RADICAIS LIVRES E

SISTEMAS ANTIOXIDANTES

Prof. Dr Uderlei Silveira Covizzi

 2 a 5% do oxigênio respirado
acaba gerando radicais livres
(espécies instáveis altamente
reativas)

compostos tóxicos que podem ser

responsáveis por uma série de
doenças e pelo envelhecimento
ESPÉCIES REATIVAS DE OXIGÊNIO (EROs)

HO-
e- e- e- e-
O2 O2.- H2O2 + 2 H2O
Oxigênio Radical 2H+ Peróxido de 2H+
HO.
Àgua
molecular ânion hidrogênio
superóxido

Radical
hidroxil
ESPÉCIES REATIVAS DE OXIGÊNIO (EROs)
ESPÉCIES REATIVAS DE OXIGÊNIO (EROs)
ESPÉCIES REATIVAS DE OXIGÊNIO:

radicais livres:
ânion superóxido (.O2),

radical hidroxil (.OH),

radical óxido nítrico (.NO), etc.

não-radicais:
peróxido de hidrogênio (H2O2 ),

ácido hipocloroso (HClO)

oxigênio singlet (1O2), etc.
 O oxigênio passa de mocinho em bandido
durante a CADEIA DE TRANSPORTE DE
ELÉTRONS
A CoQ pode doar o elétron diretamente

para o O2 (íon superóxido)

Enzimas oxidases, oxigenases e

peroxidases geram superóxido e peróxidos
Radiação ionizante: ionizam água formando
radicais hidroxil
CADEIA DE TRANSPORTE DE ELÉTRONS
Espaço intermembranas

é é
é
é
MI é
é

Matriz mitocondrial
 Problema: nem sempre O se

transforma diretamente em H2O, pois

em alguns pontos da mitocôndria

ocorrem “vazamentos”.

Ao ganhar um elétron, graças ao

vazamento da mitocôndria, o oxigênio
se transforma em ânion superóxido
(.O2)
 ânion superóxido (.O2) pode reagir
com outro superóxido gerando
peróxido de hidrogênio (H2O2)

água oxigenada não é um radical e

não reage no mesmo lugar onde é
formada.

Porém, as moléculas de H2O2 são

capazes de passar de uma célula
para outra.
 “Trânsito” de H2O2 aumenta a

probabilidade de esbarrarem em um
átomo de ferro.

combinação entre H2O2 e átomos de

ferro gera o terceiro e mais terrível

dos radicais: o radical hidroxila
(·OH), altamente reativo
 REAÇÃO DE FENTON

-
Fe    +   H2O2   ®   Fe    +   OH    +   ·OH
2+ 3+

 Fe3+   +  ·O2   ®   Fe2+   +   O2

 _________________________________
-
 H2O2   +   ·O2   ®   OH    +  ·OH   +   O2
O radical hidroxil pode danificar:

Peroxidação dos ác. Graxos

insaturados da membrana celular

Altera estrutura terciária das

proteínas

Induzem mutações no DNA

Radicais Livres - Estresse Oxidativo
• Fatores endógenos:
– Metabolismo mitocondrial – cadeia
respiratória
– Fagocitose
– Outros
• Fatores exógenos:
– Ambientais: poluição radiação, agrotóxicos,
aditivos
– Estilo de vida: excesso de exercício, má
nutrição;
– Álcool, drogas, fumo.
 As Espécies Reativas de Oxigênio
(EROs) são produzidas regularmente
durante o processo respiratório

Os EROs são mantidos em níveis

mínimos através dos mecanismos
defensivos enzimáticos e não-
enzimáticos, conhecidos como
antioxidantes.

Antioxidantes: são capazes de

anular o efeito dos radicais de
oxigênio.
Indivíduo Normal: equilíbrio entre a
produção de EROs e antioxidantes

EROs ANTIOXIDANTES
 Na maioria das vezes esses
mecanismos agem impedindo a
reação entre H2O2 e superóxido
(·O2) na formação do radical
hidroxil (·OH).

Quando a produção de radicais

livres está aumentada e os
sistemas de defesa estão
diminuídos estabelece-se uma
situação de estresse oxidativo.
 ESTRESSE OXIDATIVO

ANTIOXIDANTES

EROs
 DEFESA ANTIOXIDANTE
ENZIMÁTICA E NÃO ENZIMÁTICA
 DEFESA ANTIOXIDANTE
ENZIMÁTICA

Sistemas enzimáticos mais importantes:

superóxido dismutase (SOD)

glutationa peroxidase
catalase
SUPERÓXIDO DISMUTASE

A SOD é considerada a enzima

central do sistema de defesa contra
o estresse oxidativo.

Esta enzima catalisa a reação

entre radicais superóxido produzindo
peróxido de hidrogênio
 SOD
     ·O2   +   ·O2      ®       H2O2   +   O2

Dismutação: reação na qual 2 moléculas

idênticas são transformadas em compostos
diferentes.

A SOD diminuia taxa de ânion

superóxido e consequentemente,
reduz a formação de radicais
hidroxila.
 CATALASE

Catalases e peroxidases capturam o H2O2, e

promovem sua degradação.

CATALASES: convertem o H2O2 em H2O e O2

CATALASE
                  2H2O2           2H2O   +   O2
 GLUTATIONA PEROXIDASE:
liquida definitivamente radicais livres,
pois gera apenas água.
pode reagir tanto com a água oxigenada
quanto com os íons hidroxil.
Consome glutationa.

GLUTATIONA PEROXIDASE
               H2O2    +   2GSH                2H2O   +   GSSG

GSH – Glutationa reduzida

GSSG – Glutationa oxidada
 Glutationa é um tripeptídeo-tiol
(gamaglutamilcisteinilglicina) presente na
maioria das células para neutralizar os
radicais livres.

