CURSO TÉCNICO EM QUÍMICA

DICSIPLINA DE MICROBIOLOGIA II
Prof.ª Dra. Renata Gonçalves Lara

ENUMERAÇÃO DE COLIFORMES TOTAIS E TERMOTOLERANTES

JARDIM, Juressana R. T.1; NEY, Letícia L.1; VARGAS, Laura S. De1; LARA, Renata G.2
1
Alunos (as) do curso Técnico em Química do IF-Sul Rio-Grandense; 2Professor (a), Dra. IF-Sul Rio-Grandense, renatagoncalves@ifsul.edu.br

Introdução . VBBL EC
“O grupo Coliformes é dividido em Coliformes Totais e Total 1+ e 4- 5-
Termotolerantes ou fecais” (MACÊDO,2001 apud MICRO NMP 2,2 NMP/100 ML <2,2NMP/100 ML
De acordo com a tabela, obteve-se 2,2 NMP/100ml com o
AMBIENTAL, 2021 ).
caldo VBBL, onde tal estimativa representa o número de
Os Coliformes Totais é empregado para avaliar condições
coliformes totais, nos testes com EC o resultado foi de
higiênicas, pois são encontrados naturalmente no meio ambiente
<2,2NMP/100ML, ou seja, não haviam coliformes
como no solo, na água e nos dejetos humanos ou de animais. A
termotolerantes presentes na amostra de água do arroio Turuçu
presença de coliformes totais, por si só, não implica que a água
analisada.
esteja comprometida, mas pode indicar a presença de bactérias
potencialmente patogênica. Figura 1: Esquema da aula pratica realizada.
Os Coliformes Termotolerantes é empregado como indicador
de contaminação fecal, ou seja, de condições higiênico-
sanitárias, visto que a população deste grupo é constituída de
uma alta proporção de E.Coli.
As análises de água para coliformes são muito importantes
para monitorar a qualidade das águas de poços artesianos,
canais e arroios, que é muito variável, uma vez que as águas se
deslocam por um longo caminho através de rochas e solos e
assim podem sofrer contaminação fecal durante seu percurso,
essa analise também é usados como indicadores de
contaminação em alimentos e para verificar a qualidade sanitária
água.
Objetivou-se avaliar a presença de coliformes totais (CT) e
termotolerantes (CTT) na amostra de água coletada do arroio
Turuçu, e enumera-los usando o Número Mais Provável de
ambos resultados.
Material e Métodos .
Materiais necessários: Amostra de água do arroio Turuçu,
15 tubos de ensaio com tampa rosqueável, 15 tubos de Durham,
vidrarias esterilizadas, estufa incubadora regulada a 35°C,
banho-maria a 44°C, caldo Lauril Sulfato Triptose (LST), caldo
Figura 2: Tubos de ensaio com caldo VBBL e tubos com caldo
Lactosado Bile Verde Brilhante (VBBL) e caldo Escherichia Coli
EC.
(EC).
Deve-se salientar que “de
Metodologia: Esterilizou-se o material para ser utilizado,
modo em geral, nas águas
coletou-se uma amostra do Arroio Turuçu, foi usada a técnica de
para abastecimento o limite
fermentação em tubos múltiplos (FTM) na amostra de água
de Coliformes legalmente
coletada, fez-se o teste presuntivo utilizando-se caldo LST
toleráveis não deve
(Lauril Sulfato Triptose) em cinco tubos de ensaio com tubos de
ultrapassar 4.000 coliformes
Durhan invertidos, por cerca de 48hs a 35oC. Realizou-se o teste
em 100 ml de água em 80%
confirmatório com cada tubo de ensaio que mostrou produção de
das amostras colhidas em
gás nos tubos de Durhan, inoculando-se uma alçada dos tubos
qualquer período do ano”
positivos nos caldos VBBL (Lactosado Bile Verde Brilhante) e
(FRANCO, 2003).
EC (Escherichia Coli) para coliformes totais e coliformes
termotolerantes (fecais), respectivamente, seguido de incubação Conclusão .
dos mesmos por 48hs a 35oC, e 24hs a 44,5ºC, e por fim, a Conclui-se que a amostra de água coletada do arroio Turuçu,
enumeração de coliformes, utilizando o NMP (Número Mais encontra-se imprópria para consumo, pois o parâmetro
Provável). estabelecido pela secretaria de saúde, “permitido para
Resultados e Discussão . coliformes totais deve de ausência em 100 ml” (BRASIL, 2021), e
o resultado que obtivemos para coliformes totais foi de 2,2
No teste presuntivo com caldo Lauril Sulfato Triptose, os cinco
NMP/100 ml.
deram resultado positivo, apresentaram trbidez e gás nos tubos
de Durhan. Após esse resultado, foi iniciado o teste confirmatório Referências .
com EC e VBBL, que resultaram nos cinco tubos de ensaio com KUHN, C. R. (ed.). Apostila de Praticas em Análises Microbiológicas. Enumeração
de Coliformes Totais e Termotolerantes. Curso Técnico de Química, Instituto
o caldo Escherichia Coli negativos, já nos tubos com Lactosado Federal Sul-rio-grandense, Pelotas, 2020. p. 22-24.
Bile Verde Brilhante quatro foram negativos e um positivo MICRO AMBIENTAL. Analises de Água. O que são bactérias coliformes?.São
Paulo,2021. Disponível em: https://microambiental.com.br/servicos/analises-de-
(Figura 1 e 2). agua/ Acesso em; 03 de maio 2023.
Tabela contendo os resultados da enumeração de coliformes FRANCO, B. D. M. Microbiologia dos alimentos. Ed. Atheneu, São Paulo, 2003.
Acesso em; 18 de maio 2023.
totais e termotolerantes, utilizando o NMP com os caldos VBBL e BRASIL.Portaria GM/MS NO 888, de 4 de maio de 2021. Disponível em:
EC: https;//bvsms.saude.gov.br Acesso em; 18 de maio 2023.