MUTAÇÃO E POLIMORFISMOS

@ariadnebranco_

ARIADNE BRANCO
INTRODUÇÃO

 Alterações do material genético (DNA) que originam novas vers ões

de um gene, definitivas e hereditárias;

 Acúmulo de mutações vantajosas ocorrem pela ação da sele ção

natural, durante os bilhões de anos de evolu ção biológica;

 São fontes primárias da variabilidade dos seres vivos;

 As mutações são feitas ao acaso, não têm qualquer relação com as

necessidades do organismo;

 Ocorrem espontaneamente ou podem ser induzidas por agentes

externos como radiações ionizantes e certas substâncias.
INTRODUÇÃO

CÉLULAS CÉLULAS
GERMINATIVAS SOMÁTICAS

Não hereditário;
Hereditariedade
Câncer.

LAR EVO
E C U LUT
M OL ...OU I VO
Outras maneiras de conceituar MUTAÇÃO:
Alteração do material genético É a fonte de variabilidade genética;
Processo de alteração da sequência de DNA É quem possibilita a adaptação a novos
Alteração na sequência de nucleotídeos ambientes;
É quem gera material para evolução.
CLASSIFICAÇÃO DAS MUTAÇÕES

 Mutações que deixam cromossomos intactos, mas que alteram o

número de cromossomos de uma célula (mutações cromoss ômicas);

 Mutações que mudam apenas uma parte do cromossomo e podem

envolver uma alteração no número de cópias de um segmento
subcromossômico ou um rearranjo estrutural que envolve partes de
um ou mais cromossomos (mutações regionais ou
subcromossômicas);

 Alterações na sequência de DNA que envolvem a substituição,

deleção ou inserção de DNA, variando de um nucleotídeo único at é
um limite definido de modo arbitrário de aproximadamente 100 kb
(mutações gênicas ou de DNA).
CLASSIFICAÇÃO DAS MUTAÇÕES
MUTAÇÕES

GÊNICAS CROMOSSÔMICAS

Substituição Inserção Deleção Numéricas Estrutural

Afetam a sequência de bases do

gene que codifica uma Afetam cromossomos
determinada proteína.
MUTAÇÕES
A maioria das mutações presentes no genoma de uma pessoa é NEUTRA
ou quase neutra (não causam efeitos drásticos sobre o fen ótipo)

Mas, quando ocorrem mutações deletérias ou patogênicas:

Dominantes: quando a presença de um alelo mutado é suficiente

para provocar uma doença;
Recessivas: quando são necessários dois alelos mutados para
provocar uma doença.
MUTAÇÕES GÊNICAS

Originam-se por qualquer um de dois mecanismos

básicos:
1)Erros introduzidos durante a replicação do DNA;
2)Falha no reparo correto do DNA após lesão.

Afetam a leitura durante a replicação ou transcrição.

MUTAÇÕES GÊNICAS

Tipos de Mutações

 Mutações de ponto - substituição de

bases;
 Adições/inserções, Deleções.
MUTAÇÕES GÊNICAS

Tipos de Mutações

SUBSTITUIÇÃO DE BASES
MUTAÇÕES GÊNICAS

Tipos de Mutações

INSERÇÃO/DELEÇÃO
 Mudança na sequência do polipeptídio;

Mudança na matriz de
leitura (frameshift )

Perda completa da estrutura e da

função normal da proteína
MUTAÇÕES GÊNICAS
Tipos de Mutações

INSERÇÃO/DELEÇÃO

Qualquer adição ou deleção de pares de bases que não seja múltiplo de

3 altera a matriz de leitura, resultando em aminoácidos diferentes á
partir do ponto de inserção ou deleção.
Mutações de ponto:
Consequências funcionais

Mutação Silenciosa
- trinca codifica o mesmo aa
AGG → CGG
arginina arginina

Mutação de Sentido trocado (missense)

- o códon original é substituído por um códon para outro
aa AAA → AGA
lisina arginina

Mutação “Sem sentido” (nonsense)

- substituição por um códon de término de tradução (UAA UAG UGA)
CAG → UAG
Glicina stop códon
Frequência e estimativas das taxas de mutações: A taxa de mutação de um
gene é expressa pelo número de novas mutações por locus, por geração.

