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Crescimento bacteriano

Resumo I - Microbiologia Tortora

Fatores necessrios para o crescimento


OO crescimento de uma populao o aumento do nmero de clulas Tanto os fatores fsicos como os qumicos so necessrios para o crescimento. Fatores fsicos necessrios Os microrganismos so classificados, conforme as preferncias nas variaes na temperatura de crescimento, em psicrfilos (vivem em baixas temperaturas), mesfilos (vivem em temperaturas moderada) e termfilos (vivem em altas temperaturas). A temperatura mnima de crescimento a temperatura mais baixa que permite o crescimento da espcie; a temperatura tima de crescimento aquela em que o organismo melhor se reproduz; a temperatura mxima a maio temperatura em que o crescimento da espcie ainda possvel. A maioria das bactrias cresce melhor entre os valores de pH 6,5 e 7,5. Em soluo hiper-tnica, a maioria dos microrganismos entra em plasmlise. Os organismos haloflicos, no entanto, podem tolerar elevadas concentraes de sais. Fatores qumicos necessrios Todos os organismos necessitam de fonte de carbono. Os organismos qumio-heterotrficos utilizam molculas orgnicas e os auto-trficos usam tipicamente dixido de carbono. O nitrognio necessrio para a sntese de cidos nucleicos e protenas. O nitrognio pode ser obtido pela decomposio de protenas ou da transformao de NH4+ em NO3-. Poucas bactrias realizam a fixao do nitrognio (N2). Os microrganismos so classificados como aerbicos obrigatrios, anaerbicos facultativos, anaerbicos obrigatrios, anaerbicos aerotolerantes e micro-aerfilos em relao s necessidades de oxignio para o crescimento. Os organismos aerbicos, anaerbicos facultativos e anaerbicos aerotolerantes devem conter as enzimas superxido dismutase (2 O2 + 2 H = O2 + H2O2) e catalase (2H2O2 2 H20 + O2) ou peroxidase (H2O2 + 2 H+ = 2 H2O). Outros elementos qumicos necessrios para o crescimento so enxofre, fsforo, oligoelementos, e para alguns microrganismos, fatores orgnicos de crescimento.

Meio de cultura
Um meio de cultura qualquer material preparado em laboratrio para o crescimento de microrganismos. Os microrganismos crescendo em meio de cultura so denominados cultura bacteriana. Agar o agente solidificante utilizado nos meios de cultura. Meio qumico definido

No meio quimicamente definido, a concentrao exata de cada composto qumico conhecida. Meio complexo No meio complexo, a concentrao exata dos compostos qumicos varia de cultura para cultura. Meios e metodologia para o crescimento de anaerbicos A eliminao do oxignio molecular (O2), que pode afetar o crescimento dos organismos anaerbicos, realizada utilizando compostos qumicos como redutores no meio de cultura. As placas de Petri podem ser incubadas em jarras de anaerobiose, em cmaras anaerbicas ou no OxyPlate. Tcnicas especiais de cultivo Algumas bactrias parasitas ou fastidiosas devem ser cultivadas em animais vivos ou em culturas de clulas. Os incubadores de CO2 ou jarras contendo vela so utilizados para o crescimento de bactrias que necessitam de concentraes mais altas de CO2. Meios de cultivo seletivo e diferencial Ao inibir organismos indesejados atravs da adio de sais, corantes ou outros compostos qumicos no meio de cultura, o meio seletivo permite o crescimento somente de um organismo especfico. O meio diferencial utilizado para distinguir diferentes organismos. Meio de enriquecimento Um cultivo de enriquecimento utilizado para favorecer o crescimento de um determinado microrganismo presente em uma cultura mista. Obteno de culturas puras Uma colnia uma massa de clulas bacterianas visveis, originadas, teoricamente, a partir de uma nica clula. As culturas puras normalmente so obtidas atravs do mtodo de semeadura em placa. Preservao de cultura bacterianas As bactrias podem ser conservadas por longos perodos de tempo atravs dos mtodos de congelamento em baixas temperaturas ou liofilizao.

Crescimento de culturas bacterianas


Diviso bacteriana A fisso binria o mtodo normal de reproduo bacteriana, em que uma nica clula se divide dando origem a duas clulas idnticas. Algumas bactrias se reproduzem por brotamento, formao de esporos areos ou por fragmentao. Tempo de gerao O tempo necessrio para uma clula se dividir ou uma populao se duplicar denominado tempo de gerao. Representao logartmica das populaes bacterianas A diviso bacteriana ocorre conforme uma progresso logartmica (2 clulas, 4 clulas, 8 clulas, etc). Fases de crescimento Durante a fase lag, ocorre pouca ou nenhuma variao no nmero de clulas, no entanto existe muita atividade metablica. Durante a fase log, a bactria se multiplica em alta velocidade considerando as condies fornecidas pelo meio. Durante a fase estacionria, existe um equilbrio entre a diviso celular e a morte. Durante a fase de morte celular, existe um nmero maior de clulas mortas em relao s novas clulas formadas. Mtodos para quantificar diretamente o crescimento bacteriano O mtodo-padro de contagem em placa determina o nmero de clulas viveis assumindo que cada clula bacteriana se desenvolver em uma nica colnia; as contagens em placa so consideradas como nmero de unidades formadoras de colnias (UFC). O mtodo de contagem em placa pode ser realizado atravs da tcnica de pour plate ou da tcnica de espalhamento em placa. No mtodo de filtrao, a bactria fica retida na membrana de filtrao sendo, ento, transferida para o meio de cultura para possibilitar seu crescimento e contagem. O mtodo do nmero mais provvel (MNP) utilizado para microrganismos que crescem em meio lquido. Esse mtodo utiliza a estatstica para estimar o nmero de bactrias. O mtodo de contagem direta no microscpio utiliza uma lmina especialmente adaptada, onde ser determinado o nmero de clulas em um volume conhecido de uma suspenso bacteriana. Mtodos indiretos para determinao do nmero de clulas O espectofotmetro utilizado na determinao de turbidez, estimando a quantidade de luz que atravessa uma suspenso de clulas. Uma maneira indireta de se determinar o nmero de clulas atravs da sua atividade metablica (por exemplo determinando-se a produo de cido ou consumo de oxignio). Para organismos filamentosos como fungos a determinao do peso seco um mtodo

utilizado na estimativa de seu crescimento.