03/03/2021

Biologia Molecular e
Biotecnologia
Mecanismo de Replicação do DNA
cadeia dupla do DNA usando ATP para poder
Introdução separar as duas fitas.
Todos os organismos duplicam seu DNA com
extrema precisão antes de cada divisão celular.
O uso de um DNA-molde é o processo pelo
qual a sequência de nucleotídeos de uma fita é As proteínas iniciadoras reconhecem o sinal (a
copiada em uma sequência complementar de origem), se ligam aos DNAs helicases, para
DNA. Esse processo exige a separação da assim, dar origem ao processo.
hélice de DNA em duas fitas moldes.
*As fitas são complementares por causa das DNA Ligase
bases nitrogenadas (G com C e T com A).
* As mitocôndrias e as bactérias também
possuem DNA, porem um DNA circular (+

A reação catalisadora acontece por causa do

DNA Ligase, ou seja, ele liga os fragmentos de
DNA. Se dois pedaços de DNA tiverem
terminações complementares, o DNA ligase
pode ligá-las para formar uma molécula de
DNA única e contínua.

curto). Usando o ATP como fonte de energia, o DNA

* A e T são os maiores pontos de replicação,
por terem menos interações (pontes de
hidrogênio).
ligase catalisa uma reação em que o grupo
fosfato terminal da extremidade 5' de uma fita
de DNA é ligado ao grupo hidroxila terminal
da extremidade 3' da outra. Esta reação produz
um esqueleto intacto de açúcar-fosfato.

* A replicação é semiconservativa, ou seja, usa

uma fita como molde, conservando-a (fita
DNA Girase
mãe), e cria uma nova (fita filha). O DNA Girase ou topoisomerase é uma
enzima que evita que as duplas fitas se
* Quando terminado em ase é uma enzima, ex:
embaralhem durante a replicação.
Sua função + ase;

DNA Helicase
O DNA Helicase quebra a dupla hélice do
DNA, separando as duas fitas, quebrando as
pontes de hidrogênio. Essa enzima move-se ao
longo da
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Primer e DNA Primase
O primer é um sinal para que o DNA
Polimerase entre em ação. O primer é um
pedaço de RNA. Cada primer tem uma
sequência de nucleotídeos, que gira em torno
de 10 nucleotídeos. *DNA Polimeras são responsáveis pelo
alongamento, e a Polimerase lll é a principal
Ele é produzido a partir de uma enzima
responsável pelas novas cadeias de
chamada DNA Primase. O DNA Primase é
nucleotídeos.
uma enzima especial de polimeração de
nucleotídeos, sintetizando pequenas moléculas * Os DNAs polimerases dos procariontes e dos
iniciadoras de RNA na fita descontinua.

DNA Polimerase
A DNA Polimerase sintetiza o DNA,
adicionando nucleotídeos complementares a
extremidade 3’OH da cadeia de
crescimento/nova, ou seja, cria novos
polímeros. Algumas características das DNA
polimerases:
A polimerização de DNA acontece apenas na
direção 5’ para 3’;
eucariontes são diferentes, que possuem nomes
diferente, porem possuem funções
semelhantes.
Existem cinco tipos de polimerases de DNA
em bactérias que se diferem sutilmente quanto
a função celular:

Sempre precisam de uma fita molde;
Não conseguem dar início à formação de uma
cadeia de DNA, requerem uma cadeia pré-
existente ou uma pequena sequência de
nucleotídeos chamada de primer
Já nos eucariotos, existem vários tipos de
DNAs polimerases análogas:
Fita Líder e Fita Atrasada
A fita atrasada é copiada em pequenos
fragmentos (Okazaki), por que está no sentido

Elas revisam (ou conferem) seu trabalho,

removendo a maior parte dos nucleotídeos
erroneamente adicionados à cadeia
A adição de nucleotídeos requer energia. Essa
energia vem dos próprios nucleotídeos, que
possuem três fosfatos ligados à sua estrutura.
Quando a ligação entre os fosfatos é quebrada,
a energia liberada é usada para formar uma
nova ligação entre o novo nucleotídeo e a
cadeia crescente.
descontinuo, ao contrário da fita líder, já a fita
líder segue o sentido contínuo.
A fita líder pode ser ampliada a partir de um
único primer, enquanto a fita tardia precisa de
um novo primer para cada um dos curtos
fragmentos de Okazaki.
Fragmentos de Okazaki

É sintetizado pelas fitas e faz a cópia da fita
mãe pra fita filha. Os pequenos fragmentos são
chamados de fragmentos de Okazaki, em
homenagem ao cientista japonês que os
descobriu.
Proteínas/DNA SSB
O DNA SSB são proteínas que mantém as fitas
separadas, (que foram separadas pelo DNA
Helicase) se ligando em uma das fitas simples.
Essas proteínas são essenciais na reparação e
recombinação do DNA.
Cinta Deslizante
A cinta deslizante é uma proteína em forma de
anel que ajuda o DNA Polimerase a se
movimentar para fazer a cópia na fita simples.
A cinta mantém o DNA polimerase
firmemente associada ao DNA enquanto está
em movimento.
Bolha de Replicação e
ORC
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A bolha de replicação é onde está
acontecendo, ou seja, onde vai iniciar a
replicação, onde a fita molde está sendo
copiada. Em cada bolha terá duas forquilhas,
uma em cada extremidade.
* Acontece apenas uma replicação nos DNAs
circulares, por causa da sua Metilação
atrasada. Os procariontes possuem apenas 1
origem, já os eucariontes possuem milhares de
origens (+/- 10.000).
A ORC (Origem de Replicação Complexa) se
liga na região de origem, indicando onde a
replicação deve começar. A duplicação tem
início em regiões denominadas ORC. Ela da
origem a bolha de replicação.
* Telomerase é a enzima que faz a replicação
dos telômeros (extremidades dos
cromossomos). Quanto mais velha a pessoa,
menor o tamanho dos telômeros.
* A replicação acontece em ambos os sentidos
(bidirecional), até se juntar a próxima bolha. A
terminação é quando as origens se ligam.
Terminação:
l. O primer de RNA é alongado pela DNA
polimerase III até que outro RNA seja
encontrado
ll. O primer de RNA é removido por nucleases
que
reconhecem uma fita de RNA em uma hélice
de RNA/DNA e a degradam; os espaços são
preenchidos por uma DNA-polimerase de
reparo que pode realizar a autocorreção à
medida que preenche os espaços.
lll. Os fragmentos completos são unidos por
uma
enzima denominada DNA-ligase, que catalisa
a formação de uma ligação fosfodiéster entre a
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extremidade 3’-OH de um fragmento e a
extremidade 5’-fosfato do seguinte.
* Os replicons é a início e termino de uma
origem.