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15/08/2022

Centro Universitário Estácio Recife


Disciplina: Biologia Molecular

Como o material gené.co


se duplica?

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MECANISMO
DE
DUPLICAÇÃO

SEMICONSERVATIVO
• Cada fita da molécula de
DNA origina uma nova
fita
• Cada fita da molécula de
DNA funciona como um MECANISMO DE
DUPLICAÇÃO
molde

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ENZIMAS

• DNA helicase
• Proteínas de ligação de fita simples
(SSB)
• RNA primase
• DNA polimerases (I e III)
• DNA ligase
• DNA Topoisomerase
• DNA Telomerase

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PROTEÍNAS DE LIGAÇÃO DE FITA SIMPLES


(SSB)

Se ligam às regiões de fita simples para protegê-las da


degradação (hidrólise) por enzimas (nucleases)

• Quebra as pontes de hidrogênio


entre as bases complementares
DNA HELICASE separando as duas fitas da
molécula de DNA

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RNA PRIMASE

Sinte=za o fragmento iniciador para que em seguida a


DNA polimerase con=nue a síntese

• Adicionam nucleo7deos ao filamento em crescimento na


extremidade 3’ OH
• Não são capazes iniciar a síntese, necessitam de um pequeno
DNA filamento de nucleo7deos, um iniciador
POLIMERASES • Necessitam dos quatro desoxirribonucleo7deos trifosfato
(dTTP, dATP, dGTP e dCTP)
• Dependem de Mg 2+

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DNA
POLIMERASE III
• Complexo enzimáLco com
10 subunidades
responsável pela
polimerização no senLdo
5’→3’ da fita de DNA
recém-formada.

• Esta holoenzima apresenta


ainda a aLvidade 3’→5’
exonucleásica que permite
que nucleo7deos
incorretos adicionados
sejam prontamente
removidos, um por vez,
durante a duplicação e
subsLtuídos por
nucleo7deos corretos,
mecanismo de revisão e
reparo

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DNA
POLIMERASE
DNA III
POLIMERASE
III
• Polimerização no
senLdo 5’ →3’

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DNA
DNA POLIMERASE
POLIMERASE I
III REPARO DE DNA DANIFICADO
• ALvidades 3’→5’ e 5’→3’
exonucleásica

A-vidade 3’→5’
exonucleásica

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REPARO DE DNA DANIFICADO


DNA • A9vidades
POLIMERASE – polimerase 5’→3’
– exonuclease 3’→5’
I – exonuclease 5’→3’, permite que vários
nucleoCdeos sejam removidos de cada vez

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DUPLICAÇÃO DO DNA
• Fita líder → replicada de forma conFnua na direção 5’→3’
• Fita retardatária → replicada de forma desconFnua e no
sen-do inverso para manter a mesma direção 5’→3’
• A fita desconFnua é replicada através de fragmentos de
Okasaki

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FORQUILHA DE DUPLICAÇÃO

FRAGMENTOS
DE OKASAKI

• 1000 a 2000 nucleotídeos


• DNA recém sintetizado
• RNA iniciador que será substituído por
desoxirribonucleotídeos pela DNA
polimerase I
• DNA ligase reconstituirá a nova fita.

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DUPLICAÇÃO DUPLICAÇÃO
DO DNA DO DNA

PROCARIONTES (bactérias e algas cianoWceas)


• Um ponto de origem e um ponto de término da
duplicação
EUCARIONTES
• Vários pontos de origem e vários pontos de término da
duplicação

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DUPLICAÇÃO
SIMULTÂNEA
DAS 2 FITAS
DE DNA

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DNA
TOPOISOMERASE I

• Reduz o enovelamento a
frente da forquilha de
duplicação
• Cataliza quebras
transitórias das ligações
fosfodiéster em um dos
filamentos fornecendo
um eixo de rotação que
permite que os
segmentos de DNA em
lados opostos da quebra
girem
independentemente,
com o filamento intacto
servindo como eixo.

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DUPLICAÇÃO DO
DNA

À medida que as novas


moléculas vão sendo sintetizadas
assumem a conformação em α-
hélice. DNA Telomerase

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Vídeo –
DNA Vídeo -
Replica:on Telomerase
3D Function
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ube.com/watch?v ube.com/watch?v
=TNKWgcFPHqw =i6nE6gUp2cw

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Profª. Drª. Samara Rodrigues Bonfim Damasceno Oliveira.


Biomédica
Especialista em Biotecnologia
Doutora e Mestre em Farmacologia
Pós-Doutora em Fisiologia e Farmacologia
samara.damasceno@estacio.br

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