosso corpo. São muito importantes e
por isso precisamos conhecer mais dessa biomolécula. Ela tem uma característica
bem peculiar onde ela tem uma hidrofobia, ela não é solúvel em água, conseguimos
perceber bem visualmente quando há uma separação entre o óleo e a água. Nessa
prática de hoje vamos fazer a solubilidade de lipídeos. Os materiais utilizados foram:
5 Pipetas de vidro de 5ml, 5 Tubos de ensaio, Óleo de cozinha, Acido Clorídrico,
Hidróxido de Sodio 0,1N, Álcool etílico, Éter etílico, Pera de borracha e Água
destilada.

2. Responda as Perguntas:

a) Explique a estrutura bioquímica dos lipídios correlacionado com sua característica de

insolubilidade em soluções aquosas.
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Resposta: Os lipídios apresentam em comum na sua composição serem

compostos por carbono, hidrogênio e oxigênio. Mas podem conter nitrogênio, fósforo
e enxofre. Os mais simples são os triglicerídeos, ou triacilgliceróis, que são
compostos por três ácidos graxos, unidos com ligações éster ao glicerol.

b) Explique a fundamentação teórica da técnica de solubilidade dos lipídios.

Resposta: Sabendo que os lipídios são moléculas apolares e conhecendo o

princípio da solubilidade que "semelhante dissolve semelhante", certamente as
amostras que contêm lipídios formarão soluções de apenas uma fase com as
substâncias apolares, e com as substâncias polares formam soluções onde
observamos mais de uma fase

c) Explique os resultados encontrados no experimento.

Resposta: Notamos que no tubo 1, onde colocamos água destilada, as

substâncias não se misturam. No tubo 2, colocamos ácido clorídrico 0,1N, que não
se mistura também. No tubo 3, colocamos hidróxido de sódio 0,1N, formou-se
sabão. No tubo 4, colocamos etanol e as outras substâncias e houve mistura. No
tubo 5, colocamos éter etílico com as outras substâncias e dissolveu totalmente.
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Referências de pesquisa:
1. https://pt.wikipedia.org/wiki/Amido. Acessado em 02 de setembro das 2023 às
17:00 h
2. https://www.fciencias.com/2016/10/20/teste-seliwanoff-laboratorio online.
Acessado em 02 de setembro de 2023 às 18:15 h
3. http://plone.ufpb.br/ldb/contents/paginas/
precipitacao-de-proteinas-por-adição-de-sais-neutros-efeito-da-força-iônica
acessado e 02 de setembro de 2023 às 20:00 h.
4. https://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_proteinas/precipitaca
o_proteinas.htm acessado em 04 de setembro de 2023 a s 20:00 hs.
5. https://pt.wikipedia.org/wiki/ Reagente_de_Benedict Acessado em 04 de
setembro de agosto das 2023 às 21:00 hs
6. https://www.portalsaofrancisco.com.br/quimica/ reagente -de-Benedict
Acessado em 07 de setembro das 2023 às 17:20 hs
7. https://pt.wikipedia.org/wiki/Reagente_de_Benedict acessado em 07 de
setembro de 2023 às 19:00 hs.
8. https://www.portalsaofrancisco.com.br/quimica/reagente -de-benedict
acessado em 08 de setembro de 2023 às 20:00 hs.