MINISTRIO DA EDUCAO UNIVERSIDADE FEDERAL DOS VALES DO JEQUITINHONHA E MUCURI INSTITUTO DE CINCIA E TECNOLOGIA - ICT BACHARELADO EM CINCIA E TECNOLOGIA

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ENZIMAS: ESPECIFICIDADE, TERMOLABILIDADE E CINTICA

Discentes: Marcelo Henrique Costa Santos Marco Tlio P. Silveira Docente: Prof. Dr. Ernani Amaral Disciplina: CTD131 !ioqu"mica

DIAMANTINA & MINAS GERAIS

INTRODUO'

OBJETIVOS' #$servar a especifici%a%e en&im'tica pelo su$strato( a termola$ili%a%e %as en&imas e verificar o comportamento cin)tico %a a*+o %a amilase salivar na cat'lise %a ,i%r-lise %o ami%o. REAGENTES E MATERIAIS' Solu*+o %e sacarose a 3 ./ Solu*+o %e sacarase a 3 ./ 0ea.ente %e !ene%ict Solu*+o %e ami%o a 1 ./ Saliva 1u.ol (ARTE E)(ERIMENTAL' * - E+,"-.f.-.#/#" "01.!23.-/' a2 1avar $em a $oca com '.ua e coletar cerca %e 3 m1 %e saliva 4 amilase salivar2.

$2 Colocar em 5 tu$os %e ensaio numera%os os se.uintes volumes %e en&ima e rea.ente: Tu$o 1: 6(7 m1 %e sacarase 3/ 8 6(7 m1 %e sacarose 3/ Tu$o 6: 6(7 m1 %e sacarase 3/ 8 6(7 m1 %e ami%o 1/ Tu$o 3: 6(7 m1 %e saliva 8 6(7 m1 %e sacarose 3/ Tu$o 5: 6(7 m1 %e saliva 8 6(7 m1 %e ami%o 1/ Dei9ar : temperatura am$iente por 67 minutos. c2 A%icionar( em se.ui%a( a ca%a um %os tu$os 6(7 m1 %o 0ea.ente %e !ene%ict. Aquec; los em $an,o maria at) a e$uli*+o. %2#$servar em quais tu$os ,ouve ativi%a%e en&im'tica. 4 -T"%!56/$.6.#/#"'

Sacarose

<licose

=rutose

a2 Colocar em 6 tu$os %e ensaio numera%os os se.uintes volumes %e en&ima e rea.entes: Tu$o 1: 6(7 m1 %e sacarase 3/ 8 6(7 m1 %e '.ua %estila%a> ferver %iretamente na c,ama e resfriar so$ '.ua corrente. Tu$o 6: 6(7 m1 %e sacarase 3/ 8 6(7 m1 %e '.ua %estila%a. $2 A%icionar aos tu$os 6(7 m1 %e sacarose 3/. c2 ?ncu$ar os %ois tu$os em $an,o maria a 3@AC( por 17 minutos. %2 A%icionar aos %ois tu$os 6 m1 %o 0ea.ente %e !ene%ict. Aquec; los at) e$uli*+o 4$an,o maria2. e2 #$servar em quais tu$os ,ouve ativi%a%e en&im'tica.

7 - A3.v.#/#" "01.!23.-/' a2 Enumere %uas $aterias %e oito tu$os %e ensaio 4%e 7 a @2. $2 A%icione 57 m1 %e solu*+o %e ami%o a 1 / a um erlenmeBer %e 16C m1. 1eve o ao $an,o maria a 3@ AC. c2 Ap-s cinco minutos( acrescente 1(7 m1 %e saliva filtra%a em .a&e( ao frasco erlenmeBer. Homo.ene"&e. Anote o tempo e retire %uas amostras %e 6(7 m1 4tempo &ero2( uma para ca%a tu$o 7( e a%icione %uas .otas %e lu.ol ao tu$o &ero %a primeira e 6 m1 %o reativo %e !ene%ict ao tu$o &ero %a se.un%a $ateria. DE# 0ET?0E # =0ASC# D# !ADH#FF %2 A ca%a tr;s minutos( retire amostras %e 6(7 m1 %o erlenmeBer( transferin%o as aos tu$os seqGencialmente numera%os e proce%a com a a%i*+o %os reativos conforme reali&a%o para o tu$o &ero 472. #$serve os resulta%os e e9plique o que aconteceu.

RESULTADOS E DISCUSS8ES' Com a reali&a*+o %o proce%imento 1 o$servou se resulta%os %istintos nos tu$os %e ensaios( como espera%o. # 0ea.ente %e !ene%ict ) usa%o para %etectar a presen*a %e a*cares re%utores e sua presen*a proporcionou a o$serva*+o %e ativi%a%e en&im'tica nos tu$os 1 e 5. Do tu$o 1( composto por sacarase e sacarose( notou se uma mu%an*a %e colora*+o. Sacarase que$rou sacarose( sen%o li$era%a .licose que rea.iu com o rea.ente %e !ene%ict( fa&en%o com que a solu*+o a&ul ficasse alaranHa%a. Do tu$o 6 n+o foi nota%o altera*Ies e isso aconteceu porque sacarase n+o que$ra ami%o( lo.o n+o ,' ativi%a%e en&im'tica. Como no tu$o 6( no tu$o 3 tam$)m n+o ,ouve li$era*+o %e a*car re%utor. Do tu$o 5 ,ouve ativi%a%e en&im'tica( pois amilase que$ra ami%o( li$eran%o .licose( um a*car re%utor( que rea.e com o 0ea.ente %e !ene%ict. Do proce%imento 6 foi coloca%o inicialmente sacarase e '.ua %estila%a em %ois tu$os %e ensaio( por)m o primeiro foi fervi%o %iretamente na c,ama e resfria%o so$ '.ua corrente( fa&en%o com que fosse o$serva%o %iferentes resulta%os no fim %o teste. Ap-s a a%i*+o %e sacarose e 0ea.ente %e !ene%ict notou se ativi%a%e en&im'tica apenas no tu$o 6( que mu%ou %e cor( pois ,ouve li$era*+o %e .licose com a que$ra %e sacarose pela sacarase.

Do tu$o 1 n+o foi o$ti%o os mesmos resulta%os %evi%o : %esnatura*+o t)rmica sofri%a pela en&ima. Do proce%imento 3 foram separa%as %uas $aterias %e tu$os %e ensaio( on%e ca%a $ateria possu"a quatros tu$os numera%os %e 1 a 5. Em intervalos i.uais acrescentava se uma %etermina%a quanti%a%e %e amostra %e saliva filtra%a em .a&e e ami%o em ca%a tu$o %e mesmo nmero( e %uas .otas %e lu.ol no tu$o %a primeira $aterias e 6 m1 %o reativo %e !ene%ict no tu$o %a se.un%a $ateria. Ap-s a reali&a*+o %o e9perimento notou se que os tu$os que tin,am o rea.ente %e !ene%ict foram fican%o ca%a ve& mais alaranHa%os com o tempo e os tu$os que tin,am lu.ol foram fican%o ca%a ve& mais claros. # tom ca%a ve& mais alaranHa%o %as solu*Ies com rea.ente %e !ene%ict ) consequ;ncia %o aumento %a quanti%a%e %e a*car re%utor( cau%a%o pela que$ra %e ami%o pela amilase. # tom ca%a ve& mais claro %as solu*Ies com lu.ol ) consequ;ncia %a %iminui*+o %a quanti%a%e %e amilose com o tempo.

CONSIDERA8ES FINAIS'