No processo, forma-se glutationa

oxidada (GSSG), que é regenerada pela
Glutationa redutase (que usa NADPH).

GLUTATIONA REDUTASE
GSSG + NADPH + H+  2 GSH  + NADP+
 Estrutura da Glutationa

Glutationa Reduzida Glutationa Oxidada

RELAÇÃO ENTRE AS ENZIMAS DE DEFESA
ANTIOXIDANTE

2
RELAÇÃO ENTRE AS ENZIMAS DE DEFESA
ANTIOXIDANTE
 DEFESA ANTIOXIDANTE
NÃO-ENZIMÁTICA
inclui certos micronutrientes presentes
na dieta, que têm propriedades
antioxidantes.

Estes incluem vitaminas como:

ácido ascórbico (vitamina C),
a-tocoferol (vitamina E),
b-caroteno (Vitamina A),
além de outros carotenóides e
micronutrientes.
 antioxidantes naturais ajudam a
proteger:
membranas celulares, proteínas e
DNA e outras macromoléculas, dos
danos provocados por espécies
reativas de oxigênio (EROs).
 VITAMINA E (a-tocoferol)
vitamina E: lipossolúvel, pode reagir com
hidroperóxido (HO2·) e radical hidroxila
(·OH), protegendo a membrana dessas
espécies reativas.
 VITAMINA E (a-tocoferol)

 maior ação antioxidante em membranas

biológicas está em sua reação com os
radicais peroxil (ROO·) e alcoxil (RO·),
formados por ataque de radicais e
propagadores da peroxidação lipídica ao
reagirem com ácidos graxos
poliinsatutados
 lipoperoxidação: reação radicalar em
cascata que tem como uma das consequência
a diminuição da fluidez, podendo levar à
perda completa da integridade das
membranas biológicas.

vitamina E (tocoferol) atua como um

antioxidante doando seu hidrogênio lábil e
assim interrompendo a reação em cadeia da
peroxidação lipídica.

(Peroxil) ROO·   +   TOH        ®      ROOH   +   TO· (tocoferil)

(alcoxil) RO·  +   TOH      ®       ROH   +   TO·
 Durante sua ação como um antioxidante em
membranas, o a-tocoferol (TOH)  é
consumido e convertido na forma de radical
a-tocoferil (TO·).

Reciclagem é feita in vivo pelo ascorbato

(AscH). Um sinergismo entre vitamina E e
vitamina C, mostra que esta última pode
reduzir o radical a-tocoferil de volta a a-
tocoferol.

AscH   +   TO·             Asc·  +   TOH

 O radical ascorbil (Asc·) pode ser
removido por dismutação, produzindo
ascorbato e desidroascorbato.

Ambos podem ser reduzidos por um

sistema de enzimas que usam NADH
ou NADPH com fonte redutora, e
assim, o ascorbato é reciclado
 b-CAROTENO

Os carotenóides, como o b-
caroteno, apresentam propriedades
antioxidantes de lipídios.

pouca informação está disponível

sobre o mecanismo dessa atividade
antioxidante.
 Existe a hipótese de que o b-
caroteno não atue como um
antioxidante, como o ascorbato e a-
tocoferol, mas que de alguma forma,
atue no processo de peroxidação
lipídica, sinergicamente com a-
tocoferol, com efeito antioxidante
em membranas biológicas impedindo
a reação em cadeia.
 RADICAIS LIVRES:
EFEITOS BENÉFICOS

Os radicais livres são usados em

nosso organismo como sistema de
defesa contra organismos invasores

Leucócitos (neutrófilos e monócitos)

são armados com mecanismos
dependentes e independentes de
oxigênio para matar micro-
organismos.
 Há dois mecanismos dependentes de
oxigênio: o sistema da mieloperoxidase e
o sistema gerador de radicais de oxigênio
livres.

Após a fagocitose do micro-organismo, a

NADPH Oxidase (localizada na membrana
do leucócito) converte O2 em
superóxido .O2. A seguir, a superóxido
dismutase (SOD) converte o .O2 em H2O2. 
 Peróxido de Hidrogênio pode matar
bactérias diretamente ou ser convertido em
íons Hidroxila (OH-) ou hipoclorito (HClO,
também chamado ácido hipocloroso, principal
componente de desinfetantes.

A mieloperoxidase, presente no lisossoma

(fagolisossoma), catalisa a conversão de H 2O2
em HClO.

Esses radicais são bactericidas potentes.

 DOENÇAS COM
ENVOLVIMENTO DE RADICAIS
LIVRES

 Aterosclerose

 Câncer

 Diabetes mellitus

 Doenças respiratórias

 Doenças do sistema nervoso central

ESTRESSE OXIDATIVO
Doenças de Parkinson,
Alzheimer e
Huntington estão
associadas com lesões
oxidativas na
mitocôndria.
Peroxidação
lipídica

Reação em cadeia
entre EROs e os
ácidos graxos
polinsaturados dos
fosfolipídios de
membrana
Danos dos cromossomos pelas EROs.

HO.

HO.

HO.

HO.
 Influência de EROs na
formação da aterosclerose
 Hexoquinase Glicose-6-P-Desidrogenase
Glicose Glicose 6-P 6-P-
Glucolactona
NADP Deficiência
NADPH de NADPH
Aldose redutase diminui GSH
( KM )
NADP
Sorbitol
Diabetes: Hiperglicemia:
NAD Poliol desidrogenase ↑sorbitol, ↑
NADH osmolaridade no
Frutose cristalino = CATARATA