Questionário - Ativação e diferenciação de linfócitos T efetores

Os linfócitos T são gerados na medula óssea a partir de progenitores linfoides e migram para
o timo onde sofrem o processo de maturação. No
timo, estas células adquirem seus receptores
funcionais (TCRs) e os co-receptores CD4 e CD8 e
são selecionadas pelo reconhecimento do MHC
próprio: peptídeo próprio, expresso pelas células
no timo. A ligação de baixa avidez a estes
complexos peptídeo-MHC favorece a seleção
positiva destas células e promove a diferenciação
em células CD4+ ou CD8+ imaturas, dependendo
do MHC reconhecido (MHC I ou MHC II). Se as
células T reconhecem o complexo peptídeo próprio: MHC com alta avidez, são selecionadas
negativamente (Tolerância imunológica). As células selecionadas positivamente, deixam o timo e
migram para os órgãos
linfoides secundários, onde

encontram células apresentadoras de

antígenos responsáveis pela ativação de T
imaturas/virgens em células T efetoras.

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Visão geral:
MHC 2 é expresso nas APCs
MHC1 é expresso em todas as células nucleadas
O reconhecimento do antígeno junto a coestimuladores induzem nas cels T: secreção de citocinas,
proliferação (expansão clonal) e diferenciação de imaturas a efetoras e linfócitos de memoria
As citocinas induzem proliferação e diferenciação
A expansão e diferenciação são reforçadas por feedbacks + de ampliação (como as cels T que
liberam sinais para as APCs aumentando sua capacidade de ativar mais células T)
Há citocinas que regulam a resposta
As APCs não apenas expõem os antígenos, mas também providenciam o estímulo que guia a
magnitude e natureza da resposta das células T.
Células T efetoras reconhecem antígenos em órgãos linfoides ou em tecidos não linfoides
periféricos e são ativadas para executar funções que são responsáveis pela eliminação de
microrganismos e, em estados de doença, pelo dano tecidual
Células T CD4+ auxiliares diferenciadas ativam macrófagos para destruir microrganismos
fagocitados; outras secretam citocinas que recrutam leucócitos e, assim, estimulam a inflamação;
outras amplificam as funções de barreira da mucosa; outras ainda permanecem nos órgãos
linfoides e ajudam células B a se diferenciarem em células que secretam anticorpos.
Células T citotóxicos CD8+ (CLTs), as células efetoras da linhagem CD8+, destroem células infectadas
e células tumorais que apresentam antígenos associados ao MHC de classe I e também secretam
citocinas que ativam macrófagos e causam inflamação
Células T de memória que são geradas pela ativação de células T são células de vida longa com
maior capacidade de reagir contra o antígeno
A resposta das células T diminui depois que o antígeno é eliminado pelas células efetoras
(contração) (90% das células T antígeno-específicas que resultam da expansão clonal morrem por
apoptose conforme o antígeno é eliminado)

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 Sobre a ativação das células
T nos órgãos linfoides e sua
diferenciação em células
efetoras, responda o
questionário abaixo:

1. Como as células T reconhecem

antígenos? Quais moléculas são
necessárias para este
reconhecimento? Qual tipo de
antígenos é expresso nestas
moléculas?
Primeiro sinal para a
ativação das celulas T: antígeno (garante resposta imune específica para o antígeno).
 Os receptores TCR dos Linfócitos T CD4+ e CD8+ reconhecem os complexos MHC-peptídios
exibidos pelas APCs (cel dendriticas, macrófagos e celulas B), eles podem responder apenas a
antígenos proteicos. Além disso, várias outras proteínas da superfície da célula T participam do
processo de ativação da célula T: moléculas de adesão (estabilizam a interação dos linfócitos T
com as APCs,); correceptores (transmitem sinais bioquímicos que trabalham em conjunto com
os sinais do complexo TCR); e coestimuladores (ex: B7, CD40).
 A ativação das células T imaturas requer o reconhecimento do antígeno apresentado pelas
células dendríticas, essas capturam antígenos proteicos que atravessam a barreira epitelial e
transportam aos linfonodos e podem ser capturados da circulação por cels dendriticas do baço.
As celulas dendriticas assim como as celulas T também são atraídas pela CCR7. Elas expressam
MHC e coestimuladores. As celulas dendriticas apresentam MHC de classe II para aqueles
antígenos proteicos endocitados para as celulas TCD4 e apresenta MHC de classe I para os
antígenos proteicos citossolicos/nucleares para as celulas TCD8. Obs: As células T efetoras
diferenciadas podem responder a antígenos apresentados por células que não as dendríticas