Bactéria: 1mutação / 108pb  Humano: 1 mutação/109pb

(100.000.000 pb) (1.000.000.000 pb)

Estas frequências relacionam-se à:

 Eficiência do Sistema de Reparo (humanos);
 Exposição à agentes mutagênicos;
 Proporcionalidade do tamanho do gene

Há “HOTSPOTS “– regiões preferenciais de mutação !!!

Efeito de mutações sobre o produto
gênico

 Perda de função
 Ganho de função
 Aquisição de propriedade nova
 Expressão de um gene no momento ou local errado ou ambos

Um ganho pode ser decorrente do

aumento da quantidade da
proteína por alterar a expressão Mutações que alteram as
gênica ou ainda aumento da regiões reguladoras de
capacidade de uma proteína de genes.
realizar uma função normal. Ex.
Hemoglobina
COMO ACONTECEM?

Espontânea: decorrentes do funcionamento celular

normal, na ausência de reparo.

Induzida: exposição do organismo à agentes

mutagênicos, que podem ser:
✓ (1) físicos, como radiação;
✓ (2) químicos, como substâncias tóxicas;
✓ (3) biológicos, como vírus.
Mecanismos que dão origem
as mutações
ESPONTÂNEAS (mudanças naturais na estrutura do DNA)
fonte natural da variação genética

INDUZIDAS (fatores externos)

Agentes mutagênicos ou mutágenos:
• Agentes físicos: radiação ionizante, raios ultravioleta;
• Agentes químicos: análogos de bases, agentes intercalantes.

Alteração no DNA:
• Substituição de base;
• Dano de base.
Mutações Espontâneas

Erros durante a replicação do DNA

• Substituição espontânea de bases  transições
(maior parte) e transversões
• Mudanças na matriz de leitura  deleções e
duplicações do material genético

Lesões espontâneas
• depurinação
• desaminação
Mutações Espontâneas

Erros durante a replicação do DNA

• Substituição espontânea de bases  transições

Erro de pareamento de bases resultantes de formas tautoméricas de pirimidinas e purinas.

Mutações Espontâneas
Lesões espontâneas
• Depurinação  erro na replicação do DNA formando sítios
sem a presença de purinas (é o mais frequente).
• Desaminação  alterações nas bases do DNA por substituir
um grupamento amina (- NH2) por uma hidroxila (-OH).
INDUZIDAS (fatores externos)
Análogos de Bases

Compostos parecidos com bases nitrogenadas normais que são

incorporados ao DNA  causam SUBSTITUIÇÃO DE BASES,
inserção de nucleotídeos incorretos durante a replicação
INDUZIDAS (fatores externos)
Agentes Intercalantes
Intercalam entre as bases nitrogenadas na dupla hélice DNA
 podem causar inserção ou deleções de nucleotídeos.
INDUZIDAS (fatores externos)
Luz UV
Danifica uma ou mais bases ⇒ torna o pareamento específico impossível.

Bactérias  dímeros podem ser reparados graças à

presença de uma enzima de reparo chamada fotólise.
Prova: FGV - 2011 - PC-RJ - Perito Legista - Genética Forense

Uma mutação silenciosa pode ser definida como:

A aquela que, embora presente no genoma, somente se manifesta mais

tardiamente, em geral nos indivíduos idosos.
B aquela que somente afeta genes que normalmente estão reprimidos,
isto é, que não se expressam.
C aquela que se encontra na parte não codificante do genoma e que,
portanto, não tem efeito sobre o fenótipo.
D aquela que está presente somente no genoma das células somáticas e
que, portanto, não é herdada.
E aquela presente somente no genoma das estruturas não fetais como,
por exemplo, a placenta.
Prova: UFES - 2016 - UFES - Biólogo
O tipo de lesão ao DNA que a luz ultravioleta causa
com mais frequência é

A dímeros de pirimidina.
B lesão por radicais livres.
C desaminação.
D translocação Robertsoniana.
E depurinação.
Prova: INSTITUTO AOCP - 2019 - PC-ES - Perito Oficial Criminal - Área 5
Existem inúmeras mutações genéticas, as quais podem ser gênicas
ou cromossômicas. Essas mutações podem resultar em patologias
de maior e menor gravidade. Nesse sentido, qual tipo de mutação
está envolvido no surgimento da Anemia Falciforme?

