Dr.

Aulus Barbosa
 Herança Epigenética
 Definição
 Mudanças herdáveis no fenótipo que surgem
independentemente da sequência primária de DNA.
 Já foi descrito em plantas, Drosophila, levedura, ratos e
humanos.
 Ocorre principalmente devido a metilações no DNA e
modificações nas histonas.
 O início da epigenética
 1990
 Descobertas metilases de DNA em C
 Metilação representada na maioria dos animais, vegetais e
fungos
 1993
 Stephen Baylin et al
 Metilação do Gene de Supressão Tumoral p16 numa variedade de
tumores humanos
 Tratamento destas células com agentes desmetilantes repõe a
atividade do gene
 Extensa metilação em promotores de outros genes de
supressão tumoral
 Mecanismos conhecidos de regulação
epigenética
 Metilação do DNA
 Modificação das Histonas
 Metilação
 Acetilação
 Fosforilação
 Silenciamento do RNA
 RNA interference (RNAi)
 Imprinting
 Expressão gênica e organização cromossômica
 O DNA tem que estar acessível para a RNA Polimerase
 A compactação pelas histonas interfere no processo
 A posição do gene também pode interferir
 O nível de metilação do DNA interfere na transcrição de genes
 Evidências relacionando transcrição e compactação do DNA
 Transcrição em alças de cromossomos plumosos
 Transcrição em cromossomos meióticos de anfíbios
 Transcrição em Puffs de cromossomos politênicos
 cromossomos polotênicos de Drosophila
 Transcrição em alças de cromossomos plumosos
 Transcrição em cromossomos meióticos de anfíbios
 Formam-se durante a prófase da meiose
 Transcrição em Puffs de cromossomos polotênicos
 cromossomos polotênicos de Drosophila
 Formados por centenas de cromátides irmãs
 Nos “Puffs” ocorrem transcrição de genes
 Organização molecular de DNA transcricionalmente ativo
 O DNA transcricionalmente ativo é mais sensível a DNAse I
 Digestão de cromatina de hemácias de galinha
 Digestão com DNAse I
 50% do DNA para Beta-globina tinha sido digerido
 10% do DNA para ovalbumina foi digerido
 As proteínas HMG14 e HMG17 interferem nesta digestão
com DNAse
 Remodelagem da cromatina
 Alterações nos nucleossomos durante a transcrição
 Metilações, fosforilações e acetilações nas histonas
 A compactação do DNA pelas histonas influenciam na ligação
de proteínas que atuam na transcrição.
 Histona acetil-transferases (HATs)
 Aumenta a expressão gênica
 Histona deacetilase (HDACs)
 Reduzem a expressão de genes

 A metilação dos resíduos de histona tem efeitos variáveis.

 Histona-metil transferase – aumenta a afinidade pelo DNA

 A fosforilação aumente a expressão de genes

 O complexo SWI/SNF atua remodelando os cromossomos
 Remodelagem da cromatina
 O complexo SWI/SNF atua remodelando os cromossomos
 Eucromatina e Heterocromatina
 Heterocromatina, mais corada e com menos genes ativos
 Eucromatina, coloração mais fraca e com genes ativos
 Quando um gene é transferido para a heterocromatina ele
pode não funcionar
 Ex: variegação do efeito de posição do gene White em Drosophila
 Silenciamento Gênico
 Silenciamento pelas proteínas do grupo Polycomb
 Regulam a expressão de fatores de transcrição
 Causam desenvolvimento anormal
 Silenciamento dos genes vsg em Tripanossomas
 Glicoproteína variante de superfície – vsg
 1000 genes diferentes
 Apenas 1 é expresso
 A proteína expressa pode mudar durante a infecção
 Escapar do sistema imunológico do hospedeiro
 Os genes estão inativos porque não possuem promotor
 Colocar figura 21.19 e 21.20
 Silenciamento dos genes vsg em Tripanossomas
 Metilação do DNA e Imprinting
 Metilação dos resíduos de cisteína na sequência:
 5´ mCpG 3´
 3´ GpCm 5´
 Algumas enzimas de restrição não cortam sequências
metiladas. Ex: HpaII que reconhece a sequência CCGG
 Ilhas CpG – segmentos ricos em CG de 1kb a 2 kb de
comprimentos
 30.000 no genoma humano localizados perto de pontos de início da
transcrição
 Estas citosinas raramente são metiladas
 A metilação do DNA provoca a repressão transcricional
 Cromossomo X
 Regiões repetidas e com transposons
 A base 5-metil citosina
 A Metilação do DNA inativa genes
 Metilação do DNA e Imprinting
 Algumas proteínas ligam-se a DNA metilado impedindo a
transcrição dos genes
 Ex.: MeCP2
 As vezes a expressão do gene é controlada por sua origem
parental - Imprinting
 Gene Igf2 em camundongos é expresso somente quando herdado
do pai
 Gene H19 é expresso somente quando herdado da mãe
 Gene Igf2 em camundongos é expresso somente quando
herdado do pai
 Ativação e inativação de cromossomos inteiros
 Inativação aleatória de um dos cromossomos X das fêmeas.
 Centro de inativação do cromossomo X – XIC
 O gene XIST permanece ativo no X bloqueado
 Codifica um RNA de 17Kb sem matrizes de leitura
 Reveste o cromossomo X inativo
 Corpúsculo de Barr
 Metilações
 Transferência do grupo metil (CH4) da S-adenosilmetionina
(SAM) para a posição 5´ das citosinas em dinucleotídeos CpG
 Reação catalisada pela enzima DNA-metiltransferase
(DNMTs)
 Tipos
 DNNT 1 – atua durante a replicação
 DNMT 3A e DNMT 3B – atuam em reações de metilação após a
síntese do DNA nos sítios que não foram metilados.
 Atuação
 Inativação do cromossomo X
 Diferenciação celular
 Quanto mais metilado o gene menos expresso ele será.
 Processos epigenéticos adicionais.
 RNAi
 Posição do gene
 Proximidade com heterocromatina pode bloquear a expressão do
gene.
 Silenciamento de transcrição mediado por RNAi
 Micro-RNAS
 Provocam a degradação ou bloqueio da expressão de mRNAs
específicos.
 São sintetizados como longos precursores chamados chamados
micro RNAs primários (pri-miRNAs)
 São clivados pela proteína Drosha juntamente com a proteína
DGCR8
 Os produtos são exportados para o citoplasma pela proteína
exportina
 Os pré-miRNAs são clivados pela Dicer
 Ação de RISC e proteína argonauta
 Inibição da tradução via pareamento na extremidade 3´ do mRNA
alvo.