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Segundo sinal para ativação da célula T: coestimulação
 A proliferação e diferenciação de células T imaturas requerem sinais de coestimuladores
fornecidos por moléculas nas APCs.
 CD28 (receptor de superfície de célula T) se liga às moléculas coestimulatórias B7-1 (CD80) e B7-
2 (CD86) expressas nas APCs ativadas (B7 são glicoproteínas de membrana)
 A expressão de coestimuladores B7 é regulada e garante que a resposta por parte dos linfócitos
T seja iniciada apenas quando necessário. As moléculas B7 são expressas principalmente nas
APCs, incluindo células dendríticas, macrófagos e linfócitos B. a sua expressão podem ser
induzidas por microrganismos que se ligam ao TOLL e citocinas como interferon gama (IFN-y) da
resposta imune inata. Além disso, as celulas TCD4 aumentam a expressão de B7 nas APCs pela
via do CD40 (amplificando)
Obs1: uma das funções importantes dos adjuvantes de vacina é estimular a expressão de
coestimuladores de APCs
Obs2: as células T autorreativas que percebem antígenos próprios não são ativadas pelo fato das
APCs apresentarem deficiente coestimuladores
Obs3: células T regulatórias são importante para a tolerância de autoantigenos são mantidas pela
apresentação de autoantigenos pelas APCs e os baixos níveis de B7 apresentados nas APCs
 Sinais de CD28 trabalham em cooperação com o reconhecimento do antígeno para promover
sobrevivência, proliferação e diferenciação das células T específicas. CD28 ativa P13quinase que
ativa Akt ou a CD28 ativa MAP quinase, resultando em aumento da prod de proteínas
antiapoptoticas, aumento da atv metabólica, proliferação celular por aumento de IL-2 e ciclinas,
e diferenciação de cels T imaturas em efetoras e células de memória, permitindo que
respondam contra os antígenos apresentados pelas APCs

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Obs: cels T efetoras são menos dependentes de CD28-B7 do que as imaturas, por exemplo, a
diferenciação das
células T CD8+ em CTLs
efetores requer
coestimulação, mas
CTLs efetores podem
destruir outras células
que não expressam
coestimuladores
 Na família CD28
existe receptores
estimulatórios
[como o próprio
CD28 e ICOS (coestimulador induzível, CD278)] e inibitórios
[como CTLA-4 (antígeno 4 do linfócito T citotóxico) e PD-1
(morte programada 1)], e há um equilíbrio entre os recep de
ativ e inib (semelhante o que acontece nas NK). Os receptores
inibitórios estão envolvidos na tolerança, e inibem
competivamente e liberando sinais inibitórios que bloqueiam
a ativação do TCR e CD28
 A interação CD28:B7 é mais importante para a iniciação de respostas das células T mediante
ativação de células T imaturas; interações ICOS:ligantes de ICOS são essenciais para as respostas
de anticorpos dependentes das células T auxiliares; interações CTLA-4: B7 inibem a ativação
inicial dos linfócitos T em órgãos linfoides secundários; e interações PD1:ligante de PDl inibem a
ativação de células efetoras, especialmente em tecidos periféricos
 A interação de
CD40L nas
células T com o
CD40 nas APCs
amplifica as
respostas das
células T pela
ativação das
APCs.

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 Obs: a via de CD40 amplifica indiretamente as respostas da célula T por induzir coestimuladores
nas APCs, mas o CD40L não funciona sozinho como um coestimulador para as células T.
Terceiro sinal: citocinas
 Secretadas pelas APCs para o desenvolvimento das respostas das células T (proliferação,
diferenciação e nas funções efetoras), atuam de maneira paracrina e autocrina.
 IL-2: interleucina 2 é um fator de crescimento, sobrevivência, diferenciação de linfócitos T. Tem
capacidade de auxiliar a proliferação das células T estimuladas por antígenos, por isso, chamada
de fator de crescimento de células T (TCGF). Ela atua de maneira autocrina ou paracrina. É
produzida por cel. TCD4 após estimulação antigênica e coestimulação, as quais ativam a
transcrição de genes, síntese e secreção de proteínas. A IL-2 interage com os receptores de IL-2
(IL-2R) (são receptores de citocina I e tem alfa e beta) expressos transitoriamente na ativação de
células T imaturas em efetoras, e nas células T reguladoras.

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 Funções da IL-2: estimula a sobrevivência (induz produção de proteínas antiapoptoticas Bcl-2,
proliferação (estimula síntese de ciclinas e degrada o inibidor do ciclo p27) e diferenciação
(aumenta a produção de citocinas efetoras como IFN-g e IL-4 pelas células T) das células T ativadas
por antígenos. E também é necessária para a sobrevivência e o funcionamento das células T
reguladoras (as cels T reguladoras suprimem respostas imunes contra autoantigenos) (obs: elas não
são produzidas pelas cels T reguladoras, assim para a sobrevivência dessas células t reguladoras é
necessário que outras células que respondem a antígenos produzam IL-2). Tem sido demonstrado
que elas tbm estimulam a proliferação e diferenciação das células NK e células B.