A Mutação estrutural (duplicação de um pedaço repetido do

cromossomo 11).
B Mutação numérica (Aneuploidia do cromossomo 11).
C Mutação gênica (inserção de bases adicionais ao cromossomo 11).
D Mutação estrutural (deleção de parte do cromossomo 11).
E Mutação gênica (substituição de bases no cromossomo 11).
 MUTAÇÃO POLIMORFISMO

• Alteração na sequência de • Diferença na sequência de

nucleotídeos de uma molécula de DNA entre indivíduos, grupos
DNA. ou populações.
• O termo "mutação“ é geralmente • Incluem SNPs, sequências
usado para referir-se a alterações repetitivas, inserções,
na sequência de DNA que não estão deleções e recombinações.
presentes na maioria dos Resultado de processos
indivíduos de uma espécie naturais ou induzidos por
agentes externos (como vírus
ou radiação).
“Qualquer segmento de DNA humano de aproximadamente 1.000 pb de comprimento,
escolhido ao acaso, contém, em média, apenas um par de bases que é diferente entre os
dois cromossomos homólogos herdados dos pais (assumindo que os pais não tenham
parentesco).”

Dezenas de milhões de diferenças de

um único nucleotídeo e mais de um
milhão de variantes mais complexas.

Variedade genética em humanos: Somente 0,1 a 0,5% de

diferenças !!!
POLIMORFISMO GENÉTICO

Definição: Formas alternativas de um mesmo

segmento de DNA. Resultado de uma 1% na população.
mutação (evento).

Novas mutações Pressão do meio

ambiente

Pool genético Frequências Alélicas

Seleção do pool
genético
Variabilidade individual
Variabilidade
interétnica
VARIABILIDADE GENÉTICA INTERÉTNICA E
INTERINDIVIDUAL

Polimorfismos a cada
A variabilidade de SNPs ocorre não somente300 a 500 pb; >107
entre pessoas de grupos étnicos diferentes,
mas também entre pessoas de um mesmo
grupo étnico. ✓ Estudos populacionais
mostraram que a variabilidade intra-
populacional muitas vezes é maior que a
variabilidade inter-populacional => espécie
humana “única raça”

O genoma humano (n) tem 3.000.000.000 de pares de bases (pb); 1 SNP (variante) a
cada 300 a 500 pb; logo tem cerca de 10.000.000 a 5.000.000 SNPs por genoma.
Informações da Diversidade Genética
Humana

PROJETO
GENOMA

O SEQUENCIAMENTO DO
DNA: Identificação da
sequência dos nucleotídeos.

GENOTIPAGEM: Identificação
dos genes e de seus alelos na
molécula do DNA
POLIMORFISMOS DE SNPs
Polimorfismo de Nucleotídeo Único

 Substituição de um único nucleotídeo;

 A forma de polimorfismo mais abundante no
genoma;
 Ocorre em qualquer região;
 Éxon  PODE alterar a sequência de aa na
proteína (mutação não sinônimo);
 Anemia falciforme, BLAD, K-caseína(BB).
POLIMORFISMOS DE SNPs

1 2 3

Determinado Locus
(posição do
cromossomo) haverá
variabilidade entre
indivíduos.
POLIMORFISMOS DE SNPs

Estudos populacionais mostraram que a variabilidade intra-populacional

muitas vezes é maior que a variabilidade inter-populacional  espécie
humana “única raça”.

Os SNPs podem muitas vezes alterar a função ou a transcrição dos genes aos
quais pertencem. Ex: gene que forma a cadeia beta da hemoglobina ->HBB).
DISTRIBUIÇÃO DE SNPs
CLASSIFICAÇÃO DOS SNPs
SNPS

NÃO-
CODIFICANTES CODIFICANTES
cSNPs nSNP

SNPS
EXÔNICOS SNPs SNPs SNPs
intrônicos regulatório promotor

Não SNPS
sinônimos sinônimos

Pode afetar a função Não afeta a função

da proeína. da proeína.
CLASSIFICAÇÃO DOS SNPs

UAA, UAG, UGA

POLIMORFISMO DE INSERÇÃO E DE DELEÇÃO

Qualquer adição ou deleção de pares de bases que não seja múltiplo de 3

altera a matriz de leitura, resultando em aminoácidos diferentes á partir do
ponto de inserção ou deleção.

CAUSAM ALTERAÇÕES NO QUADRO DE LEITURA (frameshift)

Utilização de Polimorfismos em
Análises Forenses
 Milhares de SNPs podem ser analisados simultaneamente em um
único indivíduo;
 SNPs podem ser de grande utilidade na análise de amostras
degradadas (fragmentos de 33pb);
 Possibilidade da determinação do retrato “falado” biomolecular.
Prova: CESPE - 2013 - Polícia Federal - Perito Criminal Federal - Cargo 8

Com relação às regiões repetitivas do genoma e aos polimorfismos, julgue o

item a seguir.
Polimorfismo é um tipo de mutação presente em uma sequência específica
do genoma, responsável por gerar um alelo que ocorre com frequência igual
ou superior a 1% em determinada população. O polimorfismo diferencia-se
dos demais tipos de mutação por não apresentar caráter prejudicial ao
indivíduo que o porta.

Prova: CESPE - 2013 - Polícia Federal - Perito Criminal Federal - Cargo 8

A mutação é um fator evolutivo contínuo, com taxas constantes ao longo do

genoma e das gerações.
Prova: NUCEPE - 2018 - PC-PI - Perito Criminal – Biologia

Roberto é afetado por distrofia muscular Duchenne (DMD), uma desordem

ligada ao X. A análise de mutações na sua família identifica uma substituição de
um único par de bases no éxon 1 do gene DMD, introduzindo um códon de
término prematuro. A consequência mais provável desta mutação é:

A Aumento na quantidade de DNA do DMD

B Diminuição na quantidade de DNA do DMD
C Diminuição da proteína codificada pelo DMD
D Aumento na quantidade do mRNA do DMD
E Diminuição na quantidade do mRNA do DMD
Prova: CESPE - 2013 - Polícia Federal - Perito Criminal Federal - Cargo 8

Com relação às regiões repetitivas do genoma e aos polimorfismos, julgue o item a seguir.
Os nucleotídeos que compõem os SNPs (single nucleotide polymorphisms), ou polimorfismos de
nucleotídeo único, não podem ser utilizados para identificação pessoal, pois sofrem mutações
com maior frequência que o resto do genoma, algumas delas mutações silenciosas.

As sequências repetitivas encontradas no genoma, como, por exemplo, CGG, se ocorrerem em

regiões intrônicas, não causarão prejuízo ao indivíduo e não poderão ser usadas para identificação
pessoal.

Prova: CESPE - 2018 - Polícia Federal - Perito Criminal Federal - Área 12

No que se refere à genética forense, julgue o próximo item.

O princípio básico para o estabelecimento de um perfil de DNA de interesse forense está

relacionado à quantidade suficiente de polimorfismos de determinado sujeito: a
probabilidade de qualquer outra pessoa, incluindo-se irmãos gêmeos univitelinos, ter os
mesmos alelos em cada lócus cromossomal é ínfima.
REGIÕES POLIMÓRFICAS DO TIPO
VTNR
Uma fração de DNA repetido consiste de regiões
denominadas minissatélites ou repetição em tandem de
número variável (VNTR – “variable number of tandem
repeats..

Os VNTRs exibem uma enorme variabilidade e são

constituídos de 9 à 100 pares de bases repetidos
sequencialmente em loci cromossômicos.
REGIÕES POLIMÓRFICAS DO TIPO STR

São sequências curtas (1 a 6 pb), repetidas em tandem, 

repetidos entre uma e algumas dúzias de vezes em um local
específico no genoma.

Polimorfismos de Repetições Curtas em

Tandem (STR  short tandem repeat).
REGIÕES POLIMÓRFICAS DO TIPO STR
Polimorfismo de microssatélites

 Os diferentes alelos em um polimorfismo de microssat élite s ão

resultado de diferentes números de unidades de nucleot ídeos
repetidas, contidas dentro de qualquer microssatélite;

 Devido a sua natureza altamente repetitiva (e da pequena extens ão

da unidade de repetição, eles apresentam alto grau de polimorfismo;

 São muito frequentes e encontram-se distribuídos ao acaso,

apresentando ampla cobertura no genoma, podendo, portanto, estar
associados a sequências expressas.
REGIÕES POLIMÓRFICAS DO TIPO STR

UM LOCUS DE MICROSSATÉLITE

Muitos alelos Determinação dos alelos Impressão digital de DNA

(tamanhos de repetição) nos múltiplos loci (DNA fíngerprinting)

Coleção de alelos em 13
desses loci para o painel
Distinguir indivíduos diferentes de impressão digital de
e para inferir relações de DNA