2. Como ocorre o processamento de antígenos citosólicos? Em qual molécula de MHC eles são
expressos? Qual célula T reconhece este antígeno? Quais células expressam este MHC?
Peptídios derivados de proteínas
citossólicas e nucleares exibidos
por moléculas do MHC classe I
para células T CD8+. O
processamento desse peptídeo é
uma clivagem nos proteassomas e
vai expressar o MHC I presente
em todas as células nucleadas.
Essas proteínas citosolicas podem
ser antígenos proteicos de
microrganismos ou próprios
(podendo gerar sinais de sobrevivência para os linfócitos ou podem gerar doenças autoimunes).
A CD8 é citotóxicas assim é importante elas reconhecer proteinas citosolicas de microorganismos

3. Como ocorre o processamento de antígenos endocitados? Em qual molécula de MHC eles são
expressos? Qual tipo de célula T
reconhece este antígeno? Quais
células expressam esta molécula de
MHC?
Células dendríticas apresentam
peptídios derivados de antígenos
de proteínas endocitadas em
associação com moléculas do

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 MHC classe II para células T CD4. Antígenos proteicos endocitados vão ser processados nos
lisossomos e vão expressar MHC II reconhecido por cel TCD4
Tcd4 é importante em reconhecer peptídeos que estavam para fora da células, ativam macrófagos
produzem citocinas

4. O que é apresentação cruzada? Por que este mecanismo é importante?

Apresentação cruzada/ cross-priming:
Algumas células dendríticas possuem a capacidade de captar e endocitar células infectadas por
vírus ou células tumorais e apresentar os antígenos virais ou tumorais aos linfócitos T CD8+ virgens.
É chamada de cruzada pois os antígenos endocitados são transportados das vesículas para o citosol,
onde são degradados em proteassomos e entram na via da classe I. (essa permissibilidade do
trafego de antígenos das vesículas para o citosol é característica das células dendriticas).
Ao mesmo tempo as células dendriticas são capazes de apresentar antígenos endocitados para
MHC de classe II que estimulam as células TCD4 que também estimula respostas completas em
células T CD8

apresentação cruzada
envolve a fusão dos
fagossomos contendo
antigenos endocitados
com o RE, do RE são
transportadas ao citosol
onde ocorre a degradação
proteossomica e os
peptídios derivados delas

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 são transportados pela TAP para o RE, onde são ligados a moléculas do MHC da classe I recém-
sintetizadas
A apresentação de proteínas citossólicas e vesiculares pelas vias do MHC da classe I ou da classe II,
respectivamente, determina qual subconjunto de células T irá responder aos antígenos
encontrados nesses dois conjuntos de proteínas e está intimamente ligado às funções dessas
células T

5. Além do reconhecimento do antígeno, quais eventos (outros sinais) são necessários para a ativação
da célula T?
mHCII das cels dendriticas vao reconhecer os antígenos peptídeo, primeiro sinal
Coestimuladores: B7 ou CD40, segundo sinal (B7 geralmente linfócitos virgens, cd40 nos já
ativados)
Células dendriticas produzem citocina (IL12 e IL4) que vão atuar nos receptores e fornecer o
terceiro sinal (vão instruir para qual tipo de resposta vai ter)

6. Quais as principais moléculas coestimuladoras? B7, CD40 Quais células expressam as moléculas
coestimuladoras? APCs. Quais sinais estimulam a expressão dos coestimuladores? O primeiro sinal e
as citocinas

7. Qual molécula expressa pela célula T reconhece estas moléculas?

Receptor de célula T (TCR) reconhece o antígeno, CD28 reconhece B7 e CD40L reconhece CD40

Uma vez ativadas, as células T CD4 e CD8 proliferam e diferenciam-se em células efetoras.

8. Qual citocina favorece a proliferação das células T? IL-2  expansão clonal, diferenciação e
sobrevivência
Quais os principais subtipos de células T auxiliares e quais estímulos induzem a diferenciação de cada
subtipo?
IL-12, IL-18 e IFN tipo I: estimula a diferenciação de células T CD4+ imaturas às células efetoras do
subgrupo TH1.
IL-4: estimula a diferenciação de células T CD4+ imaturas às células efetoras do subgrupo TH2
IL-1, Il-6 e IL-23: estimulam a diferenciação das células T CD4+ às células efetoras do subgrupo TH17.

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Diferenciação das células T ativadas em células efetoras da linhagem CD4 e CD8:
 As células T CD4+ imaturas produzem principalmente IL-2 na sua ativação, já as células efetoras
TCD4 secretam citocinas que ativam outras células (linfócitos B, macrófagos e células dendríticas)
 Células efetoras CD8+ são citotóxicas e destroem as células infectadas
9. A ativação de células T CD8 origina quais células efetoras?
Célula T citotoxicas (ganham granzimas e perforinas que vão matar os microorganismos)

10. Explique a fase de contração da resposta imune. Quais eventos estão associados ao declínio da
resposta imune? Apoptose e eliminação do antígeno
Fase de contração: é a fase de declínio das respostas imunes que diminuem e voltam ao estado de
homeostasia. Apoptose e eliminação do antígeno , ao eliminar os antígenos, diminui o estimulo de
sobrevivência e ativação dos linfócitos que acabam morrendo por apoptose, de modo que o conjunto de
linfócitos ativados por antígeno se contrai. (pois a privação dos fatores de crescimento ativa a via
mitocondrial da apoptose).
A coestimulação e fatores de crescimento como a IL-2 estimulam a expressão das proteínas antiapoptóticas
Bcl-2 e Bcl-XL em linfócitos ativados
11. Qual a importância das células de memória? Quais as propriedades destas células?
As respostas imunes a um antígeno mediadas por células T normalmente resultam na geração de células T
de memória específicas para esse antígeno, que pode persistir por anos, mesmo por toda a vida.
Cada exposição gera células de memória de vida longa e específicas para aquele antígeno, e são mais
numerosas do que os linfócitos imaturos específicos para o antígeno que existia antes da exposição ao
antígeno. Além disso as células de memória tornam mais eficientes em responder e eliminar pois já está na
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sua fase efetoras (os linfócitos B de memória produzem anticorpos que se ligam aos antígenos com
maiores afinidades do que os anticorpos produzidos nas respostas imunes primárias, e as células T de
memória reagem muito mais rápido e vigorosamente ao antígeno do que as células T imaturas)
Podem durar bastante tempo, e quando reconhecem o antígeno ela responde mais rapidamente, como ela
já foi pre ativada respondera com maior magnitude

Livro: As respostas imunes a um antígeno mediadas por células T normalmente resultam na geração de
células T de memória específicas para esse antígeno, que pode persistir por anos, mesmo por toda a vida.
Desenvolvimento das células T de memória:
Dois modelos:
1. Modelo linear de diferenciação de células T de memória, a maioria das
células efetoras morre e algumas sobreviventes evoluem para a
população de memoria
2. Modelo de diferenciação ramificada, células efetoras e de memória
são os destinos alternativos de células T ativadas.

Propriedades das Células T de Memória:

 Capacidade para sobreviver em um estado quiescente após a eliminação do antígeno, pois
expressam níveis aumentados de proteínas antiapoptóticas Bcl-2 e Bcl-X1 (obs:quanto mais velhos,
mais entramos em contato com antígeno, assim diminui a população de células imaturas e aumenta
as células de memória)
 Respondem rapidamente a antígenos prévios do que as células imaturas especificas, pois os genes
para citocinas e outras moléculas efetoras ficam fixos em um estado acessível nas células de
memória por conta de mudanças na metilação e acetilação das histonas, assim, estes genes estão
preparados para responder mais rapidamente ao antígeno
 O número de células T de memória específicas ao antígeno é maior do que o número de células
imaturas específicas para o mesmo antígeno: após a proliferação (expansão clonal) nas respostas
imunes, há a diferenciação dos linfócitos imaturos em efetores, a maioria morre após eliminação do
antígeno e sobrevivem as células de memória mais numerosas que os conjuntos de células imaturas
 Migram para os tecidos periféricos para responder a antígenos nesse locais: elas normalmente
podem migrar para qualquer tecido pois tem diferenças nas suas moléculas de adesão e podem
responder a antígenos ligados a qualquer APC. Os linfócitos T imaturos diferentemente ficam nos
órgãos linfoides secundários e são dependentes da apresentação de antígenos pelas células
dendriticas maduras em órgãos linfoides.
 As células de memória tem capacidade de autorrenovação por proliferação lenta
 A manutenção das células T é dependente de citocinas mas não requer o reconhecimento do
antígeno. A citocina mais importante para manutenção (sobrevivência) das células TCD4 e 8 é a IL7
e as células TCD8 também dependem de IL-15 (estimulam moléculas antiapoptoticas e estimulam a
baixa proliferação)
 As células TCD4 e 8 são divididas em células T de memória central que expressam CCR7 e L-
selectina, ficam nos gânglios linfáticos, e respondem aos antígenos gerando células efetoras por
proliferação e em células T efetoras de memória que não expressam CCR7 e L-selectina, residem
nos tecidos periféricos e mucosas, e respondem aos antigenos produzindo citocinas efetoras como
IFN-g, ou tornam-se citotóxicas rapidamente, mas não proliferam muito (esse está pronto para ter
uma resposta rápida e já erradicar)

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